中文目录 | 第1-9页 |
英文目录 | 第9-13页 |
中文摘要 | 第13-15页 |
英文摘要 | 第15-17页 |
缩略词及中英文对照 | 第17-19页 |
1.前言 | 第19-47页 |
·大分子物质核质转运的基本过程 | 第19-29页 |
·引言 | 第19页 |
·importin β家族的结构特点与功能 | 第19-23页 |
·核输入过程 | 第23-24页 |
·核输出过程 | 第24-25页 |
·核质转运模式图 | 第25-27页 |
·Ran在核质转运中的作用 | 第27页 |
·辅助因子在核质转运过程中的作用 | 第27-28页 |
·核定位信号/出核信号的修饰作用 | 第28-29页 |
·importin13的结构与功能的介绍 | 第29-34页 |
·importin13的发现和特性 | 第29-30页 |
·importin13在肺发育中的作用 | 第30-32页 |
·importin13介导的核质转运 | 第32-34页 |
·myopodin的研究进展 | 第34-46页 |
·myopodin的发现 | 第34-35页 |
·myopodin的结构与功能 | 第35-37页 |
·myopodin的结构 | 第35-36页 |
·myopodin的分布 | 第36-37页 |
·myopodin的功能 | 第37-39页 |
·myopodin的核质转运 | 第39-46页 |
·myopodin在分化和胁迫条件下的核质重新定位 | 第39-40页 |
·myopodin与肌动蛋白相互作用 | 第40-41页 |
·myopodin的NES和NLS | 第41-43页 |
·myopodin入核机制 | 第43-46页 |
·本论文的研究目的、内容和研究意义 | 第46-47页 |
2.材料与方法 | 第47-87页 |
·实验材料 | 第47-51页 |
·质粒列表 | 第47-48页 |
·引物列表 | 第48页 |
·抗体列表 | 第48-49页 |
·细胞列表 | 第49-50页 |
·药品和试剂列表 | 第50-51页 |
·分子克隆 | 第51-64页 |
·质粒载体 | 第51-55页 |
·质粒提取和转化 | 第55-59页 |
·质粒构建实验 | 第59-61页 |
·PCR相关实验 | 第61-64页 |
·酵母双杂交实验 | 第64-69页 |
·醋酸锂法转化DNA入酵母 | 第64页 |
·酵母样品收集 | 第64页 |
·酵母培养基配制 | 第64-66页 |
·酵母双杂交 | 第66-69页 |
·生化实验 | 第69-78页 |
·Western blotting | 第69-73页 |
·蛋白质浓度测定方法 | 第73-74页 |
·蛋白质的表达和纯化 | 第74-75页 |
·GST-Pull Down | 第75-76页 |
·Ran结合实验 | 第76-77页 |
·免疫共沉淀 | 第77-78页 |
·细胞相关实验 | 第78-87页 |
·细胞培养有关试剂的配制 | 第78-79页 |
·细胞培养基本操作流程 | 第79-87页 |
·细胞复苏 | 第79-80页 |
·换液 | 第80页 |
·传代 | 第80页 |
·细胞保种 | 第80页 |
·细胞计数 | 第80页 |
·接种细胞 | 第80-81页 |
·瞬时转染 | 第81-83页 |
·细胞染色 | 第83-84页 |
·盖玻片的处理 | 第84页 |
·裂解细胞 | 第84-85页 |
·细胞融合 | 第85-86页 |
·抑制蛋白出核处理 | 第86-87页 |
3.结果与分析 | 第87-147页 |
·MOPODIN基因的获得 | 第87-101页 |
·酵母双杂交分析 | 第87-94页 |
·myopodin基因的克隆 | 第94-100页 |
·小结 | 第100-101页 |
·myopodin蛋白与importin13的相互作用 | 第101-107页 |
·内源和外源myopodin蛋白的检测 | 第101-103页 |
·免疫共沉淀证明myopodin与importin13的相互作用 | 第103-105页 |
·GST Pull-Down | 第105-106页 |
·小结 | 第106-107页 |
·myopodin蛋白在细胞中的定位 | 第107-122页 |
·内源myopodin在不同细胞中的定位 | 第107-109页 |
·myopodin随细胞分化在细胞核质中重新定位 | 第109-110页 |
·胁迫条件下myopodin在核质间重新定位 | 第110-112页 |
·内源importin13在不同细胞中的分布 | 第112-113页 |
·外源表达的myopodin在细胞中的分布 | 第113-119页 |
·缺失NLS的myopodin突变体在细胞中的定位 | 第119-121页 |
·小结 | 第121-122页 |
·异核体细胞验证myopodin是核质穿梭蛋白 | 第122-127页 |
·F-myopodin和N-myopodin都是核质穿梭蛋白 | 第122-126页 |
·小结 | 第126-127页 |
·Importin13是myopodin的入核转运受体 | 第127-138页 |
·N-末端myopodin不与imp13相互作用 | 第127-129页 |
·已知的NLS不是myopodin与imp13的结合位点 | 第129-130页 |
·Ran结合实验证明imp13是myopodin的入核转运受体 | 第130-132页 |
·Myopodin与importinβ其他成员无相互作用 | 第132-134页 |
·过量表达的C-imp13阻止内源myopodin入核 | 第134-137页 |
·小结 | 第137-138页 |
·讨论 | 第138-145页 |
·结论 | 第145-147页 |
参考文献 | 第147-163页 |
致谢 | 第163-164页 |
个人简历 | 第164页 |