摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
引言 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-13页 |
·S-腺苷甲硫氨酸合成酶的编码基因 | 第9-10页 |
·S-腺苷甲硫氨酸合成酶的结构及催化机理 | 第10页 |
·S-腺苷甲硫氨酸参与多胺合成的途径 | 第10-11页 |
·S-腺苷甲硫氨酸的生物学意义 | 第11-12页 |
·转甲基 | 第12页 |
·转硫基 | 第12页 |
·转氨丙基 | 第12页 |
·本实验研究内容及意义 | 第12-13页 |
2 裙带菜S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAMS)的克隆、分析 | 第13-34页 |
·材料培养 | 第13页 |
·仪器设备及药品 | 第13-14页 |
·仪器设备 | 第13-14页 |
·试剂及耗材 | 第14页 |
·实验方法 | 第14-26页 |
·裙带菜配子体RNA 的提取与纯化 | 第14-15页 |
·反转录 | 第15-16页 |
·裙带菜SAMS 基因的克隆 | 第16-17页 |
·3′-Full RACE | 第17-19页 |
·5′-Full RACE | 第19-22页 |
·PCR 产物的纯化,亚克隆及测序 | 第22-25页 |
·实时荧光定量PCR | 第25-26页 |
·结果与分析 | 第26-32页 |
·裙带菜RNA 电泳检测 | 第26页 |
·裙带菜SAMS 基因的克隆 | 第26-27页 |
·菌落PCR 检测 | 第27页 |
·序列分析 | 第27-31页 |
·实时荧光定量PCR | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
3 裙带菜SAMS 基因的原核表达 | 第34-40页 |
·试剂配置 | 第34页 |
·操作步骤 | 第34-37页 |
·获得目的基因 | 第34-35页 |
·构建重组表达载体 | 第35页 |
·检测重组表达菌株 | 第35-36页 |
·诱导表达 | 第36页 |
·SDS-PAGE 电泳检测(采用垂直式电泳槽装置) | 第36-37页 |
·实验结果 | 第37-38页 |
·裙带菜SAMS 基因开放阅读框的克隆及重组质粒的构建 | 第37-38页 |
·SDS-PAGE 电泳检测 | 第38页 |
·实验讨论 | 第38-40页 |
4 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-44页 |
附录A 附录内容名称 | 第44-45页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第45-46页 |
致谢 | 第46页 |