符号说明 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
前言 | 第12-20页 |
·心理应激的概念 | 第12-13页 |
·心理应激动物模型的建立 | 第13-15页 |
·心理应激模型的建立 | 第13-14页 |
·应激模型的检测 | 第14-15页 |
·应激与 HPA 轴 | 第15页 |
·应激对雌性动物生殖的影响 | 第15-16页 |
·类固醇激素与卵泡发育 | 第16-17页 |
·IGF-1 与雌性生殖 | 第17页 |
·CRH 与雌性繁殖 | 第17-18页 |
·本文的主要研究内容 | 第18-20页 |
2 材料和方法 | 第20-29页 |
·主要试剂及配制 | 第20页 |
·实验动物饲养及小鼠超排处理 | 第20-21页 |
·束缚应激 | 第21页 |
·卵母细胞获取 | 第21页 |
·卵母细胞的体外成熟 | 第21页 |
·Hoechst33342 荧光染色检测卵丘细胞凋亡 | 第21-22页 |
·卵母细胞激活 | 第22页 |
·胚胎培养 | 第22页 |
·激素测量 | 第22-24页 |
·类固醇激素的测定(放射免疫测定法 RIA) | 第23页 |
·CRH 和 IGF-1 的测定(ELISA 法) | 第23-24页 |
·小鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)酶联免疫分析 | 第23-24页 |
·小鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)酶联免疫分析 | 第24页 |
·免疫组织化学方法检测卵巢中 CRHR1 蛋白的表达 | 第24-26页 |
·免疫组化用玻片的预处理 | 第24-25页 |
·小鼠卵巢石蜡切片的制备 | 第25页 |
·免疫组织化学染色 | 第25-26页 |
·小鼠卵巢和卵丘细胞中 CRHR1 蛋白的 western blot 检测 | 第26-28页 |
·Western blot 试剂及溶液 | 第26页 |
·样品蛋白的提取 | 第26-27页 |
·卵巢组织蛋白的提取 | 第26-27页 |
·卵丘细胞蛋白的提取 | 第27页 |
·SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27-28页 |
·抗原抗体的结合及显色 | 第28页 |
·小鼠卵母细胞中 CRH 免疫荧光检测 | 第28页 |
·数据分析 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-37页 |
·束缚应激对卵丘细胞凋亡的影响 | 第29-30页 |
·束缚应激对小鼠卵母细胞体外成熟和孤雌激活后胚胎发育的影响 | 第30页 |
·束缚应激对类固醇激素的影响 | 第30-32页 |
·束缚应激对小鼠卵巢和血清中皮质醇水平的影响 | 第30-31页 |
·束缚应激对小鼠卵巢和血清中雌二醇、孕酮以及睾酮水平的影响 | 第31-32页 |
·束缚应激对 IGF-1 的影响 | 第32-33页 |
·束缚应激对 CRH 的影响 | 第33-35页 |
·束缚应激对 CRHR1 的影响 | 第35-37页 |
·小鼠卵巢中 CRHR1 蛋白的免疫组织化学定位 | 第35-36页 |
·束缚应激对小鼠完整卵巢和卵丘细胞中 CRHR1 水平的影响 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-44页 |
·心理应激模型的有效性 | 第37页 |
·应激影响卵丘凋亡和胚胎发育能力 | 第37-38页 |
·应激影响类固醇激素的发生 | 第38-40页 |
·IGF-1 与卵丘凋亡 | 第40页 |
·应激与 CRH | 第40-41页 |
·应激与 CRHR1 | 第41-44页 |
5 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介以及发表论文 | 第59页 |