猪睾丸和附睾精子冷冻—解冻处理对体外受精和多精受精的影响
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 动物体外受精技术研究的历史与现状 | 第12-13页 |
| 2 动物体外受精技术的操作程序 | 第13-15页 |
| ·成熟卵母细胞的获得 | 第13页 |
| ·精子的体外获能 | 第13-14页 |
| ·卵子的体外受精 | 第14页 |
| ·受精卵的体外培养 | 第14-15页 |
| ·体外受精胚胎的移植 | 第15页 |
| 3 常用的体外受精方法 | 第15-16页 |
| ·传统的液滴体外受精(IVF) | 第15页 |
| ·细管 IVF | 第15-16页 |
| ·精卵短时间 IVF | 第16页 |
| ·精子墙 VIF | 第16页 |
| ·精子注射法 | 第16页 |
| 4 哺乳动物受精的作用机制 | 第16-17页 |
| ·精卵识别的分子基础 | 第16-17页 |
| ·卵激活的分子机制 | 第17页 |
| ·原核的形成和融合 | 第17页 |
| 5 影响体外受精的因素与存在的问题 | 第17-19页 |
| ·影响体外受精的因素 | 第17-18页 |
| ·体外受精技术存在的问题 | 第18-19页 |
| 6 多精子受精 | 第19-23页 |
| ·阻止多精受精的机理 | 第19-21页 |
| ·影响多精受精的因素 | 第21-23页 |
| 7 前景和展望 | 第23-25页 |
| ·深入研究卵母细胞成熟和胚胎发育的分子机理 | 第24页 |
| ·加强腔前卵泡培养的研究 | 第24页 |
| ·加强体外受精与其他生物技术的结合 | 第24-25页 |
| 实验部分 | 第25-41页 |
| 引言 | 第25-26页 |
| 第一部分: 材料现用具 | 第26-31页 |
| 1 主要仪器、器具及主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器、器具 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| 2 本实验涉及的培养液 | 第27-31页 |
| ·猪胚胎体外培养液 | 第27-28页 |
| ·猪卵母细胞体外成熟基础培养基 | 第28页 |
| ·洗卵液及抽卵液 | 第28-29页 |
| ·体外受精液中涉及的培养液 | 第29-30页 |
| ·猪输卵管上皮细胞制备 | 第30页 |
| ·胰蛋白酶液 | 第30页 |
| ·Hoechst33342储液的配制 | 第30-31页 |
| 第二部分: 实验方法与实验设计 | 第31-35页 |
| 1 实验方法 | 第31-33页 |
| ·精液采集 | 第31页 |
| ·冷冻精液制备 | 第31-32页 |
| ·猪卵母细胞的收集及体外成熟 | 第32-33页 |
| ·猪卵母细胞的体外受精 | 第33页 |
| ·胚胎体外培养 | 第33页 |
| ·多精子受精现象观察 | 第33页 |
| 2 实验设计 | 第33-34页 |
| ·猪四种不同来源精子活率、顶体完整率比较 | 第33页 |
| ·猪四种不同来源精子体外受精效果观察 | 第33-34页 |
| ·猪四种不同来源精子体外多精子受精现象观察 | 第34页 |
| 3 统计分析 | 第34-35页 |
| 第三部分: 实验结果 | 第35-37页 |
| 1 猪四种不同来源精子活率、顶体完整率比较 | 第35页 |
| 2 猪四种不同来源精子体外受精效果观察 | 第35-36页 |
| 3 猪四种不同来源精子体外多精子受精现象观察 | 第36-37页 |
| 第四部分: 分析讨论 | 第37-40页 |
| 1 猪四种不同来源精子活率、顶体完整率比较 | 第37页 |
| 2 不同来源精子体外受精效果观察 | 第37-38页 |
| 3 不同来源精子体外多精子受精现象观察 | 第38-40页 |
| 第五部分: 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 附录 | 第47-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 发表文章 | 第52页 |
