| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-21页 |
| 前言 | 第21-28页 |
| 第一章 构建携带E1A基因与RNA干扰序列的表达框 | 第28-53页 |
| ·材料和主要试剂 | 第28-29页 |
| ·细胞株、菌种和载体 | 第28-29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-46页 |
| ·Survivin启动子的克隆 | 第29-35页 |
| ·E1A基因的克隆 | 第35-37页 |
| ·RNA干扰序列的构建 | 第37-40页 |
| ·表达框的酶切位点分析 | 第40-41页 |
| ·构建Survivin启动子-RNAi-SV40终止子表达框 | 第41-44页 |
| ·构建Survivin promoter-E1A-RNAi-SV40终止子表达框 | 第44-46页 |
| ·统计学处理 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-51页 |
| ·Survivin启动子的克隆 | 第46-47页 |
| ·E1A基因的克隆 | 第47-48页 |
| ·表达框的酶切位点分析结果 | 第48-49页 |
| ·构建Survivin启动子-RNAi-SV40终止子表达框 | 第49-50页 |
| ·构建Survivin启动子-E1A基因-RNAi-SV40终止子表达框 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·结论 | 第52-53页 |
| 第二章 携带RNA干扰序列的溶瘤腺病毒的构建 | 第53-74页 |
| ·材料和主要试剂 | 第53页 |
| ·细胞株、菌种和载体 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-64页 |
| ·构建重组腺病毒载体 | 第53-58页 |
| ·包装重组腺病毒 | 第58-62页 |
| ·重组腺病毒的PCR鉴定 | 第62-63页 |
| ·测定重组腺病毒滴度 | 第63-64页 |
| ·确定对肝癌细胞HepG2和HuH7的最佳感染复数(MOI) | 第64页 |
| ·统计学处理 | 第64页 |
| ·结果 | 第64-73页 |
| ·构建重组腺病毒载体 | 第64-68页 |
| ·重组腺病毒的PCR鉴定 | 第68-70页 |
| ·重组腺病毒滴度的测定 | 第70-73页 |
| ·最佳感染复数的确定 | 第73页 |
| ·讨论 | 第73页 |
| ·结论 | 第73-74页 |
| 第三章 重组溶瘤腺病毒的靶向抑制作用研究 | 第74-135页 |
| ·材料和主要试剂 | 第74-75页 |
| ·细胞株、菌种和载体 | 第74页 |
| ·主要试剂 | 第74-75页 |
| ·方法 | 第75-88页 |
| ·RT-PCR法测定感染前后相关基因的mRNA表达水平 | 第75-83页 |
| ·Real time PCR验证RT-PCR结果 | 第83-86页 |
| ·Western Blot法对相应蛋白进行检测 | 第86-88页 |
| ·统计学处理 | 第88页 |
| ·结果 | 第88-133页 |
| ·RT-PCR法测定感染前后相关基因的mRNA表达水平 | 第88-114页 |
| ·Real time PCR验证结果 | 第114-125页 |
| ·Western Blot法对相应蛋白进行检测的结果 | 第125-133页 |
| ·讨论 | 第133-134页 |
| ·结论 | 第134-135页 |
| 第四章 重组溶瘤腺病毒对肝癌细胞的杀伤作用研究 | 第135-144页 |
| ·材料和主要试剂 | 第135-136页 |
| ·细胞株、菌种和载体 | 第135页 |
| ·主要试剂 | 第135-136页 |
| ·方法 | 第136-137页 |
| ·光镜下观察肝癌细胞形态的变化 | 第136页 |
| ·重组溶瘤腺病毒对肝癌细胞的杀伤作用研究 | 第136-137页 |
| ·统计学处理 | 第137页 |
| ·结果 | 第137-142页 |
| ·光镜下观察肝癌细胞形态的变化 | 第137-139页 |
| ·重组溶瘤腺病毒对肝癌细胞的杀伤作用研究结果 | 第139-142页 |
| ·讨论 | 第142-143页 |
| ·结论 | 第143-144页 |
| 全文总结 | 第144-146页 |
| 附录 | 第146-167页 |
| 参考文献 | 第167-178页 |
| 缩写词简表 | 第178-179页 |
| 致谢 | 第179-180页 |
| 博士研究生期间发表论文情况 | 第180-182页 |
| 附件 | 第182页 |
