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氟致体外培养牛脾脏淋巴细胞凋亡机理的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 引言第10-20页
   ·地氟病的研究简史第10-11页
   ·氟的生物学效应第11页
   ·氟免疫毒性的研究进展第11-15页
     ·氟对免疫器官的影响第11-12页
     ·氟对细胞免疫的影响第12-14页
     ·氟对体液免疫的影响第14页
     ·氟对细胞因子的影响第14-15页
   ·氟毒性机制的研究进展第15-19页
     ·氟与氧化损伤第15-17页
     ·氟与DNA 损伤第17-18页
     ·氟与基因表达第18-19页
   ·试验目的和意义第19-20页
2 材料与方法第20-28页
   ·试验主要仪器与试剂第20-21页
     ·主要仪器第20页
     ·主要试剂第20-21页
   ·牛脾脏淋巴细胞的制备、培养及处理第21页
   ·检测项目与方法第21-27页
     ·牛脾脏淋巴细胞活性及细胞半数抑制浓度(IC_(50))的检测第21-22页
     ·牛脾脏淋巴细胞凋亡的形态学观察第22页
     ·牛脾脏淋巴细胞内NO 代谢的检测第22-23页
     ·牛脾脏淋巴细胞内抗氧化功能的检测第23页
     ·牛脾脏淋巴细胞DNA 损伤的检测第23-24页
     ·流式细胞术检测细胞线粒体膜电位(Δψm)第24-25页
     ·Caspase-3 和Caspase-9 活性的检测第25页
     ·牛脾脏淋巴细胞内[Ca~(2+)]i 的检测第25-26页
     ·半定量RT-PCR 法测定牛脾脏淋巴细胞内CaM、Caspase-3 mRNA 的表达第26-27页
   ·试验数据的分析与统计第27-28页
3 结果与分析第28-46页
   ·牛脾脏淋巴细胞活性及细胞半数抑制浓度(IC_(50))检测结果第28-30页
     ·台盼蓝排斥实验及MTT 法检测细胞活性和IC_(50) 检测结果第28-29页
     ·牛脾脏淋巴细胞培养上清液中LDH 活性的检测结果第29-30页
   ·牛脾脏淋巴细胞凋亡的形态学观察检测结果第30-33页
     ·倒置显微镜观察细胞凋亡形态结果第30-31页
     ·AO/EB 双荧光染色检测结果第31-33页
   ·牛脾脏淋巴细胞内NO 代谢的检测结果第33-34页
     ·牛脾脏淋巴细胞内NO 含量的检测结果第33页
     ·牛脾脏淋巴细胞内NOS 活性的检测结果第33-34页
   ·牛脾脏淋巴细胞内抗氧化功能的检测结果第34-36页
     ·牛脾脏淋巴细胞内GSH-Px 活性的检测结果第34页
     ·牛脾脏淋巴细胞内SOD 活性的检测结果第34-35页
     ·牛脾脏淋巴细胞内MDA 含量的检测结果第35-36页
   ·牛脾脏淋巴细胞DNA 损伤的检测结果第36-37页
     ·DNA Ladder 检测结果第36页
     ·DPC 系数的检测结果第36-37页
   ·牛脾脏淋巴细胞ΔΨM 变化的检测结果第37-38页
   ·牛脾脏淋巴细胞CASPASE-3 和CASPASE-9 活性的检测结果第38-39页
     ·牛脾脏淋巴细胞Caspase-3 活性的检测结果第38页
     ·牛脾脏淋巴细胞Caspase-9 活性的检测结果第38-39页
   ·牛脾脏淋巴细胞内[Ca~(2+)]I 的检测结果第39-40页
   ·半定量RT-PCR 法测定牛脾脏淋巴细胞内CAM、CASPASE-3 MRNA 的表达的检测结果第40-46页
     ·牛脾脏淋巴细胞内总RNA 提取的结果第40-41页
     ·牛脾脏淋巴细胞β-actin、CaM 与Caspase-3 基因片段的克隆第41-43页
     ·牛脾脏淋巴细胞内CaM mRNA 表达的检测结果第43-44页
     ·牛脾脏淋巴细胞内Caspase-3 mRNA 表达的检测结果第44-46页
4 讨论第46-53页
   ·氟对牛脾脏淋巴细胞IC_(50) 及淋巴细胞活性的影响第46-47页
     ·氟对牛脾脏淋巴细胞IC_(50) 的影响第46页
     ·氟对牛脾脏淋巴细胞上清液中LDH 活性的影响第46-47页
   ·氟对牛脾脏淋巴细胞凋亡的影响第47-48页
     ·氟对牛脾脏淋巴细胞的形态影响第47页
     ·氟对牛脾脏淋巴细胞DNA 断裂的影响第47-48页
   ·氟致牛脾脏淋巴细胞凋亡机制第48-53页
     ·氟对牛脾脏淋巴细胞内抗氧化功能及NO 代谢的影响第48-50页
     ·氟对牛脾脏淋巴细胞Δψm 的影响第50-51页
     ·氟对牛脾脏淋巴细胞内钙稳态的影响第51-52页
     ·氟对牛脾脏淋巴细胞内 Caspase-3 mRNA 表达及 Caspase-3、Caspase-9活性的影响第52-53页
5 结论第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-63页
攻读硕士期间发表的学术论文第63页

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