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迟钝爱德华氏菌耐药质粒pEIB202与waaL基因的功能鉴定及毒力相关分析

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第1章 文献综述第10-23页
   ·水产养殖及其病害第10页
   ·迟钝爱德华氏菌——一种重要的水产养殖致病菌第10-14页
     ·迟钝爱德华氏菌的分类学及流行病学第10-11页
     ·迟钝爱德华氏菌的生化特性及血清分型第11-13页
     ·迟钝爱德华氏菌致病机制的研究状况第13-14页
   ·水产养殖病害的抗生素防治与耐药性质粒(R质粒)的转移第14-16页
     ·R质粒及其抗药性机制第14-15页
     ·R质粒中抗性基因的扩散与进化第15页
     ·R质粒与毒力相关分析第15-16页
   ·脂多糖与病原菌的致病性第16-22页
     ·概述第16-17页
     ·LPS的结构组成第17-18页
     ·LPS的合成第18-21页
     ·LPS与细菌毒力相关分析第21-22页
   ·本课题的主要内容和意义第22-23页
第2章 迟钝爱德华氏菌大质粒pEIB202序列及特性分析第23-29页
   ·引言第23页
   ·实验材料第23-24页
     ·菌株及培养基第23页
     ·主要仪器、试剂盒及材料第23-24页
   ·实验方法第24-25页
     ·质粒拷贝数测定第24页
     ·质粒接合效率测定第24-25页
   ·实验结果第25-27页
     ·质粒pEIB202全序列分析第25-26页
     ·质粒拷贝数测定第26页
     ·质粒接合效率测定第26-27页
   ·讨论第27-28页
   ·小结第28-29页
第3章 迟钝爱德华氏菌大质粒pEIB202的消除及其对表型的影响第29-39页
   ·引言第29页
   ·实验材料第29-31页
     ·菌株、引物及培养基第29-31页
     ·主要试剂、试剂盒及材料第31页
   ·实验方法第31-35页
     ·sacB标记质粒的构建第33页
     ·pEIB202质粒的消除第33页
     ·质粒消除株EIB202△p的验证第33-34页
     ·E.tarda EIB202△p的表型分析第34-35页
   ·实验结果第35-37页
     ·pEIB202质粒缺失验证第35页
     ·EIB202△p表型分析第35-37页
   ·讨论第37-38页
   ·小结第38-39页
第4章 迟钝爱德华氏菌LPS合成相关基因序列分析第39-45页
   ·引言第39页
   ·分析材料及软件第39-40页
   ·分析结果第40-43页
     ·LPS脂质A合成相关基因分析第40页
     ·LPS核心寡糖合成相关基因分析第40-41页
     ·LPS O-多糖合成相关基因分析第41-42页
     ·waaL基因分析第42-43页
   ·讨论第43-44页
   ·本章小结第44-45页
第5章 迟钝爱德华氏菌waaL基因的功能鉴定第45-60页
   ·引言第45-46页
   ·实验材料第46-48页
     ·菌株、引物及培养基第46-47页
     ·主要试剂、试剂盒及材料第47-48页
   ·实验方法第48-53页
     ·△waaL突变株的构建第48-50页
     ·回补菌株waaL~+的构建第50页
     ·压力应激性的测定第50-51页
     ·外膜蛋白提取第51页
     ·脂多糖提取第51-52页
     ·菌体沉降实验第52页
     ·溶血动态曲线的测定第52页
     ·侵染及内化第52-53页
     ·LD_(50)测定第53页
     ·竞争性实验第53页
     ·生物被膜实验第53页
   ·实验结果第53-57页
     ·E.tarda EIB202Δp ΔwaaL突变株及回补株waaL~+的验证第53-54页
     ·压力应激性第54页
     ·溶血素及生物被膜第54-55页
     ·细胞侵染、LD_(50)与竞争性实验第55-57页
     ·脂多糖与外膜蛋白第57页
     ·细胞沉降第57页
   ·讨论第57-59页
   ·本章小结第59-60页
第6章 结论与展望第60-62页
   ·结论第60-61页
   ·展望第61-62页
参考文献第62-68页
攻读硕士学位期间发表的论文第68-69页
致谢第69页

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