中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
文献综述部分 | 第11-39页 |
第一章 胚胎干细胞基本特性和研究现状 | 第11-25页 |
1 ES细胞的基本特征 | 第11-16页 |
·ES细胞的基本生物学特征 | 第11页 |
·ES细胞种系传递能力和遗传性能的可操作性 | 第11-12页 |
·ES细胞体外培养条件 | 第12-13页 |
·Es细胞特异标记物 | 第13-14页 |
·哺乳动物ES细胞研究进展 | 第14-16页 |
2 EGFP是优秀的示踪因子 | 第16-19页 |
·GFP的来源、生化特性及其发光机理 | 第16-17页 |
·GFP的突变体 | 第17页 |
·GFP的细胞毒性 | 第17-18页 |
·ES-EGFP细胞的应用意义 | 第18-19页 |
参考文献 | 第19-25页 |
第二章 ES细胞基因转染研究进展 | 第25-39页 |
1 ES细胞基因转染的意义 | 第25-26页 |
2 影响转染方法选择的因素 | 第26-27页 |
·免疫原性 | 第26页 |
·细胞毒性 | 第26页 |
·专业技术 | 第26页 |
·时间 | 第26-27页 |
·成本 | 第27页 |
3 稳定转染与瞬时转染的比较 | 第27页 |
4 悬浮细胞与贴壁细胞的比较 | 第27-28页 |
5 ES细胞基因转染方法 | 第28-34页 |
·病毒转染法 | 第28-30页 |
·阳离子脂质体法 | 第30页 |
·物理转导法 | 第30-34页 |
参考文献 | 第34-39页 |
试验研究部分 | 第39-67页 |
第三章 小鼠胚胎干细胞饲养层制备体系的优化 | 第39-49页 |
1 材料和方法 | 第39-44页 |
·材料 | 第39-41页 |
·方法 | 第41-44页 |
·统计方法 | 第44页 |
2 试验结果 | 第44-46页 |
·制取方法对MEF生长性能的影响 | 第44-45页 |
·温度条件对MEF生长性能的影响 | 第45页 |
·支原体污染对MEF生长性能的影响 | 第45页 |
·丝裂霉素最佳处理时间的研究 | 第45-46页 |
·ES细胞在MEF饲养层细胞上的生长 | 第46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-49页 |
第四章 小鼠ES-D3细胞系pN1-EGFP瞬时转染效率的研究 | 第49-67页 |
1 材料和方法 | 第50-57页 |
·材料 | 第50页 |
·主要试剂配方 | 第50-51页 |
·方法 | 第51-57页 |
·统计分析 | 第57页 |
2 结果 | 第57-62页 |
·小鼠ES细胞的生长行为 | 第57页 |
·小鼠ES细胞鉴定 | 第57-58页 |
·血清对ES细胞冻存效率的影响 | 第58-60页 |
·质粒的制备 | 第60-61页 |
·不同转染法对小鼠ES细胞转染效率的影响 | 第61-62页 |
3 讨论 | 第62-65页 |
·D3-ES细胞的培养、鉴定 | 第63页 |
·血清对D3-ES细胞冻存效率的影响 | 第63-64页 |
·质粒的提取和鉴定 | 第64页 |
·不同转染方法对ES细胞转染效率的影响 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-67页 |
全文结论 | 第67-68页 |
图版 | 第68-71页 |
图版说明 | 第71-72页 |
EXPLANATION OF FIGURES | 第72-73页 |
硕士期间论文发表情况 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |