| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写 | 第7-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-16页 |
| ·前言 | 第10页 |
| ·干细胞简介 | 第10-11页 |
| ·干细胞与神经发生 | 第11-12页 |
| ·神经过程中的基因表达调控 | 第12-13页 |
| ·FoxA2 转录因子简介 | 第13-14页 |
| ·本文构思 | 第14-16页 |
| ·研究目的 | 第14-15页 |
| ·研究方法及技术 | 第15-16页 |
| 第2章 构建稳定表达GFP-rFoxA2 融合蛋白的P19-GFP-rFoxA2 细胞株 | 第16-36页 |
| ·前言 | 第16页 |
| ·实验材料 | 第16-18页 |
| ·实验方法 | 第18-28页 |
| ·rFoxA2 引物设计及合成 | 第18页 |
| ·rFoxA2 基因的扩增及纯化 | 第18-19页 |
| ·重组质粒的构建 | 第19-23页 |
| ·脂质体转染 | 第23页 |
| ·P19-GFP-rFoxA2 细胞株的筛选 | 第23-24页 |
| ·P19-GFP-rFoxA2 细胞株的鉴定 | 第24-28页 |
| ·双荧光素酶报告基因实验 | 第28页 |
| ·实验结果 | 第28-34页 |
| ·rFoxA2 基因的扩增 | 第28-29页 |
| ·目的基因和载体质粒的酶切和连接 | 第29-30页 |
| ·质粒转化和筛选 | 第30-31页 |
| ·脂质体转染实验 | 第31页 |
| ·P19-GFP-rFoxA2 细胞的筛选 | 第31-32页 |
| ·P19-GFP-rFoxA2 细胞的鉴定 | 第32-33页 |
| ·共转染以及实验结果 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第3章 P19-GFP-rFoxA2 细胞株具有神经特性 | 第36-50页 |
| ·前言 | 第36页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-41页 |
| ·细胞培养 | 第37-38页 |
| ·碱性磷酸酶活性检测 | 第38-39页 |
| ·小鼠饲养管理 | 第39页 |
| ·动物解剖实验 | 第39-40页 |
| ·组织切片实验 | 第40-41页 |
| ·实验结果 | 第41-48页 |
| ·P19-GFP-rFoxA2 细胞中部分多能性丧失 | 第41-43页 |
| ·P19-GFP-rFoxA2 细胞中Prominin-1 阳性细胞数增多 | 第43-44页 |
| ·P19-GFP-rFoxA2 细胞具有部分神经干细胞特性 | 第44-46页 |
| ·动物模型实验 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第4章 FoxA2 调节NeuroD1 转录的研究 | 第50-66页 |
| ·前言 | 第50页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-60页 |
| ·RA 诱导P19 细胞实验方法 | 第51-52页 |
| ·RT-PCR 实验 | 第52-53页 |
| ·克隆NeuroD1 的启动子 | 第53-60页 |
| ·实验结果 | 第60-64页 |
| ·FoxA2 与NeuroD1 的关联性 | 第60-62页 |
| ·FoxA2 能调节NeuroD1 的启动子 | 第62-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录A 攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第73-74页 |
| 附录B 常用缓冲液和试剂配方 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
