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利用荧光共振能量转移技术研究细胞凋亡分子机制

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
目录第9-14页
第一章 细胞凋亡第14-23页
   ·Caspases与细胞凋亡第14-15页
   ·线粒体与细胞凋亡第15-20页
     ·线粒体孔道第15-17页
       ·线粒体膜通透性转移孔道的开放第15-16页
       ·线粒体外膜特异性孔道的形成第16页
       ·线粒体电子传递链与活性氧的作用第16-17页
     ·凋亡因子第17-19页
       ·细胞色素 C—凋亡起始因子第17-18页
       ·AIF—凋亡诱导因子第18页
       ·Smac/DIABLO蛋白第18-19页
     ·Bcl-2家族蛋白第19-20页
   ·细胞凋亡的信号转导途径第20-22页
     ·死亡受体途径(外源性途径)第20-21页
     ·线粒体途径第21页
     ·内质网途径第21-22页
   ·结语第22-23页
第二章 激光共聚焦扫描显微镜和荧光共振能量转移技术及其应用的简介第23-28页
   ·激光共聚焦显微镜的原理及应用第23-25页
     ·激光共焦扫描显微镜的原理第23-24页
     ·激光共聚焦扫描显微镜系统在生物、医学中的应用第24-25页
       ·细胞内离子分析第24页
       ·病变细胞的研究第24-25页
       ·癌细胞间通讯研究第25页
   ·荧光共振能量转移(FRET)技术的简介第25-28页
第三章 利用激光共聚焦显微镜观察凋亡过程中凋亡蛋白亚细胞定位的改变第28-36页
   ·引言第28-29页
   ·材料与方法第29-30页
     ·材料第29页
     ·方法第29-30页
       ·GFP-BimL质粒构建第29页
       ·细胞培养第29页
       ·瞬时转染第29-30页
       ·紫外线照射第30页
       ·激光共聚焦扫描显微镜设置第30页
   ·结果第30-34页
     ·重组质粒pEGFP-BimL的构建及鉴定第30-31页
     ·紫外照射诱导细胞凋亡中Bax转位到线粒体第31-33页
     ·紫外照射诱导的细胞凋亡中BimL转位到线粒体第33-34页
   ·讨论第34-36页
第四章 利用 FRET技术研究紫外照射诱导细胞凋亡中 BimL和 Bax两者的关系第36-44页
   ·引言第36-37页
   ·材料与方法第37-38页
     ·材料第37页
     ·方法第37-38页
       ·细胞培养第37页
       ·瞬时转染第37页
       ·激光共聚焦扫描显微镜成像第37-38页
   ·结果第38-42页
     ·紫外照射诱导细胞凋亡中BimL和 Bax的动态关系第38-40页
     ·JNK活性的抑制阻碍了BimL的转位,推迟了Bax的转位和随后发生的细胞凋亡第40-42页
   ·讨论第42-44页
第五章 利用FRET技术在活细胞内研究红景天甙对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的抑制作用第44-58页
   ·引言第44-45页
   ·材料和方法第45-48页
     ·材料第45页
       ·药物和试剂第45页
       ·仪器第45页
     ·方法第45-48页
       ·质粒第45-46页
       ·细胞培养和药物处理第46页
       ·Cell Counting Kit-8测定不同浓度红景天甙的细胞毒性第46-47页
       ·Cell Counting Kit-8测定红景天甙提高Aβ_(25-35)处理PC12细胞的存活率第47页
       ·细胞形态变化的观测第47页
       ·Hoechst33342染色第47页
       ·瞬时转染第47-48页
       ·30μM Aβ_(25-35)处理细胞和激光共聚焦扫描显微镜成像第48页
     ·统计学分析第48页
   ·结果第48-56页
     ·红景天甙抑制 Aβ_(25-35)的神经毒性第48-51页
       ·不同浓度红景天甙的细胞毒性第48-49页
       ·红景天甙提高 Aβ_(25-35)处理 PC12细胞的存活率第49-50页
       ·红景天甙抑制 Aβ_(25-35)诱导 PC12细胞凋亡的形态改变第50-51页
     ·Aβ_(25-35)诱导caspase-3活性的动态检测第51-53页
     ·红景天甙抑制 Aβ_(25-35)诱导caspase-3活性的动态检测第53-54页
     ·Aβ_(25-35)诱导 PC12细胞凋亡不依赖caspase-8的激活第54-56页
   ·讨论第56-58页
第六章 展望第58-59页
结束语第59-60页
参考文献第60-66页
发表论文第66-67页
致谢第67-68页

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