摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-42页 |
第一章 脂肪细胞的分化及调控 | 第14-22页 |
·脂肪细胞的起源 | 第14页 |
·脂肪细胞的分化过程 | 第14-16页 |
·脂肪细胞分化过程的转录调控 | 第16-18页 |
·脂肪细胞分化过程中的信号通路 | 第18-21页 |
·MIX 诱导的信号通路 | 第18页 |
·DEX 诱导的信号通路 | 第18页 |
·IGF-1R 介导的信号通路 | 第18-21页 |
·脂肪细胞分化研究中存在的问题 | 第21页 |
·研究脂肪细胞分化的重要意义 | 第21-22页 |
第二章 成肌细胞分化及调控 | 第22-29页 |
·成肌细胞分化的基本过程 | 第22-23页 |
·成肌表型分化 | 第22-23页 |
·肌分化过程中的细胞凋亡 | 第23页 |
·几种重要的肌决定因子 | 第23-26页 |
·成肌特异的bHLH 转录因子 | 第23-25页 |
·其他重要的成肌特异因子 | 第25-26页 |
·肌决定因子的调控物 | 第26-27页 |
·IGF 和IGFBP | 第26页 |
·Notch | 第26页 |
·孤核受体 | 第26-27页 |
·其他参与调控成肌因子的蛋白 | 第27页 |
·细胞周期调控 | 第27-29页 |
·p21 | 第28页 |
·pRb | 第28页 |
·Cyclin-cdk | 第28-29页 |
第三章 FOXO1 的生理功能及其影响肥胖症和肌萎缩的重要机制 | 第29-42页 |
·FOXO 转录因子的结构与基因表达 | 第29-30页 |
·FOX 蛋白的命名和分类 | 第29页 |
·FOXO 及基因表达 | 第29-30页 |
·FOXO 转录因子活性的调节 | 第30-31页 |
·FOXO 蛋白的共价修饰 | 第30-31页 |
·FOXO 蛋白的降解 | 第31页 |
·FOXO 蛋白与其他蛋白的相互作用 | 第31页 |
·FOXO 转录因子的靶基因及其相关的生物学功能 | 第31-34页 |
·FOXO 参与细胞代谢调节 | 第31-32页 |
·FOXO 参与细胞周期及凋亡的调节 | 第32-33页 |
·FOXO 与肿瘤的发生 | 第33-34页 |
·FOXO1 影响肥胖症和肌萎缩的重要机制 | 第34-42页 |
·FOXO 的结构和调节 | 第34-35页 |
·Foxo1 在肝脏中调节多条代谢通路 | 第35-37页 |
·Foxo1 影响胰岛β细胞的衰竭和增生 | 第37-38页 |
·Foxo1 与脂肪细胞增殖与分化的关系 | 第38-39页 |
·Foxo1 与成肌细胞分化关系 | 第39-42页 |
第二部分 实验研究 | 第42-131页 |
前言 | 第42-45页 |
第四章 猪FOXO1 基因CDNA 克隆、序列分析及其蛋白功能预测 | 第45-66页 |
·材料与方法 | 第45-53页 |
·材料 | 第45-47页 |
·方法与步骤 | 第47-53页 |
·结果与分析 | 第53-61页 |
·猪肝脏和皮下脂肪组织RNA 提取 | 第53页 |
·猪FoxO1 基因cDNA CDS 部分序列RT-PCR 结果 | 第53页 |
·猪FoxO1 基因RACE 和克隆测序 | 第53-54页 |
·猪FoxO1 基因cDNA 序列分析 | 第54-55页 |
·猪FoxO1 氨基酸序列序列分析 | 第55-58页 |
·猪FoxO1 蛋白结构功能预测 | 第58-61页 |
·猪FoxO1 mRNA 的二级结构分析 | 第61页 |
·讨论 | 第61-65页 |
·关于RACE 技术 | 第62-64页 |
·猪FoxO1 结构和功能的预测 | 第64-65页 |
·小结 | 第65-66页 |
第五章 猪FOXO1 基因染色体定位与组织表达研究 | 第66-80页 |
·材料与方法 | 第66-72页 |
·实验材料 | 第66-67页 |
·实验方法 | 第67-72页 |
·结果与分析 | 第72-76页 |
·猪FoxO1 基因的物理定位结果 | 第72-73页 |
·Realtime PCR 检测不同日龄猪各组织表达结果 | 第73-75页 |
·免疫印迹分析 | 第75-76页 |
·讨论 | 第76-79页 |
·基因的染色体定位 | 第76-77页 |
·Realtime PCR 检测FoxO1 基因转录表达 | 第77-79页 |
·免疫印迹分析 | 第79页 |
·FoxO1 基因组织表达与脂肪沉积和肌肉发育 | 第79页 |
·小结 | 第79-80页 |
第六章 白藜芦醇和IGF-1 调控猪原代前体脂肪细胞增殖与分化及其机理 | 第80-92页 |
·材料与方法 | 第80-83页 |
·实验材料 | 第80-82页 |
·实验方法 | 第82-83页 |
·结果与分析 | 第83-89页 |
·脂肪细胞形态学变化 | 第83-84页 |
·RES 对猪前体脂肪细胞增殖的影响 | 第84-85页 |
·RES 对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第85-86页 |
·RES 对猪前体脂肪细胞分化中FoxO1、Sirt1 和PPARγ时序表达的影响 | 第86页 |
·IGF-1 对猪前体脂肪细胞增殖的影响 | 第86-87页 |
·IGF-1 对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第87-88页 |
·IGF-1 对猪前体脂肪细胞分化中FoxO1、Sirt1 和PPARγ时序表达的影响 | 第88-89页 |
·讨论 | 第89-91页 |
·RES 对猪脂肪细胞增殖与分化的时效关系 | 第89页 |
·IGF-1 对猪脂肪细胞增殖与分化的时效关系 | 第89-90页 |
·RES 抑制猪脂肪细胞增殖与分化可能机理 | 第90页 |
·IGF-1 抑制猪脂肪细胞增殖与分化可能机理 | 第90-91页 |
·小结 | 第91-92页 |
第七章 RES 和IGF-1 对猪成肌细胞增殖与分化的影响及其机理 | 第92-103页 |
·材料和方法 | 第92-95页 |
·实验材料 | 第92-93页 |
·实验方法 | 第93-95页 |
·结果与分析 | 第95-100页 |
·成肌细胞存活率测定 | 第95-96页 |
·RES 和IGF-1 处理成肌细胞后的形态学变化 | 第96-97页 |
·RES 和IGF-1 对猪成肌细胞增殖的影响 | 第97-98页 |
·RES 和IGF-1 对猪成肌细胞融合的影响 | 第98页 |
·RES 和IGF-1 对猪成肌细胞增殖分化中FoxO1 和MyoD 表达时序的影响 | 第98-100页 |
·讨论 | 第100-102页 |
·猪原代成肌细胞培养与鉴定 | 第100页 |
·RES 和IGF-1 对猪原代成肌细胞增殖的影响 | 第100-101页 |
·RES 和IGF-1 对猪原代成肌细胞融合的影响 | 第101页 |
·RES 和IGF-1 对猪原代成肌细胞增殖与分化的可能机理 | 第101-102页 |
·小结 | 第102-103页 |
第八章 猪FOXO1 基因 SIRNAS 的设计及其稳定表达载体的构建 | 第103-116页 |
·材料和方法 | 第103-108页 |
·材料与试剂 | 第103-104页 |
·实验方法 | 第104-108页 |
·实验结果 | 第108-113页 |
·FoxO1 干扰载体的构建 | 第108-109页 |
·磷酸钙法和脂质体法转染细胞效率比较 | 第109-111页 |
·RT-PCR 检测 | 第111-112页 |
·FoxO1 免疫荧光分析 | 第112-113页 |
·讨论 | 第113-115页 |
·猪脂肪细胞和成肌细胞转染方法的确定 | 第113页 |
·siRNA 引物的设计与干扰载体的构建 | 第113-114页 |
·转染猪前体脂肪细胞和成肌细胞的抑制效果 | 第114-115页 |
·小结 | 第115-116页 |
第九章 FOXO1 调控猪成脂和成肌相关基因的时序表达 | 第116-131页 |
·材料与方法 | 第117-119页 |
·实验材料 | 第117页 |
·实验方法 | 第117-119页 |
·结果与分析 | 第119-126页 |
·脂肪细胞形态学变化 | 第119-121页 |
·FoxO1 RNAi 对猪原代前体脂肪细胞成脂相关基因的时序表达 | 第121-123页 |
·成肌细胞分化过程中形态学变化 | 第123-124页 |
·FoxO1 RNAi 对猪成肌细胞成肌相关基因的时序表达 | 第124-126页 |
·讨论 | 第126-130页 |
·转染重组质粒后细胞形态的变化 | 第126页 |
·RNAi 抑制细胞内源FoxO1 表达 | 第126-127页 |
·FoxO1 调控猪前体脂肪细胞关键基因的时序表达 | 第127-128页 |
·FoxO1 调控猪成肌细胞关键基因的时序表达 | 第128-130页 |
·小结 | 第130-131页 |
结论 | 第131-133页 |
参考文献 | 第133-148页 |
缩略词表 | 第148-150页 |
致谢 | 第150-151页 |
作者简介 | 第151-152页 |