中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-10页 |
1 绪论 | 第10-16页 |
·MGF 的研究进展 | 第10-14页 |
·MGF 的发现 | 第10页 |
·IGF 的基因结构 | 第10-12页 |
·MGF 可能的作用机制 | 第12-13页 |
·国内外研究现状 | 第13-14页 |
·问题的提出和研究意义 | 第14页 |
·问题的提出 | 第14页 |
·研究意义 | 第14页 |
·本文的研究内容和研究目标 | 第14-16页 |
·研究内容 | 第14页 |
·研究目标 | 第14-16页 |
2 MGF 原核表达载体的构建 | 第16-22页 |
·引言 | 第16页 |
·材料与方法 | 第16-19页 |
·材料 | 第16页 |
·重组质粒的构建 | 第16-17页 |
·重组质粒的鉴定 | 第17-19页 |
·实验结果 | 第19-20页 |
·pMAL/MGF 重组质粒的菌落PCR 鉴定 | 第19-20页 |
·pMAL/MGF 重组质粒的双酶切鉴定 | 第20页 |
·测序鉴定 | 第20页 |
·讨论 | 第20-21页 |
·本章小结 | 第21-22页 |
3 目的基因的表达及蛋白的纯化 | 第22-33页 |
·引言 | 第22页 |
·目的基因的表达 | 第22-24页 |
·主要仪器及材料 | 第22页 |
·MGF 表达条件的优化 | 第22-23页 |
·实验结果 | 第23-24页 |
·目的蛋白MGF 的纯化 | 第24-30页 |
·实验材料及试剂 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-27页 |
·实验结果 | 第27-30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
·本章小结 | 第32-33页 |
4 MGF 蛋白对成骨细胞增殖的影响 | 第33-38页 |
·引言 | 第33页 |
·实验方案 | 第33-35页 |
·成骨细胞株MC3T3-E1 的培养 | 第33-34页 |
·MTT 法检测MGF 对细胞增殖的影响 | 第34页 |
·流式细胞仪检测细胞周期 | 第34页 |
·数据分析 | 第34-35页 |
·试验结果 | 第35-36页 |
·不同浓度MGF 对细胞增殖影响的结果 | 第35页 |
·流式细胞仪分析的细胞周期结果 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
·本章小结 | 第37-38页 |
5 MGF 蛋白对成骨细胞分化的影响 | 第38-47页 |
·引言 | 第38页 |
·实验方案 | 第38-42页 |
·MC3T3-E1 细胞的培养 | 第38页 |
·MGF 蛋白对成骨细胞ALP 活力的影响 | 第38-39页 |
·MGF 蛋白对成骨细胞OPN、cbfα-1 及ColⅠ基因的影响 | 第39-42页 |
·数据分析 | 第42页 |
·实验结果 | 第42-45页 |
·ALP 活力测定结果 | 第42-43页 |
·MGF 对OPN、cbfα-1 及ColⅠ基因的影响 | 第43-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
·本章小结 | 第46-47页 |
6 结论和展望 | 第47-49页 |
·主要结论 | 第47-48页 |
·后期研究展望 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
附录 | 第54-56页 |