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蒺藜苜蓿ROP基因的克隆及功能研究

摘要第1-13页
ABSTRACT第13-14页
第一部分 文献综述第14-24页
 1 模式豆科—蒺藜苜蓿第14-15页
 2 小G蛋白第15-17页
 3 ROP GTPase在植物中的作用第17-19页
 4 ROP GTPase的结构特点第19-21页
 5 根瘤菌-豆科植物共生过程的建立第21-22页
 6 我们的工作第22-24页
第二部分 实验论文第24-45页
 1 材料与方法第24-34页
   ·材料第24-26页
     ·植物材料第24页
     ·质粒及菌种第24页
     ·常用抗菌素第24页
     ·培养基第24-26页
     ·GUS染液第26页
   ·方法第26-34页
     ·无菌苗培养第26页
     ·盐胁迫处理第26页
     ·缺N处理第26页
     ·根瘤菌接种处理第26-27页
     ·RNA的抽提第27页
     ·RNA质量的检测第27页
     ·cDNA的合成第27-28页
       ·所用到的多对引物的合成第27-28页
       ·合成cDNA反转录体系(表2.3)第28页
     ·PCR扩增第28-29页
     ·PCR产物胶回收第29页
     ·PCR产物的连接转化第29-30页
       ·T-载体连接第29页
       ·DH5a感受态细胞的制备第29-30页
       ·连接产物的转化第30页
     ·质粒的提取第30-31页
     ·PCR鉴定目的基因第31页
     ·测序第31页
     ·生物信息学分析第31页
     ·农杆菌感受态的制备及转化第31-32页
       ·EHA105感受态细胞的制备第32页
       ·转化农杆菌第32页
     ·农杆菌的培养第32页
     ·蒺藜苜蓿遗传转化第32-34页
       ·侵染和共培养第32-33页
       ·抗性胚性愈伤组织的诱导第33页
       ·体细胞胚的诱导和培养第33页
       ·再生芽生根第33-34页
 2 结果与分析第34-43页
   ·RNA的抽提及质量分析第34页
   ·MtROP2和MtROP6的克隆第34-35页
   ·生物信息学分析第35-38页
     ·以拟南芥11个ROP基因序列筛选蒺藜苜蓿的EST数据库和TC序列第35页
     ·开放阅读框、功能位点、保守结构域分析第35页
     ·全长cDNA生物学分析第35-37页
       ·序列测定和可读框架分析第35-37页
     ·同源序列比较第37页
     ·蛋白质序列分析第37-38页
   ·ROP2和ROP6基因表达模式分析第38-40页
     ·组织表达特异性分析第38页
     ·缺N和0.1M NaCl处理结果第38-39页
     ·根瘤菌诱导处理第39-40页
   ·35S::MtROP2和35S::MtROP6植物表达载体的构建第40-42页
     ·35S::MtROP2表达载体构建第40-41页
     ·35S::MtROP6表达载体构建第41-42页
     ·MtROP2和MtRROP6重组质粒的检测第42页
   ·蒺藜苜蓿的遗传转化及再生第42-43页
   ·转基因植株的GUS组织化学鉴定鉴定第43页
 3 讨论第43-45页
附录:本文所用到分子量Marker图谱第45-46页
缩略语第46-48页
参考文献第48-51页
文章发表与参与科研项目第51-52页
致谢第52-53页
声明第53-54页
原创性声明第54页

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