东北地区秸秆降解工程菌的选育及速腐菌剂的研制
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-31页 |
| ·概述 | 第12页 |
| ·东北地区秸秆综合利用现状 | 第12-15页 |
| ·秸秆速腐菌剂的研究进展 | 第15-18页 |
| ·降解木质纤维素类微生物菌种选育的研究进展 | 第18-20页 |
| ·木聚糖酶及pGAP-毕赤酵母表达系统研究进展 | 第20-24页 |
| ·纤维素酶及原生质体融合育种研究进展 | 第24-25页 |
| ·粟酒裂殖酵母表达系统及35S启动子的研究进展 | 第25-27页 |
| ·秸秆速腐菌剂的功能鉴定技术研究进展 | 第27-29页 |
| ·研究的目的及意义 | 第29-31页 |
| 第二章 秸秆降解菌菌种选育 | 第31-83页 |
| ·秸秆降解菌株的自然分离与鉴定 | 第31-42页 |
| ·材料与方法 | 第31-35页 |
| ·材料、培养基、试剂、仪器 | 第31-32页 |
| ·纤维素降解菌的筛选 | 第32页 |
| ·秸秆降解菌酶活测定 | 第32-33页 |
| ·秸秆降解菌菌株的鉴定 | 第33-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-42页 |
| ·纤维素降解菌的筛选结果 | 第35-36页 |
| ·纤维素酶活测定结果 | 第36-37页 |
| ·菌株的形态学检测结果 | 第37-38页 |
| ·分子生物学鉴定结果 | 第38-42页 |
| ·构建高效表达木聚糖酶的毕赤酵母菌株 | 第42-60页 |
| ·材料与方法 | 第43-54页 |
| ·材料、试剂、培养基、仪器 | 第43-44页 |
| ·克隆木聚糖酶xynB基因 | 第44-47页 |
| ·构建重组表达载体及鉴定 | 第47-49页 |
| ·pGAPz-xynB重组质粒转化毕赤酵母 | 第49-51页 |
| ·重组工程菌的鉴定 | 第51-53页 |
| ·重组工程菌的酶活测定 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-60页 |
| ·木聚糖酶基因xynB的克隆 | 第54-56页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第56-58页 |
| ·重组毕赤酵母工程菌鉴定 | 第58-59页 |
| ·DNS法测定重组工程菌酶活 | 第59-60页 |
| ·原生质体融合获得高产纤维素酶菌株 | 第60-71页 |
| ·材料与方法 | 第60-64页 |
| ·菌株、培养基、试剂、仪器 | 第60-61页 |
| ·菌种保存与选择 | 第61页 |
| ·原生质体的制备与再生 | 第61-62页 |
| ·原生质体的初级诱变、融合与筛选 | 第62页 |
| ·纤维素酶活测定 | 第62-63页 |
| ·融合子的遗传稳定性检验及鉴定 | 第63-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-71页 |
| ·原生质体的制备与再生 | 第64-66页 |
| ·原生质体的初级诱变、融合、筛选 | 第66-68页 |
| ·融合子产酶量、稳定性检验及融合子的鉴定 | 第68-71页 |
| ·构建高效表达纤维素酶的粟酒裂殖酵母菌株 | 第71-81页 |
| ·材料与方法 | 第71-77页 |
| ·材料、培养基、试剂、仪器 | 第71-72页 |
| ·35S.EGI.NOS基因的克隆 | 第72-73页 |
| ·粟酒裂殖酵母重组表达载体的构建及鉴定 | 第73-75页 |
| ·粟酒裂殖酵母重组表达载体质粒DNA的转化与鉴定 | 第75-77页 |
| ·重组酵母转化子的刚果红染色筛选及酶活测定 | 第77页 |
| ·结果与分析 | 第77-81页 |
| ·目的基因的克隆与表达载体的构建 | 第78-79页 |
| ·重组粟酒裂殖酵母筛选与鉴定 | 第79-80页 |
| ·纤维素酶基因在粟酒裂殖酵母中的表达 | 第80-81页 |
| ·小结与讨论 | 第81-83页 |
| 第三章 秸秆降解菌复合菌剂的制备与功能鉴定 | 第83-109页 |
| ·构建秸秆降解菌复合菌剂及其功能鉴定 | 第83-102页 |
| ·材料与方法 | 第84-90页 |
| ·菌种、培养基、试剂、仪器 | 第84-85页 |
| ·复合菌剂的组合筛选 | 第85-86页 |
| ·利用堆肥对秸秆速腐菌复合菌剂进行功能验证 | 第86-87页 |
| ·温度及pH测定 | 第87页 |
| ·微生物数量测定 | 第87页 |
| ·有效养分的测定 | 第87-90页 |
| ·结果与分析 | 第90-102页 |
| ·菌株间的拮抗关系测定及复合菌剂构建结果 | 第90-91页 |
| ·温度及pH值的测定结果与分析 | 第91-93页 |
| ·微生物数量测定与分析 | 第93-97页 |
| ·有效养分的测定结果与分析 | 第97-102页 |
| ·秸秆速腐菌活性干粉生产工艺优化及干燥剂的选择 | 第102-107页 |
| ·材料与方法 | 第102-104页 |
| ·菌种、培养基、试剂、仪器 | 第103页 |
| ·CMAP制备及参数检测 | 第103-104页 |
| ·干燥温度对活菌率的影响 | 第104页 |
| ·筛选干燥保护剂 | 第104页 |
| ·结果与分析 | 第104-107页 |
| ·干燥温度试验结果与分析 | 第105页 |
| ·筛选干燥保护剂试验结果与分析 | 第105-106页 |
| ·正交试验优化干燥保护剂的组合结果与分析 | 第106-107页 |
| ·小结与讨论 | 第107-109页 |
| 第四章 结论与展望 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-119页 |
| 附录 | 第119-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 个人简介 | 第125页 |
