| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 简称 | 第9-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-25页 |
| ·结肠癌发生发展的分子机制 | 第10-11页 |
| ·miRNA基因 | 第11-22页 |
| ·miRNA基因的发现和特征 | 第11-12页 |
| ·miRNA的作用方式 | 第12-13页 |
| ·miRNA的转录和表达 | 第13页 |
| ·miRNA与发育 | 第13-14页 |
| ·miRNA与细胞周期 | 第14页 |
| ·miRNA与信号传导 | 第14-15页 |
| ·miRNA与细胞凋亡 | 第15-16页 |
| ·miRNA与细胞分化 | 第16-17页 |
| ·miRNA与代谢 | 第17页 |
| ·miRNA与疾病 | 第17-18页 |
| ·miRNA与结肠癌 | 第18-22页 |
| ·SNP突变位点的筛查方法 | 第22-25页 |
| ·序列特异性的内切酶 | 第22-23页 |
| ·检测DNA构象的改变 | 第23页 |
| ·使用DNA特异结合探针 | 第23页 |
| ·测序法 | 第23-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-32页 |
| ·仪器 | 第25页 |
| ·实验试剂及配方 | 第25-27页 |
| ·miRNA序列基因组序列的查询 | 第27页 |
| ·引物设计 | 第27-28页 |
| ·人结肠癌细胞的培养 | 第28页 |
| ·培养细胞的基因组抽提 | 第28-29页 |
| ·结肠癌组织样品DNA的抽提 | 第29页 |
| ·miRNA基因片段的获取 | 第29-30页 |
| ·克隆进入小RNA表达载体 | 第30-31页 |
| ·PCR产物的直接测序 | 第31页 |
| ·Sanger法测序 | 第31页 |
| ·RNA二级结构预测 | 第31-32页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第32-44页 |
| ·仅得到正确克隆的miRNA | 第32-34页 |
| ·同时得到正确克隆和突变克隆的miRNA | 第34页 |
| ·仅得到突变克隆的miRNA | 第34-42页 |
| ·对突变miRNA在另外两个细胞系和一个病人样本的验证 | 第35-38页 |
| ·hsa-mir-532及其突变 | 第38-40页 |
| ·hsa-mir-618及其SNP | 第40-41页 |
| ·hsa-mir-137及其VNTR序列扩增 | 第41-42页 |
| ·X染色体上的miRNA | 第42-44页 |
| 第4章 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53-64页 |