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Importin 13蛋白质介导Myopodin蛋白质入核的研究

中文目录第1-9页
英文目录第9-13页
中文摘要第13-15页
英文摘要第15-17页
缩略词及中英文对照第17-19页
1.前言第19-47页
   ·大分子物质核质转运的基本过程第19-29页
     ·引言第19页
     ·importin β家族的结构特点与功能第19-23页
     ·核输入过程第23-24页
     ·核输出过程第24-25页
     ·核质转运模式图第25-27页
     ·Ran在核质转运中的作用第27页
     ·辅助因子在核质转运过程中的作用第27-28页
     ·核定位信号/出核信号的修饰作用第28-29页
   ·importin13的结构与功能的介绍第29-34页
     ·importin13的发现和特性第29-30页
     ·importin13在肺发育中的作用第30-32页
     ·importin13介导的核质转运第32-34页
   ·myopodin的研究进展第34-46页
     ·myopodin的发现第34-35页
     ·myopodin的结构与功能第35-37页
       ·myopodin的结构第35-36页
       ·myopodin的分布第36-37页
     ·myopodin的功能第37-39页
     ·myopodin的核质转运第39-46页
       ·myopodin在分化和胁迫条件下的核质重新定位第39-40页
       ·myopodin与肌动蛋白相互作用第40-41页
       ·myopodin的NES和NLS第41-43页
       ·myopodin入核机制第43-46页
   ·本论文的研究目的、内容和研究意义第46-47页
2.材料与方法第47-87页
   ·实验材料第47-51页
     ·质粒列表第47-48页
     ·引物列表第48页
     ·抗体列表第48-49页
     ·细胞列表第49-50页
     ·药品和试剂列表第50-51页
   ·分子克隆第51-64页
     ·质粒载体第51-55页
     ·质粒提取和转化第55-59页
     ·质粒构建实验第59-61页
     ·PCR相关实验第61-64页
   ·酵母双杂交实验第64-69页
     ·醋酸锂法转化DNA入酵母第64页
     ·酵母样品收集第64页
     ·酵母培养基配制第64-66页
     ·酵母双杂交第66-69页
   ·生化实验第69-78页
     ·Western blotting第69-73页
     ·蛋白质浓度测定方法第73-74页
     ·蛋白质的表达和纯化第74-75页
     ·GST-Pull Down第75-76页
     ·Ran结合实验第76-77页
     ·免疫共沉淀第77-78页
   ·细胞相关实验第78-87页
     ·细胞培养有关试剂的配制第78-79页
     ·细胞培养基本操作流程第79-87页
       ·细胞复苏第79-80页
       ·换液第80页
       ·传代第80页
       ·细胞保种第80页
       ·细胞计数第80页
       ·接种细胞第80-81页
       ·瞬时转染第81-83页
       ·细胞染色第83-84页
       ·盖玻片的处理第84页
       ·裂解细胞第84-85页
       ·细胞融合第85-86页
       ·抑制蛋白出核处理第86-87页
3.结果与分析第87-147页
   ·MOPODIN基因的获得第87-101页
     ·酵母双杂交分析第87-94页
     ·myopodin基因的克隆第94-100页
     ·小结第100-101页
   ·myopodin蛋白与importin13的相互作用第101-107页
     ·内源和外源myopodin蛋白的检测第101-103页
     ·免疫共沉淀证明myopodin与importin13的相互作用第103-105页
     ·GST Pull-Down第105-106页
     ·小结第106-107页
   ·myopodin蛋白在细胞中的定位第107-122页
     ·内源myopodin在不同细胞中的定位第107-109页
     ·myopodin随细胞分化在细胞核质中重新定位第109-110页
     ·胁迫条件下myopodin在核质间重新定位第110-112页
     ·内源importin13在不同细胞中的分布第112-113页
     ·外源表达的myopodin在细胞中的分布第113-119页
     ·缺失NLS的myopodin突变体在细胞中的定位第119-121页
     ·小结第121-122页
   ·异核体细胞验证myopodin是核质穿梭蛋白第122-127页
     ·F-myopodin和N-myopodin都是核质穿梭蛋白第122-126页
     ·小结第126-127页
   ·Importin13是myopodin的入核转运受体第127-138页
     ·N-末端myopodin不与imp13相互作用第127-129页
     ·已知的NLS不是myopodin与imp13的结合位点第129-130页
     ·Ran结合实验证明imp13是myopodin的入核转运受体第130-132页
     ·Myopodin与importinβ其他成员无相互作用第132-134页
     ·过量表达的C-imp13阻止内源myopodin入核第134-137页
     ·小结第137-138页
   ·讨论第138-145页
   ·结论第145-147页
参考文献第147-163页
致谢第163-164页
个人简历第164页

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