英文缩略词表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
前言 | 第12-15页 |
第一章 HIV-1 整合酶142-288 位氨基酸片段蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 | 第15-53页 |
引言 | 第15-16页 |
材料与方法 | 第16-37页 |
1 材料 | 第16-18页 |
·研究对象 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16-17页 |
·主要仪器 | 第17-18页 |
2 实验方法 | 第18-37页 |
·构建GST-IN 142-288 氨基酸表达质粒 | 第18-23页 |
·质粒pGEX-4T1-GST- IN142-288 的诱导表达及IN142-288 蛋白纯化 | 第23-24页 |
·His-IN wt 的诱导表达及蛋白纯化 | 第24-26页 |
·T7-IN wt 的诱导表达及蛋白纯化 | 第26-27页 |
·免疫小鼠 | 第27页 |
·单克隆抗体的制备 | 第27-30页 |
·ELISA | 第30-31页 |
·SDS-PAGE 与Western-blot 法 | 第31-33页 |
·IP | 第33-34页 |
·免疫荧光染色 | 第34-36页 |
·单克隆抗体的亚型鉴定 | 第36-37页 |
结果 | 第37-48页 |
3 结果 | 第37-48页 |
·IN 142-288 c-DNA 的扩增 | 第37页 |
·pGEX-4T1-IN142-288 质粒的鉴定 | 第37-38页 |
·GST-IN 142-288 蛋白的表达及纯化 | 第38-40页 |
·His-IN 的表达及纯化 | 第40-41页 |
·T7-IN 的表达及纯化 | 第41页 |
·BALB/c 小鼠免疫后血清中抗体的测定 | 第41-42页 |
·ELISA 法对杂交瘤细胞培育上清中抗体的测定 | 第42-43页 |
·Western-blot 法对杂交瘤克隆细胞培育上清中抗体的测定 | 第43-44页 |
·IP 法测定杂交瘤克隆细胞培养上清中的抗体与T7-IN 的相互作用 | 第44页 |
·免疫荧光染色法测定杂交瘤克隆细胞培养上清中的抗体 | 第44-47页 |
·单克隆抗体亚型测定 | 第47-48页 |
讨论 | 第48-52页 |
小结 | 第52-53页 |
第二章 整合酶与importi117 207-836位及importin 7 442-836 位氨基酸片段蛋白间相互作用的探讨 | 第53-68页 |
引言 | 第53-54页 |
材料与方法 | 第54-58页 |
1 实验材料 | 第54页 |
·研究对象 | 第54页 |
·主要试剂 | 第54页 |
·主要仪器 | 第54页 |
2. 实验方法 | 第54-58页 |
·构建sVCMVin-T7-imp7 442-836,sVCMVin-T7-imp7 207-836 质粒 | 第54-55页 |
·HEK293T 细胞的培养 | 第55页 |
·质粒转染HEK293T 细胞(磷酸钙沉淀法) | 第55-56页 |
·IP | 第56-57页 |
·SDS-PAGE 与Western-blot | 第57-58页 |
结果 | 第58-63页 |
3 结果 | 第58-63页 |
·sVCMVin-T7-imp7 207-836 与sVCMVin-T7-imp7 442-836 质粒的构建 | 第58-59页 |
·HIV-1 IN 与imp7 207-836、imp7 442-836 之间的相互作用 | 第59-63页 |
讨论 | 第63-67页 |
小结 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
综述 | 第78-98页 |