| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一章 综述 | 第16-48页 |
| ·食源性疾病和病原 | 第16-18页 |
| ·食源性疾病的发病形势 | 第16页 |
| ·食源性疾病病原 | 第16-17页 |
| ·肠道致病菌 | 第17-18页 |
| ·食源性致病菌的检测技术 | 第18-32页 |
| ·传统方法 | 第18-19页 |
| ·改进方法 | 第19-20页 |
| ·现代检测技术 | 第20-32页 |
| ·水和食品中大肠杆菌的检测方法 | 第32-44页 |
| ·大肠杆菌 | 第32页 |
| ·大肠杆菌、大肠菌群和粪大肠杆菌作为指示菌的原由 | 第32-34页 |
| ·大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌的检测方法 | 第34-44页 |
| ·现有利用噬菌体检验细菌方法中存在的问题 | 第44-48页 |
| ·选择性杀死噬菌体的试剂缺乏 | 第44-45页 |
| ·有效浸染条件隐含缺陷 | 第45-46页 |
| ·现存的其他技术问题 | 第46页 |
| ·本课题的研究目的 | 第46-48页 |
| 第二章 研究思路、方案、材料和基础方法 | 第48-60页 |
| ·本研究的基本思路 | 第48-50页 |
| ·将噬菌体技术作为转换和纯化样品的工具 | 第48页 |
| ·采用PCR 或实时PCR 来完成转换样品检测的构思 | 第48-49页 |
| ·确定样品靶细菌含量和转换样品子代噬菌体含量关系的方法构思 | 第49页 |
| ·以E.coli 和T4 为材料从事模型研究的理由 | 第49-50页 |
| ·利用子代T4 检验E.coli 方法的技术路线和实验方案 | 第50-52页 |
| ·技术路线 | 第50-51页 |
| ·研究方案 | 第51-52页 |
| ·实验材料和基础方法 | 第52-60页 |
| ·菌种和噬菌体 | 第52-53页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第53-54页 |
| ·试剂 | 第54-55页 |
| ·主要仪器 | 第55-56页 |
| ·微滤膜组件 | 第56页 |
| ·通用方法 | 第56-60页 |
| 第三章 模拟样品和转换样品的制备方法探索 | 第60-87页 |
| ·制备稳定的T4 和E.coli 工作液和模拟样品 | 第60-63页 |
| ·制备滴定度稳定的T4 贮备液和工作液 | 第60-61页 |
| ·制备滴定度稳定的E.coli 工作液和模拟样品 | 第61-63页 |
| ·离心法清除浸染后样液中游离T4 的效果研究 | 第63-67页 |
| ·离心分离中大肠杆菌保留量和T4 残留量的变化动态 | 第63-65页 |
| ·离心机转速对大肠杆菌保留量和T4 噬菌体残留量的影响 | 第65-66页 |
| ·确定采用的离心清洗方法 | 第66-67页 |
| ·微滤法清除浸染后样液中游离T4 的效果研究 | 第67-76页 |
| ·0.22μm 孔径滤膜过滤后大肠杆菌的保留量 | 第67-69页 |
| ·样品中T4 浓度在膜滤清洗下的变化速度 | 第69-70页 |
| ·不同清洗液的性能比较 | 第70-73页 |
| ·不同膜组件性能的系统比较 | 第73-76页 |
| ·迅速完全侵染大肠杆菌需用的T4 噬菌体滴定度研究 | 第76-82页 |
| ·采用低滴定度T4 侵染大肠杆菌的可行性研究 | 第76-77页 |
| ·采用高滴定度T4 侵染大肠杆菌的适宜条件研究 | 第77-82页 |
| ·裂解期的研究 | 第82-84页 |
| ·滴定度低于108 PFU/mL 进行侵染时受侵染大肠杆菌的裂解试验 | 第82-83页 |
| ·滴定度高于108 PFU/mL 进行侵染时受侵染大肠杆菌的裂解试验 | 第83-84页 |
| ·本章总结暨设计完整的样品转换方法 | 第84-87页 |
| 第四章 子代T4 与E.coli 的换算关系和测定方法研究 | 第87-122页 |
| ·模拟样品E.coli 和转换样品子代T4 数量关系的研究 | 第87-101页 |
| ·试验方法 | 第87-88页 |
| ·结果与分析 | 第88-94页 |
| ·线性关系的成立条件和影响因素分析 | 第94-99页 |
| ·其它细菌对这种检验方法的干扰及其排除研究 | 第99-101页 |
| ·应用PCR 技术测定转换样品中T4 含量的方法研究 | 第101-122页 |
| ·引物的设计和性质 | 第102-103页 |
| ·PCR 反应条件的设置 | 第103-104页 |
| ·以纯化的T4 DNA 为模板优化PCR 反应条件 | 第104-107页 |
| ·以系列转换样品制备的模板样液进行试验 | 第107-110页 |
| ·由T4 样品制备PCR 模板样液的方法研究 | 第110-115页 |
| ·常规PCR 测定转换样品中T4 含量的局限性 | 第115页 |
| ·应用实时 PCR 测定转换样品中T4 含量的研究 | 第115-122页 |
| 第五章 结论、讨论与展望 | 第122-128页 |
| ·结论 | 第122-124页 |
| ·创新点 | 第124-125页 |
| ·讨论 | 第125-126页 |
| ·展望 | 第126-128页 |
| 参考文献 | 第128-143页 |
| 致谢 | 第143-144页 |
| 作者简介 | 第144页 |
