致谢 | 第1-3页 |
摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩略词表 | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-37页 |
1 石蒜属植物概况 | 第11-15页 |
·石蒜属植物的生物学特性 | 第12页 |
·中国石蒜属植物的种类及分布 | 第12-13页 |
·石蒜属植物花色、花型变异 | 第13-15页 |
·石蒜属植物资源的经济价值及开发利用 | 第15页 |
2 植物花发育相关基因的研究进展 | 第15-24页 |
·植物成花机理 | 第15-20页 |
·成花诱导过程 | 第16-17页 |
·花序分生组织的形成 | 第17-18页 |
·花分生组织的形成 | 第18-19页 |
·花器官原基的形成 | 第19-20页 |
·花色调控机理 | 第20-24页 |
3 基因文库 | 第24-29页 |
·基因组文库和cDNA 文库 | 第24-25页 |
·cDNA 文库的载体系统 | 第25-26页 |
·构建cDNA 文库的方法 | 第26-28页 |
·差减cDNA 文库 | 第26-27页 |
·标准化cDNA 文库 | 第27页 |
·标准化差减cDNA 文库 | 第27页 |
·cDNA PCR 文库和RACE cDNA 文库 | 第27-28页 |
·cDNA 文库的质量 | 第28-29页 |
·cDNA 文库的应用 | 第29页 |
·筛选与性状相关的重要基因 | 第29页 |
·结合芯片技术对生物体基因的时空表达进行研究 | 第29页 |
·为EST 的开发提供材料 | 第29页 |
4 EST 技术及其应用 | 第29-35页 |
·EST 及其研究概况 | 第29-30页 |
·EST 技术的原理和方法 | 第30-31页 |
·EST 的应用 | 第31-34页 |
·构建遗传学图谱 | 第31-32页 |
·分离与鉴定新基因 | 第32页 |
·基因差异表达的研究 | 第32-33页 |
·比较基因组学研究 | 第33页 |
·用于制备DNA 芯片 | 第33-34页 |
·生物信息学在EST 技术中的应用 | 第34-35页 |
·EST 数据库 | 第34页 |
·EST 序列分析软件 | 第34-35页 |
·花卉EST 研究 | 第35页 |
5 本研究的目的意义和思路 | 第35-37页 |
第二章 长筒石蒜花瓣cDNA 文库构建 | 第37-54页 |
1 实验材料与方法 | 第37-45页 |
·植物材料 | 第37-38页 |
·样品采集 | 第38页 |
·实验试剂与仪器设备 | 第38-39页 |
·试剂 | 第38-39页 |
·仪器设备 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-45页 |
·长筒石蒜花瓣总mRNA 的提取 | 第39-40页 |
·mRNA 的分离与纯化 | 第40-41页 |
·第一链cDNA 的合成 | 第41-42页 |
·第二链cDNA 的合成 | 第42页 |
·cDNA 末端补平 | 第42页 |
·EcoR I 接头的连接 | 第42-43页 |
·EcoR I 末端磷酸化 | 第43页 |
·用Xh01 限制性内切酶消化 | 第43页 |
·cDNA 大小片段筛选 | 第43-44页 |
·cDNA 与质粒载体相连 | 第44页 |
·连接产物纯化 | 第44页 |
·转化宿主菌 | 第44页 |
·文库滴度测定 | 第44页 |
·插入片段大小检测 | 第44-45页 |
2 实验结果 | 第45-51页 |
·RNA 质量 | 第45页 |
·mRNA(messenger RNA,信使RNA)质量 | 第45-46页 |
·cDNA 双链合成 | 第46-48页 |
·cDNA 片段大小筛选 | 第48-49页 |
·cDNA 的检测 | 第49-51页 |
·cDNA 文库库容检测 | 第49-50页 |
·插入片段大小检测 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-54页 |
第三章 长筒石蒜花瓣EST 序列的测定 | 第54-64页 |
1 材料与方法 | 第54-59页 |
·实验试剂及仪器 | 第54-55页 |
·材料 | 第55页 |
·实验方法 | 第55-59页 |
·铺布平板 | 第55页 |
·大规模质粒提取 | 第55-56页 |
·确定EST 序列测定的方案 | 第56-59页 |
2 结果与分析 | 第59-62页 |
·大规模质粒DNA 提取 | 第59页 |
·测序条件的优化 | 第59-61页 |
·不同T3 引物用量比较 | 第59-60页 |
·不同PCR 仪的比较及其他注意事项 | 第60-61页 |
·大规模EST序列测定 | 第61-62页 |
3 讨论 | 第62-64页 |
·质粒提取 | 第62-63页 |
·菌株活力对质粒提取的影响 | 第62页 |
·质粒DNA 的多带现象 | 第62-63页 |
·关于DNA 测序的几个问题 | 第63-64页 |
·模板用量与引物用量的平衡 | 第63页 |
·测序产物的纯化 | 第63-64页 |
第四章 长筒石蒜花瓣的基因表达谱分析 | 第64-75页 |
1 实验材料与方法 | 第64-65页 |
·分析材料 | 第64页 |
·生物信息学分析 | 第64-65页 |
·序列拼接 | 第64-65页 |
·功能注释及功能分类 | 第65页 |
2 结果与分析 | 第65-73页 |
·有效EST 序列的获得 | 第65-67页 |
·EST 序列拼接分析 | 第67-69页 |
·基因表达频率与基因表达丰度分析 | 第69-71页 |
·长筒石蒜花瓣EST序列同源性比较分析及基因表达功能分类 | 第71-73页 |
3 讨论 | 第73-75页 |
·花瓣表达基因的丰度特征 | 第73页 |
·关于数据库同源性比较的几个问题 | 第73-75页 |
·BIastN与BlastX 比对结果的差异 | 第73-74页 |
·ESTs 与数据库同源性比较 | 第74-75页 |
第五章 总结与展望 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-82页 |
作者简介 | 第82页 |