| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| ·铁蛋白研究概况 | 第11页 |
| ·铁蛋白的结构与特性 | 第11-13页 |
| ·铁蛋白的亚基组成及组织分布 | 第13-15页 |
| ·动物铁蛋白 | 第13-14页 |
| ·植物铁蛋白 | 第14页 |
| ·细菌铁蛋白 | 第14-15页 |
| ·铁蛋白基因的表达与调控 | 第15-16页 |
| ·铁蛋白的生物学功能 | 第16-19页 |
| ·调节铁代谢平衡 | 第16页 |
| ·抗氧化胁迫 | 第16-17页 |
| ·免疫防御 | 第17-18页 |
| ·参与机体生长发育 | 第18-19页 |
| ·铁蛋白研究热点 | 第19页 |
| ·铁蛋白与疾病诊断 | 第19页 |
| ·铁蛋白与转基因 | 第19页 |
| ·铁蛋白在贝类中的研究 | 第19-21页 |
| ·本研究的内容、目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 池蝶蚌铁蛋白两个亚基基因cDNA全序列克隆 | 第23-41页 |
| ·材料与方法 | 第23-30页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·池蝶蚌血细胞总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·RNA纯度与完整性检测 | 第24页 |
| ·总RNA的DNase处理 | 第24-25页 |
| ·SMART cDNA的合成 | 第25页 |
| ·池蝶蚌ferritin cDNA部分片段的获得 | 第25页 |
| ·RACE-PCR方法克隆ferritin cDNA全长 | 第25-27页 |
| ·PCR扩增产物的检测 | 第27页 |
| ·目的片段的回收、克隆与测序 | 第27-29页 |
| ·ferritin cDNA全长的序列拼接及序列分析 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-38页 |
| ·总RNA的提取 | 第30页 |
| ·文库筛选获得ferritin cDNA片段 | 第30-31页 |
| ·RACE-PCR扩增cDNA全长 | 第31-32页 |
| ·池蝶蚌HsFer-1和HsFer-2基因序列分析 | 第32-38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| 第三章 池蝶蚌铁蛋白基因的组织表达及嗜水气单胞菌诱导后的特异性表达 | 第41-60页 |
| ·实验材料和方法 | 第41-45页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·嗜水气单胞菌诱导菌液的制备 | 第41-42页 |
| ·池蝶蚌HsFer-1和HsFer-2基因的组织表达谱分析 | 第42-44页 |
| ·嗜水气单胞菌诱导池蝶蚌铁蛋白表达分析 | 第44-45页 |
| ·实验结果 | 第45-57页 |
| ·总RNA提取 | 第45页 |
| ·反转录效果检测 | 第45页 |
| ·引物扩增效率的检测 | 第45-47页 |
| ·池蝶蚌HsFer-1和HsFer-2基因的组织表达谱分析 | 第47-50页 |
| ·嗜水气单胞菌诱导池蝶蚌肝胰腺组织中铁蛋白基因表达分析 | 第50-52页 |
| ·嗜水气单胞菌诱导池蝶蚌性腺组织中铁蛋白基因表达分析 | 第52-55页 |
| ·嗜水气单胞菌诱导池蝶蚌血细胞中铁蛋白基因表达分析 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-60页 |
| 第四章 池蝶蚌铁蛋白两个亚基基因的原核表达及多克隆抗体制备 | 第60-80页 |
| ·材料与方法 | 第60-70页 |
| ·质粒与菌株 | 第60页 |
| ·引物设计 | 第60-61页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第61-65页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第65-67页 |
| ·Bradford法测定纯化的融合蛋白浓度 | 第67页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第67-68页 |
| ·ELISA间接法测定多克隆抗体效价 | 第68-69页 |
| ·Western blot检测抗体特异性 | 第69-70页 |
| ·实验结果 | 第70-78页 |
| ·目的表达片段PCR扩增 | 第70-71页 |
| ·阳性重组质粒的筛选 | 第71-72页 |
| ·重组质粒双酶切 | 第72页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第72-73页 |
| ·融合蛋白溶解性分析 | 第73-74页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第74-75页 |
| ·纯化蛋白浓度的测定 | 第75-76页 |
| ·ELISA间接法测定多克隆抗血清效价 | 第76-77页 |
| ·抗体特异性分析 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-80页 |
| 第五章 结论与展望 | 第80-82页 |
| ·结论 | 第80-81页 |
| ·进一步工作的方向 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-92页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第92页 |
