| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩写说明 | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-20页 |
| ·柿属植物概述 | 第12-13页 |
| ·研究进展 | 第13-15页 |
| ·组织培养 | 第13-14页 |
| ·分子标记 | 第14-15页 |
| ·基因工程育种 | 第15页 |
| ·植物耐盐胁迫基因工程研究进展 | 第15-17页 |
| ·盐旱胁迫对植物生长的影响 | 第15-16页 |
| ·植物耐盐抗旱机理 | 第16页 |
| ·植物耐盐胁迫基因工程的研究方法 | 第16-17页 |
| ·果树遗传转化研究进展 | 第17-19页 |
| ·木本果树的遗传转化方法 | 第18页 |
| ·影响木本果树遗传转化的因素 | 第18页 |
| ·存在的主要问题及展望 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第2章 油柿和君迁子高频离体再生体系的建立 | 第20-34页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-22页 |
| ·油柿休眠芽初代培养 | 第20页 |
| ·油柿下胚轴培养与不定芽诱导 | 第20-21页 |
| ·油柿叶片培养与不定芽诱导 | 第21页 |
| ·君迁子叶片培养与不定芽诱导 | 第21页 |
| ·增殖培养 | 第21-22页 |
| ·生根及移栽 | 第22页 |
| ·数据分析 | 第22页 |
| ·结果与分析 | 第22-30页 |
| ·胚轴和叶片培养诱导不定芽 | 第22-23页 |
| ·基础培养基种类对不定芽再生的影响 | 第23-25页 |
| ·不同激素配比对不定芽再生的影响 | 第25-27页 |
| ·叶片切段与放置方式对君迁子不定芽再生的影响 | 第27-28页 |
| ·前期暗培养时间对叶片不定芽再生的影响 | 第28页 |
| ·组培苗生根 | 第28-30页 |
| ·讨论 | 第30-34页 |
| ·外植体的选择 | 第30页 |
| ·种及品种的差异性 | 第30-31页 |
| ·基础培养基 | 第31页 |
| ·激素 | 第31-32页 |
| ·暗培养时间 | 第32页 |
| ·叶片的部位与放置方式 | 第32-33页 |
| ·外植体褐变 | 第33页 |
| ·生根 | 第33-34页 |
| 第3章 甘露醇-1-磷酸脱氢酶基因的克隆及其原核表达 | 第34-45页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·菌株与质粒 | 第34页 |
| ·主要生化试剂 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-37页 |
| ·耐盐微生物筛选及细菌培养 | 第34页 |
| ·细菌总DNA的提取 | 第34页 |
| ·引物设计与PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·pUCm-T载体克隆与测序 | 第35页 |
| ·原核表达载体pET28a-M的构建 | 第35-36页 |
| ·MTLD融合蛋白的表达与可溶性分析 | 第36页 |
| ·Western blot | 第36页 |
| ·质谱分析 | 第36页 |
| ·含重组质粒的大肠杆菌耐盐性分析 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-42页 |
| ·耐盐微生物的筛选与目的基因的扩增 | 第37页 |
| ·pUCm-T载体克隆与序列分析 | 第37-38页 |
| ·mtlD基因原核表达载体的构建 | 第38页 |
| ·融合蛋白的表达与可溶性分析 | 第38-40页 |
| ·Western blot | 第40页 |
| ·质谱分析 | 第40-41页 |
| ·转化子的耐盐性 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| ·基因克隆 | 第42-43页 |
| ·影响蛋白表达的因素 | 第43页 |
| ·mtlD基因的来源 | 第43-45页 |
| 第4章 甘露醇-1-磷酸脱氢酶基因转化模式植物烟草及表达研究 | 第45-53页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·植物材料 | 第45页 |
| ·菌株与质粒 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-48页 |
| ·mtlD植物表达载体的构建与工程菌株的获得 | 第45-46页 |
| ·烟草叶片再生体系的建立与完善 | 第46页 |
| ·农杆菌介导mtlD基因转化烟草 | 第46-47页 |
| ·转基因植株的GUS检测 | 第47页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第47-48页 |
| ·阳性植株抗盐性分析 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-51页 |
| ·工程菌株的获得 | 第48-49页 |
| ·烟草叶片再生体系的建立与完善 | 第49页 |
| ·转基因烟草的再生 | 第49页 |
| ·转基因植株GUS检测结果 | 第49-50页 |
| ·转基因植株PCR检测结果 | 第50页 |
| ·阳性植株抗盐性分析 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 第5章 甘露醇-1-磷酸脱氢酶基因转化油柿的初步研究 | 第53-64页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·菌株与质粒 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-55页 |
| ·转化条件的探索与优化 | 第53-54页 |
| ·转基因植株PCR检测 | 第54-55页 |
| ·培养条件 | 第55页 |
| ·数据分析 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-60页 |
| ·油柿叶片的抗生素敏感性试验 | 第55-56页 |
| ·筛选压力对油柿不定芽再生的影响 | 第56-57页 |
| ·预培养时间的确定 | 第57页 |
| ·菌液浓度和侵染时间的优化 | 第57-58页 |
| ·共培养时间的选择 | 第58-59页 |
| ·AS浓度的确定 | 第59页 |
| ·油柿转基因植株的PCR检测 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-64页 |
| ·农杆菌的选择 | 第60-61页 |
| ·外植体的预培养、接种及与农杆菌的共培养 | 第61-62页 |
| ·外植体脱菌及选择培养 | 第62页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第62-64页 |
| 第6章 结论与展望 | 第64-65页 |
| ·结论 | 第64页 |
| ·展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 附图 | 第72-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
