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靶向Pim-3的双功能shRNA表达载体的构建及其对小鼠肝癌的治疗作用

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-14页
主要符号说明第14-17页
文献综述第17-37页
 一、TLR受体在抗肿瘤免疫中的作用第17-25页
  1.TLR受体的生物学特性第17-20页
  2.TLR通过活化NK细胞发挥抗肿瘤作用第20-22页
  3.TLR通过介导DC的活化发挥抗肿瘤作用第22-25页
 二、基于RNA干扰技术的抗肿瘤治疗第25-28页
  1.RNA干扰技术的特点第25-26页
  2.RNA干扰技术在肿瘤治疗中的应用第26-28页
 参考文献第28-37页
1.前言第37-40页
2.材料和方法第40-49页
   ·主要实验材料第40-48页
   ·主要仪器设备第48-49页
3.主要实验方法第49-64页
   ·细胞培养第49页
   ·细胞传代第49-50页
   ·细胞冻存第50页
   ·细胞复苏第50-51页
   ·细胞计数第51页
   ·pTZU6+1-shRNA表达载体构建第51-52页
   ·pSI REN双功能表达载体构建第52-53页
   ·小量中提质粒第53-54页
   ·用所提取的质粒转染细胞第54页
   ·细胞总RNA的提取第54-55页
   ·RT-PCR第55-56页
   ·Real-time PCR第56-57页
   ·Western blotting检测细胞蛋白水平第57-59页
   ·GCK法检测细胞増殖第59-60页
   ·ELISA检测细胞培养上清或小鼠血清中细胞因子的含量第60-61页
   ·流式细胞术检测细胞调亡第61页
   ·一步法TUNEL检测细胞调亡第61-62页
   ·MTT法测定NK细胞的杀伤活性第62页
   ·流式细胞术检测细胞表面分子第62-63页
   ·小鼠肝癌肿瘤模型的建立第63-64页
   ·统计学分析第64页
4.实验结果第64-91页
   ·Pim-3在肝癌中的表达第64-65页
   ·IE向Pim-3旳双功能载体旳构建第65-68页
   ·双功能载体促进对Hepa1-6细胞的调亡第68-74页
   ·双功能载体在体内明显抑制Hepa1-6的生长第74-77页
   ·NK细胞在双功能载体介导的抗肿瘤治疗中旳作用第77-84页
   ·双功能载体通过激活TLR7发挥免疫激活作用第84-91页
5.讨论第91-97页
6 总结及创新点第97-98页
参考文献第98-103页
攻读学位期间取得的研究成果第103-104页
待发表文章第104-174页
致谢第174-175页
学位论文评阅及答辩情况表第175页

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