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低磷和铝毒胁迫下大豆γ-ECS和hGSHS基因的克隆及表达分析

摘要第1-6页
Abstracts第6-8页
缩写及符号说明第8-13页
1 前言第13-24页
   ·大豆生长的土壤条件第13-14页
   ·土壤中的磷及其对作物的影响第14-16页
     ·土壤中磷的状况第14页
     ·低磷胁迫对植物的影响第14-15页
     ·植物耐低磷胁迫机制的研究第15-16页
   ·土壤中的铝及其对作物的影响第16-19页
     ·土壤中铝的存在形式第16页
     ·铝对植物的毒害作用第16-17页
     ·植物的耐铝毒机制第17-19页
   ·谷胱甘肽合成代谢与环境胁迫第19-22页
     ·(h)GSH的生物合成第20-21页
     ·γ-ECS和(h)GSHS基因与植物的抗逆性第21页
     ·γ-ECS和(h)GSHS基因的研究进展第21-22页
   ·半定量RT-PCR技术的应用第22页
   ·研究目的和意义第22-24页
2 材料和方法第24-32页
   ·植物材料第24-25页
     ·材料培养方法第24-25页
   ·试验技术路线第25-26页
   ·试验方法第26-32页
     ·γ-ECS和hGSHS酶活性的测定第26页
       ·实验试剂第26页
       ·仪器设备第26页
       ·实验方法第26页
       ·实验数据的处理第26页
     ·BX10根和叶片γ-ECS和hGSHS基因的克隆第26-31页
       ·实验试剂第26-27页
       ·实验仪器及设备第27页
       ·大豆根和叶片总RNA的提取第27-28页
       ·反转录第28-29页
       ·引物设计第29页
       ·PCR扩增第29页
       ·目的片段的回收第29-30页
       ·目的片段与PMD18-T载体Vector的连接第30页
       ·DNA片段的克隆第30-31页
     ·γ-ECS和hGSHS基因的RT-PCR半定量分析第31-32页
3 结果与分析第32-43页
   ·酶活性的测定结果第32-35页
     ·低磷和铝毒胁迫下,大豆γ-ECS活性的变化第32-33页
     ·低磷和铝毒胁迫下,大豆hGSHS活性的变化第33-35页
   ·基因克隆和基因表达分析第35-43页
     ·大豆根和叶片总RNA的质量检测第35页
     ·γ-ECS和hGSHS基因中间片段的获得第35-36页
     ·γ-ECS和hGSHS基因中间片段的克隆和测序第36-38页
     ·γ-ECS和hGSHS基因PCR条件的优化第38-40页
       ·RT-PCR最佳退火温度的筛选第38-39页
       ·RT-PCR最佳循环次数的筛选第39-40页
     ·低磷和铝毒胁迫下γ-ECS和hGSHS基因的半定量表达分析第40-43页
4 全文讨论与结论第43-51页
   ·全文讨论第43-49页
     ·谷胱甘肽合成代谢与植物的抗逆性第43-48页
       ·低磷和铝毒胁迫下大豆根和叶片中γ-ECS和hGSHS酶活性的比较第44-45页
       ·低磷和铝毒胁迫下大豆根和叶片中γ-ECS和hGSHS基因的表达差异第45-47页
       ·γ-ECS和hGSHS基因的表达调控第47-48页
     ·半定量RT-PCR技术第48-49页
   ·全文结论第49页
   ·问题与展望第49-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-59页
附录A第59-60页
附录B第60-65页

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