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MDV部分流行株致病基因分析及疫苗免疫保护评价

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 引言第11-26页
   ·鸡马立克氏病及鸡马立克氏病病毒概述第11-13页
   ·马立克氏病病毒基因组第13-18页
     ·马立克氏病病毒基因组结构第13-15页
     ·鸡马立克氏病致病基因第15-18页
   ·马立克氏病病毒致病机理第18-20页
     ·早期溶细胞感染第19页
     ·潜伏感染第19页
     ·第二次溶细胞感染第19页
     ·转化第19-20页
   ·流行病学第20-21页
   ·马立克氏病病毒的分离检测方法第21-24页
     ·病毒的分离第21页
     ·病毒的检测方法第21-24页
   ·研究的目的和意义第24-26页
2 材料与方法第26-35页
   ·病毒第26页
   ·SPF 鸡胚、SPF 雏鸡第26页
   ·载体与受体菌第26页
   ·主要试剂第26-27页
   ·主要仪器设备第27页
   ·引物第27-28页
   ·MDV 致病基因的研究第28-31页
     ·鸡胚成纤维细胞的制备第28页
     ·病毒培养第28页
     ·病毒基因组总DNA 提取第28页
     ·致病基因的PCR 扩增第28-29页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第29页
     ·PCR 产物的纯化回收第29-30页
     ·PCR 产物的连接与转化第30页
     ·碱裂解法提取质粒第30页
     ·重组质粒的鉴定第30-31页
     ·Meq、RLORF-4 基因序列的测序与分析第31页
   ·3 株分离毒株的致病性试验第31-32页
     ·免疫第31页
     ·攻毒第31-32页
     ·AGP 试验和PCR 方法检测试验样本第32页
   ·3 株分离毒株病毒体内增值试验第32-35页
     ·荧光定量PCR阳性标准品的制备第32-33页
     ·荧光定量PCR标准品曲线的构建第33页
     ·荧光定量PCR检测试验样品第33页
     ·病毒体内增值分析第33-35页
3 结果第35-56页
   ·MDV 致病基因的分析第35-51页
     ·病毒基因组总DNA第35页
     ·Meq 基因的扩增第35-36页
     ·RLORF-4 基因扩增第36页
     ·132bp 重复序列的扩增第36-37页
     ·重组质粒的鉴定第37页
     ·Meq 基因的测序第37-49页
     ·RLORF-4 基因的测序第49-50页
     ·分离毒株 132bp 重复序列拷贝数第50-51页
   ·3 株分离毒株的致病性试验第51页
     ·AGP 试验和PCR 方法检测样本结果第51页
     ·免疫攻毒和致病力试验结果第51页
   ·3 株分离毒株病毒体内增值分析第51-56页
     ·Meq 基因及Ovo 基因PCR 扩增第51-52页
     ·Meq 基因及Ovo 基因鉴定第52-53页
     ·荧光定量PCR 标准曲线构建第53-54页
     ·荧光定量PCR 对分离毒株的检测分析第54-56页
4 讨论第56-60页
   ·MDV 致病基因的研究第56-58页
   ·3 株分离毒株的致病性第58页
   ·3 株分离毒株病毒体内增值分析第58-60页
5 结论第60-61页
致谢第61-62页
参考文献第62-72页
附录第72-77页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第77页

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