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提高转基因青蒿中青蒿素含量的新策略研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-16页
图表目录第16-18页
英文缩略语索引第18-20页
第一章 绪论第20-38页
   ·青蒿及青蒿素简介第20-21页
   ·青蒿素的生物合成途径第21-26页
     ·青蒿素的生物合成时期和部位第21-22页
     ·生物体内FPP 合成的共同途径第22-23页
     ·青蒿中青蒿酸的特殊合成途径第23-25页
     ·利用基因工程提高青蒿中青蒿素含量的研究第25-26页
   ·分子检测技术在转基因药用植物中的应用第26-34页
     ·外源基因整合水平上的检测第26-30页
     ·外源基因转录水平上的检测第30-33页
     ·外源基因翻译水平上的检测第33-34页
   ·植物多倍体育种及杂交育种研究进展第34-37页
     ·植物多倍体育种研究进展第34-36页
     ·遗传转化基因聚合分子育种进展第36-37页
   ·本研究的目的及实验技术路线第37-38页
第二章 转基因青蒿的分子检测和青蒿素含量测定第38-54页
   ·材料与试剂第38-41页
     ·植物材料第38页
     ·菌株与质粒第38页
     ·酶与试剂盒第38-39页
     ·抗体与分子量标记第39页
     ·寡核苷酸引物第39-40页
     ·部分试剂的配制第40-41页
     ·其他试剂第41页
   ·方法第41-49页
     ·CTAB 法小量抽提青蒿叶片总DNA第41-42页
     ·青蒿总RNA 的提取与检测第42-45页
     ·转基因青蒿的PCR 检测第45页
     ·半定量RT-PCR第45-46页
     ·青蒿总蛋白的SDS-PAGE 电泳第46-47页
     ·Western Blot 检测第47-48页
     ·转基因青蒿青蒿素含量检测第48-49页
   ·结果与分析第49-52页
     ·转基因青蒿的PCR 检测第49页
     ·半定量RT-PCR第49-50页
     ·Western Blot 检测蛋白表达第50-51页
     ·转基因青蒿中青蒿素含量的变化第51-52页
   ·小结和讨论第52-54页
第三章 青蒿的四倍体育种第54-68页
   ·材料与试剂第54-56页
     ·植物材料第54-55页
     ·寡核苷酸引物第55-56页
     ·其他试剂第56页
   ·方法第56-58页
     ·流式细胞仪鉴定青蒿倍性第56-57页
     ·不同倍性青蒿中青蒿素含量的检测第57页
     ·不同倍性青蒿叶形态和解剖特征观察第57-58页
     ·不同倍性青蒿总RNA 的提取与检测第58页
     ·半定量RT-PCR 分析关键基因的表达情况第58页
     ·Western 杂交检测FPS 蛋白的表达情况第58页
   ·结果第58-64页
     ·流式细胞仪鉴定青蒿倍性第58-59页
     ·不同倍性青蒿形态和叶解剖特征变化第59-61页
     ·不同倍性青蒿中不同生长时期青蒿素含量变化第61-62页
     ·不同倍性青蒿中青蒿素生物合成途径基因调控第62-63页
     ·共转HMGR 和FPS 转基因四倍体形态及青蒿素变化第63-64页
   ·小结和讨论第64-68页
第四章 杂交聚合育种第68-78页
   ·材料与试剂第68-70页
     ·植物材料第68-69页
     ·菌株与质粒第69页
     ·酶与试剂盒第69页
     ·寡核苷酸引物第69页
     ·其他试剂第69-70页
   ·方法第70-71页
     ·三基因聚合株系的获得第70页
     ·三基因聚合株系的PCR 检测第70-71页
     ·三基因聚合株系的青蒿素含量检测第71页
   ·结果第71-75页
     ·三基因聚合青蒿的PCR 检测第71-73页
     ·三基因聚合青蒿的农艺性状观察与分析第73-74页
     ·三基因聚合青蒿的青蒿素含量检测第74-75页
   ·小结和讨论第75-78页
第五章 总结与展望第78-83页
参考文献第83-98页
附录第98-99页
致谢第99-101页
攻读学位期间发表的学术论文第101页

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