中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-20页 |
·细胞程序性死亡与细胞凋亡的特征 | 第12-14页 |
·细胞程序性死亡的特征 | 第12-13页 |
·细胞凋亡的特征 | 第13-14页 |
·细胞程序性死亡与胞凋亡区别 | 第14页 |
·凋亡相关基因的结构与功能 | 第14-18页 |
·BAG 基因的结构与功能 | 第14-16页 |
·DAD 基因的结构与功能 | 第16-17页 |
·HSP70 基因的结构与功能 | 第17-18页 |
·研究的目的和意义 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-33页 |
·试验材料 | 第20-21页 |
·试材 | 第20页 |
·菌株与质粒 | 第20页 |
·酶及生化试剂 | 第20页 |
·PCR 引物 | 第20-21页 |
·试验处理 | 第21-22页 |
·硫酸镉处理 | 第21页 |
·氯化钠(NaCl)处理 | 第21-22页 |
·聚乙二醇(PEG)处理 | 第22页 |
·试验方法 | 第22-33页 |
·平邑甜茶总 RNA 的提取 | 第22页 |
·RT-PCR 反转录合成 cDNA | 第22-23页 |
·MhBAG 全长序列的扩增 | 第23-28页 |
·MhDAD 全长序列的扩增 | 第28页 |
·MhHSP70 全长序列的扩增 | 第28页 |
·DNA 片段与克隆载体的连接 | 第28页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第28-29页 |
·碱法小量质粒 DNA 的提取 | 第29页 |
·凝胶电泳中 DNA 片段的回收 | 第29-30页 |
·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第30页 |
·基因测序 | 第30页 |
·pET-30a-MhBAG 表达载体的构建 | 第30页 |
·pBI121-正义(反义)表达载体的构建 | 第30-31页 |
·拟南芥转化及转化植株的 PCR 鉴定 | 第31页 |
·根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备与转化 | 第31-32页 |
·半定量 RT-PCR 分析 | 第32页 |
·生物信息学分析 | 第32页 |
·细胞凋亡率 FCM 测定 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-54页 |
·平邑甜茶 MhBAG 基因克隆与蛋白分析 | 第33-41页 |
·MhBAG 基因的克隆与序列分析 | 第33-34页 |
·MhBAG 编码蛋白的结构分析 | 第34-38页 |
·MhBAG 基因的原核表达分析 | 第38-39页 |
·平邑甜茶 MhBAG 表达载体的构建及转染拟南芥 | 第39-41页 |
·平邑甜茶 MhDAD 基因的克隆及蛋白分析 | 第41-46页 |
·MhDAD 基因的克隆与序列分析 | 第41-42页 |
·MhDAD 编码蛋白的结构分析 | 第42-45页 |
·MhDAD 基因表达载体的构建及拟南芥的遗传转化 | 第45-46页 |
·平邑甜茶 HSP70 基因的克隆与序列分析 | 第46-50页 |
·MhHSP70 基因的克隆与序列分析 | 第46-47页 |
·MhHSP70 编码蛋白的结构分析 | 第47-50页 |
·胁迫下抗凋亡相关基因的表达与细胞死亡特征 | 第50-54页 |
·胁迫下根系和叶片中 BAG 基因的表达 | 第50-51页 |
·胁迫下根系和叶片中 DAD 基因的表达 | 第51-52页 |
·胁迫下根系和叶片中 HSP70 基因的表达 | 第52-53页 |
·胁迫下根系和叶片细胞凋亡率变化 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
·平邑甜茶 MhBAG, MhDAD, MhHSP70 基因的表达特性 | 第54-55页 |
·MhBAG 原核表达体系的优化 | 第55-56页 |
·MhBAG 和 MhDAD 基因正反义表达载体的构建及转化拟南芥 | 第56-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读硕士学位期间完成论文情况 | 第69页 |