| 中文摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-7页 |
| 符号说明 | 第7-9页 |
| 第一章 综述 SHP1 在细胞信号转导中的作用 | 第9-21页 |
| 概述 | 第9页 |
| 1 SHP1 结构及活化机制 | 第9-11页 |
| 2 SHP1 的生物学功能 | 第11-14页 |
| ·SHP1 在造血细胞中的作用 | 第11-12页 |
| ·SHP1 在某些实体瘤细胞中的作用 | 第12-14页 |
| 3 SHP1 的作用底物 | 第14-16页 |
| ·底物捕获法检测PTPs 底物原理 | 第14-16页 |
| ·已成功捕获的SHP1 底物 | 第16页 |
| 总结 | 第16-17页 |
| 参考文献 | 第17-21页 |
| 第二章 底物捕获法检测SHP1 在 MAPK 信号通路中的靶蛋白 | 第21-43页 |
| 1 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·方法 | 第23-32页 |
| ·底物捕获突变点的选取 | 第23页 |
| ·点突变 PCR 原理 | 第23-24页 |
| ·真核表达各突变型 SHP1-Flag 的构建 | 第24-29页 |
| ·SHP1-Flag 及其突变体的表达 | 第29-31页 |
| ·MAPK 信号通路中SHP1-Flag 靶蛋白的检测 | 第31-32页 |
| 2 结果 | 第32-39页 |
| ·真核表达SHP1-Flag 底物捕获突变体的构建 | 第32-38页 |
| ·SHP1-Flag 及其底物捕获突变体的表达 | 第38页 |
| ·SHP1 在MAPK 信号通路中作用底物的检测 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| 第三章 稳定表达SHP1CSDA-FLAG 细胞株的构建 | 第43-53页 |
| 1 材料与方法 | 第43-48页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| 2 结果 | 第48-50页 |
| ·重组质粒 pcDNA5/FRT-SHP1CSDA-Flag 的构建及鉴定 | 第48页 |
| ·潮霉素 B 工作浓度的确定 | 第48页 |
| ·亚克隆的挑选 | 第48-49页 |
| ·β-半乳糖苷酶筛选阳性克隆 | 第49页 |
| ·Western blot 鉴定阳性克隆 | 第49页 |
| ·SHP1CSDA-Flag 相互作用 90KD 蛋白的检测 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
