| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 中英文对照 | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-15页 |
| 第二章 材料和方法 | 第15-33页 |
| ·实验对象 | 第15页 |
| ·实验细胞 | 第15页 |
| ·实验分组 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·主要仪器 | 第16-17页 |
| ·质粒载体CXCR4-shRNA的构建与宫颈癌细胞的内源验证 | 第17-32页 |
| ·基因信息 | 第17页 |
| ·shRNA序列设计与合成 | 第17-19页 |
| ·shRNA表达载体的构建 | 第19-24页 |
| ·细胞培养 | 第24-25页 |
| ·细胞转染 | 第25-26页 |
| ·稳定株筛选 | 第26页 |
| ·Real-time PCR检测宫颈癌细胞CXCR4mRNA含量 | 第26-28页 |
| ·Western blot检测宫颈癌细胞CXCR4蛋白含量 | 第28-32页 |
| ·宫颈癌细胞功能实验 | 第32页 |
| ·细胞划痕实验 | 第32页 |
| ·细胞粘附实验 | 第32页 |
| ·Wester blot检测CXCR4基因沉默对宫颈癌细胞MMP-9与VEGF-C表达的影响 | 第32页 |
| ·统计学分析 | 第32-33页 |
| 第三章 实验结果 | 第33-50页 |
| ·质粒载体CXCR4-shRNA与宫颈癌细胞的内源鉴定结果 | 第33-40页 |
| ·双链DNA oligo制备 | 第33页 |
| ·shRNA载体质粒酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·CXCR4-shRNA阳性克隆PCR的鉴定 | 第34页 |
| ·CXCR4-NC阳性克隆PCR的鉴定 | 第34-35页 |
| ·阳性克隆测序 | 第35-36页 |
| ·shRNA对Hela细胞和Caski细胞中CXCR4 mRNA表达的影响 | 第36-39页 |
| ·shRNA对Hela细胞和Caski细胞中CXCR4蛋白表达的影响 | 第39-40页 |
| ·细胞功能实验结果 | 第40-46页 |
| ·沉默CXCR4基因对宫颈癌细胞迁移能力的影响 | 第40-43页 |
| ·沉默CXCR4基因对宫颈癌细胞粘附能力的影响 | 第43-46页 |
| ·沉默CXCR4基因对宫颈癌细胞中MMP-9的表达影响 | 第46-47页 |
| ·沉默CXCR4基因对宫颈癌细胞中VEGF-C的表达影响 | 第47-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 综述 | 第63-72页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读硕士学位期间主要研究成果 | 第73页 |
