摘要 | 第1-13页 |
ABSTRACT | 第13-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-24页 |
1 模式豆科—蒺藜苜蓿 | 第14-15页 |
2 小G蛋白 | 第15-17页 |
3 ROP GTPase在植物中的作用 | 第17-19页 |
4 ROP GTPase的结构特点 | 第19-21页 |
5 根瘤菌-豆科植物共生过程的建立 | 第21-22页 |
6 我们的工作 | 第22-24页 |
第二部分 实验论文 | 第24-45页 |
1 材料与方法 | 第24-34页 |
·材料 | 第24-26页 |
·植物材料 | 第24页 |
·质粒及菌种 | 第24页 |
·常用抗菌素 | 第24页 |
·培养基 | 第24-26页 |
·GUS染液 | 第26页 |
·方法 | 第26-34页 |
·无菌苗培养 | 第26页 |
·盐胁迫处理 | 第26页 |
·缺N处理 | 第26页 |
·根瘤菌接种处理 | 第26-27页 |
·RNA的抽提 | 第27页 |
·RNA质量的检测 | 第27页 |
·cDNA的合成 | 第27-28页 |
·所用到的多对引物的合成 | 第27-28页 |
·合成cDNA反转录体系(表2.3) | 第28页 |
·PCR扩增 | 第28-29页 |
·PCR产物胶回收 | 第29页 |
·PCR产物的连接转化 | 第29-30页 |
·T-载体连接 | 第29页 |
·DH5a感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
·连接产物的转化 | 第30页 |
·质粒的提取 | 第30-31页 |
·PCR鉴定目的基因 | 第31页 |
·测序 | 第31页 |
·生物信息学分析 | 第31页 |
·农杆菌感受态的制备及转化 | 第31-32页 |
·EHA105感受态细胞的制备 | 第32页 |
·转化农杆菌 | 第32页 |
·农杆菌的培养 | 第32页 |
·蒺藜苜蓿遗传转化 | 第32-34页 |
·侵染和共培养 | 第32-33页 |
·抗性胚性愈伤组织的诱导 | 第33页 |
·体细胞胚的诱导和培养 | 第33页 |
·再生芽生根 | 第33-34页 |
2 结果与分析 | 第34-43页 |
·RNA的抽提及质量分析 | 第34页 |
·MtROP2和MtROP6的克隆 | 第34-35页 |
·生物信息学分析 | 第35-38页 |
·以拟南芥11个ROP基因序列筛选蒺藜苜蓿的EST数据库和TC序列 | 第35页 |
·开放阅读框、功能位点、保守结构域分析 | 第35页 |
·全长cDNA生物学分析 | 第35-37页 |
·序列测定和可读框架分析 | 第35-37页 |
·同源序列比较 | 第37页 |
·蛋白质序列分析 | 第37-38页 |
·ROP2和ROP6基因表达模式分析 | 第38-40页 |
·组织表达特异性分析 | 第38页 |
·缺N和0.1M NaCl处理结果 | 第38-39页 |
·根瘤菌诱导处理 | 第39-40页 |
·35S::MtROP2和35S::MtROP6植物表达载体的构建 | 第40-42页 |
·35S::MtROP2表达载体构建 | 第40-41页 |
·35S::MtROP6表达载体构建 | 第41-42页 |
·MtROP2和MtRROP6重组质粒的检测 | 第42页 |
·蒺藜苜蓿的遗传转化及再生 | 第42-43页 |
·转基因植株的GUS组织化学鉴定鉴定 | 第43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
附录:本文所用到分子量Marker图谱 | 第45-46页 |
缩略语 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
文章发表与参与科研项目 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
声明 | 第53-54页 |
原创性声明 | 第54页 |