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根癌农杆菌介导的抗寒基因转录因子CBF转化苹果的研究

1 引言第1-17页
   ·课题提出的目的和意义第11页
   ·植物寒害机理研究第11-14页
     ·冷害引起细胞生理生化及结构的改变第12页
     ·膜的相变第12页
     ·蛋白质解联和变性第12-13页
     ·活性氧的破坏作用第13页
     ·钙离子(Ca~(2+))是冷敏感植物对冷胁迫的“最先感应体”和“伤害的引发物”第13-14页
   ·植物抗寒基因工程研究进展第14-17页
     ·与抗寒有关的基因的研究第14页
     ·CBF转录因子及其在植物抗寒中的作用第14-15页
     ·CBF基因转化植物的研究进展第15-17页
2 材料与方法第17-24页
   ·试验材料第17页
     ·植物材料第17页
     ·农杆菌菌株及载体第17页
   ·试验设计与方法第17-24页
     ·本试验所用的培养基第17页
     ·苹果对卡那霉素和头孢霉素的敏感性试验第17-18页
     ·TDZ与BA对苹果外植体再生效率的比较第18页
     ·白化茎段与叶片再生效率的比较第18页
     ·Vc和AgNO_3对白化茎段再生效率的影响第18页
     ·菌液浓度对转化效率的影响第18页
     ·预培养时间对苹果转化率的影响第18-19页
     ·侵染时间对苹果转化率的影响第19页
     ·共培养时间对转化效率的影响第19页
     ·苹果基因转化过程中乙酰丁香酮的加入对转化率的影响第19页
     ·侵染液中添加生长调节剂对苹果转化率的影响第19页
     ·侵染液中添加表面活性剂对苹果转化率的影响第19页
     ·苹果基因转化方法第19-20页
     ·Km抗性分析第20页
     ·PCR检测方法第20-22页
     ·脯氨酸含量的测定第22页
     ·生根移栽第22页
     ·结果观测与统计方法第22-24页
3 结果与分析第24-37页
   ·抗生素的敏感性试验第24-26页
     ·Km对M_(26)叶片、白化茎段不定芽再生的影响第24页
     ·Km对M_(26)、嘎拉继代苗的影响第24-25页
     ·头孢霉素(Cef)对农杆菌生长和M_(26)叶片、白化茎段再生不定芽的影响第25-26页
   ·提高苹果外植体的再生效率第26-29页
     ·TDZ与BA对苹果白化茎段再生效果的比较第26-27页
     ·白化茎段与叶片再生效率的比较第27页
     ·继代苗苗龄对苹果白化茎段再生效率的影响第27-28页
     ·抗坏血酸(Vc)对白化茎段再生效率的影响第28-29页
     ·AgNO_3对白化茎段不定芽再生效率的影响第29页
   ·提高苹果外植体的转化率第29-35页
     ·预培养时间对苹果转化率的影响第29-30页
     ·菌液浓度对苹果转化率的影响第30-31页
     ·侵染时间对苹果转化率的影响第31页
     ·共培养时间对苹果转化率的影响第31-32页
     ·继代苗龄对苹果白化茎段转化效率的影响第32页
     ·乙酰丁香酮(AS)对苹果转化效率的影响第32-34页
     ·培养基中蔗糖浓度对转化率的影响第34页
     ·侵染液中添加表面活性剂Tween80对苹果转化率的影响第34-35页
     ·侵染液中添加生长调节剂对苹果转化率的影响第35页
   ·苹果基因转化的检测第35-37页
     ·Km抗性检测第35-36页
     ·PCR电泳检测第36页
     ·转化株系脯氨酸含量的测定第36-37页
4 讨论第37-42页
   ·苹果基因转移受体系统的优化第37-38页
     ·白化茎段再生不定芽的影响冈素及调控第37-38页
     ·关于苹果白化茎段再生过程中的褐化问题第38页
     ·AgNO_3对苹果白化茎段再生的影响第38页
   ·苹果高效转化体系的优化第38-41页
     ·植物材料基因型、生理状态对遗传转化的影响第38-39页
     ·预培养时间对转化的影响第39页
     ·菌液浓度和共培养时间对转化率的影响第39-40页
     ·有关AS与Vir基因的诱导第40-41页
   ·转录因子CBF与苹果的抗寒性改良第41-42页
5.结论第42-43页
参考文献第43-48页
附录第48-51页
作者简介第51-52页
致谢第52-53页
华北农学报第53-58页

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