| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-28页 |
| ·单增李斯特菌的研究概况 | 第11-12页 |
| ·食源性致病微生物 | 第11页 |
| ·单增李斯特菌的生物学特征 | 第11页 |
| ·单增李斯特菌与食品及食物中毒的关系 | 第11-12页 |
| ·单增李斯特菌检测方法的研究概况 | 第12-16页 |
| ·传统培养检测方法 | 第12-14页 |
| ·免疫学检测方法 | 第14页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第14-16页 |
| ·环介导等温扩增技术概述 | 第16-24页 |
| ·LAMP反应引物设计 | 第16-17页 |
| ·LAMP扩增原理 | 第17-19页 |
| ·LAMP反应常用体系 | 第19页 |
| ·LAMP反应的特点 | 第19-20页 |
| ·LAMP反应的防污染措施 | 第20-21页 |
| ·LAMP实时浊度监测仪 | 第21-22页 |
| ·LAMP技术在食品安全领域的应用 | 第22-24页 |
| ·LAMP技术的应用展望 | 第24页 |
| ·LAMP技术的新型指示剂——Calcein－Mn2+ | 第24-26页 |
| ·新型指示剂的简介和反应原理 | 第24-25页 |
| ·新型指示剂的特点 | 第25-26页 |
| ·本课题的研究意义及研究内容 | 第26-28页 |
| ·本课题的研究背景及意义 | 第26页 |
| ·本课题的主要研究内容 | 第26-28页 |
| 第二章 环介导等温扩增技术检测单增李斯特菌的方法建立 | 第28-49页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·实验材料与设备 | 第28-31页 |
| ·实验菌株 | 第28-29页 |
| ·细菌培养基 | 第29-30页 |
| ·仪器与设备 | 第30页 |
| ·实验试剂 | 第30-31页 |
| ·细菌基因组 DNA 的提取方法 | 第31-32页 |
| ·菌株活化与培养 | 第31-32页 |
| ·细菌 DNA 的粗提 | 第32页 |
| ·细菌基因组 DNA 的精提 | 第32页 |
| ·PCR 反应体系和主要操作程序 | 第32-33页 |
| ·PCR 反应体系 | 第32-33页 |
| ·PCR 主要操作程序 | 第33页 |
| ·PCR 产物检测 | 第33页 |
| ·LAMP引物设计及引物筛选 | 第33-35页 |
| ·LAMP引物设计 | 第33-34页 |
| ·LAMP引物筛选 | 第34-35页 |
| ·LAMP反应条件的优化 | 第35页 |
| ·甜菜碱浓度对 LAMP反应扩增效果的影响 | 第35页 |
| ·Mg2+ 浓度对 LAMP反应扩增效果的影响 | 第35页 |
| ·Bst DNA 聚合酶添加量对 LAMP反应扩增效果的影响 | 第35页 |
| ·不同反应温度对 LAMP反应扩增效果的影响 | 第35页 |
| ·LAMP引物特异性评价实验 | 第35页 |
| ·LAMP引物灵敏度评价实验 | 第35-36页 |
| ·LAMP法检测单增李斯特菌基因组 DNA 的灵敏度 | 第35-36页 |
| ·LAMP法检测细菌纯培养物的灵敏度 | 第36页 |
| ·LAMP扩增反应的结果判定 | 第36页 |
| ·LAMP反应实时浊度监测仪数据分析 | 第36页 |
| ·LAMP产物的荧光分析 | 第36页 |
| ·实验结果与讨论 | 第36-48页 |
| ·3 套 LAMP引物的初步筛选 | 第36-38页 |
| ·LAMP反应条件的优化 | 第38-43页 |
| ·LAMP引物的特异性评价实验 | 第43页 |
| ·LAMP引物灵敏度评价实验 | 第43-48页 |
| ·本章小结与讨论 | 第48-49页 |
| 第三章 应用环介导等温扩增技术检测食品中的单增李斯特菌 | 第49-57页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·食物样品 | 第49页 |
| ·细菌培养基 | 第49-50页 |
| ·传统培养方法检测食品中的单增李斯特菌 | 第50页 |
| ·人工污染鲜鸡肉样品的前处理方法 | 第50-51页 |
| ·结合前增菌的 LAMP法检测单增李斯特菌 | 第51页 |
| ·实验结果与讨论 | 第51-55页 |
| ·LAMP方法检测人工污染单增李斯特菌肉类食品的检出限 | 第51-53页 |
| ·结合前增菌的 LAMP法检测单增李斯特菌 | 第53-54页 |
| ·LAMP方法检测实际肉类样品中的单增李斯特菌 | 第54-55页 |
| ·本章小结与讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 新型指示剂Calcein-Mn~(2+)的研发 | 第57-65页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·实验试剂 | 第57-58页 |
| ·Calcein 与 Mn~(2+)的浓度比优化 | 第58页 |
| ·Calcein－Mn~(2+)指示剂对 LAMP扩增速度的影响 | 第58页 |
| ·Calcein－Mn~(2+)指示剂对 LAMP法灵敏度的影响 | 第58页 |
| ·实验结果与讨论 | 第58-64页 |
| ·Calcein 与 Mn~(2+)的浓度比优化 | 第58-60页 |
| ·Calcein－Mn~(2+)指示剂对 LAMP扩增速度的影响 | 第60-61页 |
| ·Calcein－Mn~(2+)指示剂对 LAMP法灵敏度的影响 | 第61-63页 |
| ·实验小结 | 第63-64页 |
| ·本章小结 | 第64-65页 |
| 结论与展望 | 第65-69页 |
| 参考文献 | 第69-79页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 附件 | 第81页 |
