MDV部分流行株致病基因分析及疫苗免疫保护评价
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-26页 |
| ·鸡马立克氏病及鸡马立克氏病病毒概述 | 第11-13页 |
| ·马立克氏病病毒基因组 | 第13-18页 |
| ·马立克氏病病毒基因组结构 | 第13-15页 |
| ·鸡马立克氏病致病基因 | 第15-18页 |
| ·马立克氏病病毒致病机理 | 第18-20页 |
| ·早期溶细胞感染 | 第19页 |
| ·潜伏感染 | 第19页 |
| ·第二次溶细胞感染 | 第19页 |
| ·转化 | 第19-20页 |
| ·流行病学 | 第20-21页 |
| ·马立克氏病病毒的分离检测方法 | 第21-24页 |
| ·病毒的分离 | 第21页 |
| ·病毒的检测方法 | 第21-24页 |
| ·研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-35页 |
| ·病毒 | 第26页 |
| ·SPF 鸡胚、SPF 雏鸡 | 第26页 |
| ·载体与受体菌 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·引物 | 第27-28页 |
| ·MDV 致病基因的研究 | 第28-31页 |
| ·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第28页 |
| ·病毒培养 | 第28页 |
| ·病毒基因组总DNA 提取 | 第28页 |
| ·致病基因的PCR 扩增 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第29-30页 |
| ·PCR 产物的连接与转化 | 第30页 |
| ·碱裂解法提取质粒 | 第30页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第30-31页 |
| ·Meq、RLORF-4 基因序列的测序与分析 | 第31页 |
| ·3 株分离毒株的致病性试验 | 第31-32页 |
| ·免疫 | 第31页 |
| ·攻毒 | 第31-32页 |
| ·AGP 试验和PCR 方法检测试验样本 | 第32页 |
| ·3 株分离毒株病毒体内增值试验 | 第32-35页 |
| ·荧光定量PCR阳性标准品的制备 | 第32-33页 |
| ·荧光定量PCR标准品曲线的构建 | 第33页 |
| ·荧光定量PCR检测试验样品 | 第33页 |
| ·病毒体内增值分析 | 第33-35页 |
| 3 结果 | 第35-56页 |
| ·MDV 致病基因的分析 | 第35-51页 |
| ·病毒基因组总DNA | 第35页 |
| ·Meq 基因的扩增 | 第35-36页 |
| ·RLORF-4 基因扩增 | 第36页 |
| ·132bp 重复序列的扩增 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第37页 |
| ·Meq 基因的测序 | 第37-49页 |
| ·RLORF-4 基因的测序 | 第49-50页 |
| ·分离毒株 132bp 重复序列拷贝数 | 第50-51页 |
| ·3 株分离毒株的致病性试验 | 第51页 |
| ·AGP 试验和PCR 方法检测样本结果 | 第51页 |
| ·免疫攻毒和致病力试验结果 | 第51页 |
| ·3 株分离毒株病毒体内增值分析 | 第51-56页 |
| ·Meq 基因及Ovo 基因PCR 扩增 | 第51-52页 |
| ·Meq 基因及Ovo 基因鉴定 | 第52-53页 |
| ·荧光定量PCR 标准曲线构建 | 第53-54页 |
| ·荧光定量PCR 对分离毒株的检测分析 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-60页 |
| ·MDV 致病基因的研究 | 第56-58页 |
| ·3 株分离毒株的致病性 | 第58页 |
| ·3 株分离毒株病毒体内增值分析 | 第58-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 附录 | 第72-77页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第77页 |