| 1 引言 | 第1-19页 |
| ·蛋白质的不稳定性 | 第7-11页 |
| ·化学不稳定性 | 第8-10页 |
| ·物理不稳定性 | 第10-11页 |
| ·影响蛋白质不稳定的因素 | 第11-13页 |
| ·影响蛋白质聚集的因素 | 第11-12页 |
| ·导致蛋白质凝聚的处理 | 第12-13页 |
| ·蛋白质稳定性的改善 | 第13-16页 |
| ·蛋白质聚集抑止 | 第13-15页 |
| ·改善蛋白质稳定性的方法 | 第15-16页 |
| ·本课题的研究意义 | 第16-17页 |
| ·本论文研究内容 | 第17-19页 |
| 2 CBL的制备 | 第19-39页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第20-26页 |
| ·实验试剂 | 第20页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·菌株和质粒 | 第21-23页 |
| ·PEI23a(+)-CBL构建示意图 | 第23-24页 |
| ·PEI28a(+)-CBL构建示意图 | 第24-25页 |
| ·PEI28a(+)-CBL构建示意图 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-35页 |
| ·CBL酶基因的PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR产物的回收 | 第27页 |
| ·PCR产物与pET23a(+)&pET28a(+)载体的双酶切 | 第27页 |
| ·双酶切产物的回收 | 第27页 |
| ·双酶切回收产物的连接 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌 TOP10感受态的制备 | 第28-29页 |
| ·连接产物转化 TOP10感受态细胞 | 第29页 |
| ·质粒的提取 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的 PCR鉴定 | 第30-31页 |
| ·蛋白的表达 | 第31页 |
| ·蛋白分离纯化 | 第31-33页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白表达结果 | 第33-35页 |
| ·结果和分析 | 第35-38页 |
| ·CBL基因的克隆 | 第35页 |
| ·重组质粒pET-23a(+)-CBL或pET-23a(+)-CBL的PCR鉴定 | 第35-36页 |
| ·CBL的 SDS-PAGE检测结果 | 第36页 |
| ·镍柱纯化 | 第36-37页 |
| ·CBL酶活的测定 | 第37-38页 |
| ·结果和讨论 | 第38-39页 |
| 3 胰蛋白酶在溶液状态下稳定性的研究 | 第39-51页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第39-40页 |
| ·实验试剂 | 第39-40页 |
| ·实验仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-50页 |
| ·胰蛋白酶酶活的测定 | 第40-41页 |
| ·稳定性研究的方法 | 第41-45页 |
| ·稳定性研究的结果和讨论 | 第45-50页 |
| ·结果和讨论 | 第50-51页 |
| 4 CBL在溶液状态下稳定性的研究 | 第51-59页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第51页 |
| ·实验试剂 | 第51页 |
| ·实验仪器 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-58页 |
| ·稳定性研究的方法 | 第51-53页 |
| ·稳定性研究的结果和讨论 | 第53-58页 |
| ·结果和讨论 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |