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小鼠ES细胞饲养层制备与ES细胞EGFP瞬时转染效率的研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
缩略语表第10-11页
文献综述部分第11-39页
 第一章 胚胎干细胞基本特性和研究现状第11-25页
  1 ES细胞的基本特征第11-16页
   ·ES细胞的基本生物学特征第11页
   ·ES细胞种系传递能力和遗传性能的可操作性第11-12页
   ·ES细胞体外培养条件第12-13页
   ·Es细胞特异标记物第13-14页
   ·哺乳动物ES细胞研究进展第14-16页
  2 EGFP是优秀的示踪因子第16-19页
   ·GFP的来源、生化特性及其发光机理第16-17页
   ·GFP的突变体第17页
   ·GFP的细胞毒性第17-18页
   ·ES-EGFP细胞的应用意义第18-19页
  参考文献第19-25页
 第二章 ES细胞基因转染研究进展第25-39页
  1 ES细胞基因转染的意义第25-26页
  2 影响转染方法选择的因素第26-27页
   ·免疫原性第26页
   ·细胞毒性第26页
   ·专业技术第26页
   ·时间第26-27页
   ·成本第27页
  3 稳定转染与瞬时转染的比较第27页
  4 悬浮细胞与贴壁细胞的比较第27-28页
  5 ES细胞基因转染方法第28-34页
   ·病毒转染法第28-30页
   ·阳离子脂质体法第30页
   ·物理转导法第30-34页
  参考文献第34-39页
试验研究部分第39-67页
 第三章 小鼠胚胎干细胞饲养层制备体系的优化第39-49页
  1 材料和方法第39-44页
   ·材料第39-41页
   ·方法第41-44页
   ·统计方法第44页
  2 试验结果第44-46页
   ·制取方法对MEF生长性能的影响第44-45页
   ·温度条件对MEF生长性能的影响第45页
   ·支原体污染对MEF生长性能的影响第45页
   ·丝裂霉素最佳处理时间的研究第45-46页
   ·ES细胞在MEF饲养层细胞上的生长第46页
  3 讨论第46-48页
  参考文献第48-49页
 第四章 小鼠ES-D3细胞系pN1-EGFP瞬时转染效率的研究第49-67页
  1 材料和方法第50-57页
   ·材料第50页
   ·主要试剂配方第50-51页
   ·方法第51-57页
   ·统计分析第57页
  2 结果第57-62页
   ·小鼠ES细胞的生长行为第57页
   ·小鼠ES细胞鉴定第57-58页
   ·血清对ES细胞冻存效率的影响第58-60页
   ·质粒的制备第60-61页
   ·不同转染法对小鼠ES细胞转染效率的影响第61-62页
  3 讨论第62-65页
   ·D3-ES细胞的培养、鉴定第63页
   ·血清对D3-ES细胞冻存效率的影响第63-64页
   ·质粒的提取和鉴定第64页
   ·不同转染方法对ES细胞转染效率的影响第64-65页
  参考文献第65-67页
全文结论第67-68页
图版第68-71页
图版说明第71-72页
EXPLANATION OF FIGURES第72-73页
硕士期间论文发表情况第73-74页
致谢第74页

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