| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| ·草甘膦概况 | 第13-17页 |
| ·草甘膦的特性 | 第13-14页 |
| ·草甘膦的特点 | 第14页 |
| ·草甘膦的作用机理 | 第14-16页 |
| ·草甘膦的降解途径 | 第16-17页 |
| ·抗草甘膦作物主要研究进展 | 第17-22页 |
| ·抗草甘膦植物的来源 | 第17-18页 |
| ·转基因抗草甘膦作物的获得 | 第18-20页 |
| ·抗草甘膦转基因作物研究进展 | 第20-21页 |
| ·我国抗草甘膦转基因研究进展 | 第21-22页 |
| ·植物遗传转化及转基因作物发展概况 | 第22-25页 |
| ·植物遗传转化方法 | 第22-24页 |
| ·转基因作物研究进展 | 第24-25页 |
| ·转基因作物产生的效益 | 第25页 |
| ·研究目的与意义 | 第25-26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| 第二章 棉花抗草甘膦基因原核载体的构建及蛋白表达检测 | 第27-40页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·质粒和菌株 | 第27页 |
| ·工具酶和化学试剂 | 第27页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-34页 |
| ·原核表达载体pET-HW199 的构建流程图 | 第27-28页 |
| ·质粒 DNA 的微量提取（微量碱裂解法） | 第28-30页 |
| ·质粒 DNA 的大量提取 | 第30页 |
| ·DNA 的限制性内切酶反应体系 | 第30-31页 |
| ·目的 DNA 片段的试剂盒回收 | 第31页 |
| ·粘端连接 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·重组质粒 DNA 对大肠杆菌 DH5a 的转化、筛选及鉴定 | 第32页 |
| ·重组载体质粒pET-HW199 在 BL21(DE3)中蛋白的诱导表达 | 第32页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第32-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-38页 |
| ·棉花抗草甘膦基因原核表达载体构建 | 第34-37页 |
| ·原核表达载体pET-HW199 在大肠杆菌 BL21(DE3)中的诱导表达 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 棉花抗草甘膦基因植物表达载体的构建 | 第40-52页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·质粒和菌株 | 第40页 |
| ·工具酶和化学试剂 | 第40页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-45页 |
| ·植物表达载体pBIHW199 的构建 | 第40-42页 |
| ·质粒 DNA 的微量提取（微量碱裂解法） | 第42页 |
| ·质粒 DNA 的大量提取 | 第42页 |
| ·DNA 的限制性内切酶酶切反应体系 | 第42-43页 |
| ·目的 DNA 片段的试剂盒回收 | 第43页 |
| ·粘端连接 | 第43页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第43页 |
| ·重组质粒 DNA 对大肠杆菌 DH5a 的转化、筛选及鉴定 | 第43-44页 |
| ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态的制备 | 第44页 |
| ·重组质粒 DNA 转化农杆菌（冻融法） | 第44页 |
| ·农杆菌质粒 DNA 提取 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-51页 |
| ·棉花抗草甘膦基因植物表达载体的构建 | 第45-50页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌及重组子的鉴定 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 第四章 烟草转化及草甘膦基因的抗性鉴定 | 第52-68页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·植物材料和菌株 | 第52页 |
| ·实验试剂 | 第52页 |
| ·PCR 引物 | 第52页 |
| ·实验仪器设备 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-58页 |
| ·农杆菌的活化培养 | 第52-53页 |
| ·烟草遗传转化实验(王关林等，2002) | 第53页 |
| ·烟草基因组 DNA 提取(CTAB 法，Stewart and Via,1993) | 第53-54页 |
| ·转基因烟草 PCR 检测 | 第54-55页 |
| ·Southern blotting | 第55-57页 |
| ·转基因烟草离体叶片草甘膦抗性实验 | 第57页 |
| ·转基因烟草植株对草甘膦抗性实验 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-65页 |
| ·烟草遗传转化 | 第58-60页 |
| ·转基因烟草的获得 | 第60-62页 |
| ·转化烟草植株的 PCR 检测 | 第62页 |
| ·转基因烟草 Southern blotting 检测 | 第62-63页 |
| ·转基因烟草离体叶片草甘膦抗性实验 | 第63-64页 |
| ·转基因烟草植株的草甘膦抗性实验 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-68页 |
| ·烟草遗传转化 | 第65-66页 |
| ·抗草甘膦烟草的分子检测和抗性鉴定 | 第66-68页 |
| 第五章 全文结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简历 | 第81页 |
