| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-40页 |
| ·微孢子虫对农业及人类的影响 | 第15-17页 |
| ·微孢子虫的形态、分类及家蚕微孢子虫的分类学定位 | 第17-22页 |
| ·微孢子虫孢子侵入宿主细胞的模式 | 第22-25页 |
| ·外界因素对微孢子虫孢子激活的影响 | 第25-26页 |
| ·微孢子虫孢子发芽与在细胞内的增殖 | 第26-28页 |
| ·微孢子虫孢子发芽、侵染与孢子表面蛋白的关系 | 第28-32页 |
| ·方法学的研究 | 第32-37页 |
| ·研究背景与技术路线 | 第37-40页 |
| 第2章 家蚕微孢子虫孢子外孢壁单抗及多抗的制备 | 第40-55页 |
| ·材料与方法 | 第40-48页 |
| ·生物材料 | 第40-41页 |
| ·主要仪器与设备 | 第41页 |
| ·主要试剂及配制 | 第41-42页 |
| ·家蚕微孢子虫孢子的繁殖与纯化 | 第42-43页 |
| ·家蚕微孢子虫孢子外孢壁单抗的制备 | 第43-47页 |
| ·动物免疫 | 第43-44页 |
| ·细胞融合 | 第44页 |
| ·杂交瘤的筛选与克隆 | 第44-45页 |
| ·单克隆抗体腹水制备及纯化 | 第45-46页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第46-47页 |
| ·单克隆抗体初步鉴定 | 第47-48页 |
| ·单克隆抗体腹水效价测定 | 第47页 |
| ·单克隆抗体类型及亚类鉴定 | 第47页 |
| ·单克隆抗体的特异性反应试验 | 第47-48页 |
| ·家蚕微孢子虫孢子外孢壁多抗的制备及效价测定 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-52页 |
| ·细胞融合率、阳性率与细胞克隆 | 第48-49页 |
| ·腹水制备、效价测定、抗体类型及亚类鉴定 | 第49-50页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第50-51页 |
| ·多克隆抗体的效价测定 | 第51-52页 |
| ·分析与讨论 | 第52-53页 |
| ·提示 | 第53-55页 |
| 第3章 单克隆抗体对家蚕微孢子虫孢子体外发芽及侵染培养细胞的影响 | 第55-68页 |
| ·材料与方法 | 第55-59页 |
| ·生物材料 | 第55页 |
| ·主要仪器与设备 | 第55-56页 |
| ·主要试剂及配制 | 第56页 |
| ·单抗除菌处理 | 第56页 |
| ·Bradford法测定单抗蛋白浓度 | 第56-57页 |
| ·家蚕微孢子虫孢子体外发芽试验流程 | 第57页 |
| ·单抗对家蚕微孢子虫孢子相对发芽抑制率的计算方法 | 第57-58页 |
| ·家蚕微孢子虫孢子经单抗3C2预处理后向家蚕细胞的接种 | 第58页 |
| ·单抗3C2和家蚕微孢子虫孢子及家蚕细胞的共培养 | 第58页 |
| ·DAPI活体荧光染色观察孢子对家蚕细胞的感染情况 | 第58-59页 |
| ·结果 | 第59-64页 |
| ·单抗预处理对家蚕微孢子虫孢子体外发芽的影响 | 第59-60页 |
| ·单抗预处理对家蚕微孢子虫孢子侵染家蚕细胞的影响 | 第60-61页 |
| ·单抗共培养对家蚕微孢子虫孢子侵染家蚕细胞的影响 | 第61-64页 |
| ·分析与讨论 | 第64-67页 |
| ·提示 | 第67-68页 |
| 第4章 侵染相关表面蛋白SP84的分离纯化及在孢壁上的定位 | 第68-84页 |
| ·材料与方法 | 第68-76页 |
| ·生物材料 | 第68页 |
| ·主要仪器与设备 | 第68-69页 |
| ·主要试剂 | 第69页 |
| ·试剂配制与操作法 | 第69-74页 |
| ·家蚕微孢子虫孢子表面蛋白SDS-PAGE与单抗3C2的免疫印记 | 第74-75页 |
| ·家蚕微孢子虫孢子表面蛋白2D-PAGE与单抗3C2的免疫印记 | 第75页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第75页 |
| ·单抗3C2在家蚕微孢子虫孢子表面的免疫胶体金电镜定位观察 | 第75-76页 |
| ·结果 | 第76-80页 |
| ·单抗3C2识别的孢子表面蛋白的分子量及等电点 | 第76-78页 |
| ·间接免疫荧光试验结果 | 第78-79页 |
| ·单抗3C2的免疫胶体金定位 | 第79-80页 |
| ·分析与讨论 | 第80-83页 |
| ·提示 | 第83-84页 |
| 第5章 SP84的免疫共沉淀及质谱鉴定 | 第84-97页 |
| ·材料与方法 | 第84-90页 |
| ·主要材料与仪器 | 第84-85页 |
| ·家蚕微孢子虫孢子表面蛋白质的提取 | 第85页 |
| ·单抗3C2与SP84的免疫共沉淀 | 第85-88页 |
| ·免疫共沉淀操作步骤 | 第85-88页 |
| ·洗脱条件的确定 | 第88页 |
| ·洗脱液的SDS-PAGE及免疫印记 | 第88-89页 |
| ·洗脱蛋白的质谱鉴定 | 第89-90页 |
| ·样品制备 | 第89页 |
| ·MS-MS条件 | 第89页 |
| ·质谱分析 | 第89-90页 |
| ·结果 | 第90-93页 |
| ·三种洗脱液的洗脱效果 | 第90页 |
| ·SP84的免疫共沉淀结果 | 第90-91页 |
| ·SP84的质谱鉴定结果 | 第91-93页 |
| ·疑似互作蛋白P34的质谱鉴定结果 | 第93页 |
| ·分析与讨论 | 第93-96页 |
| ·提示 | 第96-97页 |
| 展望 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-108页 |
| 附录1 | 第108-110页 |
| 附录2 | 第110-111页 |
| 附录3 | 第111-112页 |
| 附录4 | 第112-115页 |
| 附录5 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116页 |
