| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-48页 |
| 一、无脊椎动物的先天性免疫 | 第11-37页 |
| 1. 非己的识别 | 第12-22页 |
| ·病原相关分子模式 | 第12-13页 |
| ·模式识别受体 | 第13-22页 |
| ·肽聚糖识别蛋白 | 第14-16页 |
| ·硫酯蛋白 | 第16页 |
| ·革兰氏阴性菌结合蛋白 | 第16-17页 |
| ·清道夫受体 | 第17-18页 |
| ·C型凝集素 | 第18-19页 |
| ·硫依赖型凝集素 | 第19-20页 |
| ·Toll 样受体 | 第20-22页 |
| 2. 免疫信号的调整和放大 | 第22-31页 |
| ·丝氨酸蛋白酶级联反应 | 第22-26页 |
| ·血淋巴凝集系统 | 第24-25页 |
| ·前酚氧化酶激活系统 | 第25-26页 |
| ·免疫信号传导途径 | 第26-31页 |
| ·Toll 信号传导通路 | 第27-29页 |
| ·Imd 信号通路 | 第29-31页 |
| 3. 病原体的清除 | 第31-37页 |
| ·细胞免疫 | 第32-33页 |
| ·体液免疫 | 第33-37页 |
| 二、我国贝类养殖现状及贝类免疫学研究进展 | 第37-46页 |
| 1. 贝类养殖业面临的问题及养殖业可持续发展的策略 | 第37-40页 |
| 2. 软体动物免疫防御机制 | 第40-46页 |
| ·贝类血淋巴细胞形态结构 | 第41-42页 |
| ·贝类血细胞的吞噬作用 | 第42-43页 |
| ·贝类血细胞的包裹作用 | 第43页 |
| ·贝类天然免疫的体液因子 | 第43-46页 |
| 三、本研究的目的和意义 | 第46-48页 |
| 1. 本研究的目的 | 第46-47页 |
| 2. 本研究的意义 | 第47-48页 |
| 第二章 材料与方法 | 第48-65页 |
| 一、材料 | 第48-50页 |
| 1. 应激实验样品及样品处理 | 第48页 |
| 2. Northern 杂交样品的处理 | 第48页 |
| 3. 主要化学试剂及仪器设备 | 第48-50页 |
| 二、方法 | 第50-65页 |
| 1. 扇贝总RNA 的提取 | 第50-51页 |
| 2. CDNA 文库的构建与序列分析 | 第51-52页 |
| 3. 基因组DNA 的提取方法 | 第52页 |
| 4. 基因组Walking 文库的构建 | 第52-55页 |
| 5. RACE 扩增获得全长CDNA 序列 | 第55-56页 |
| 6. 琼脂糖凝胶回收PCR 产物 | 第56-57页 |
| 7. 质粒的制备 | 第57页 |
| 8. 感受态细胞的制备、连接和转化 | 第57-58页 |
| 9. 目的基因的生物信息学分析 | 第58页 |
| 10. Northern 杂交 | 第58-60页 |
| 11. QRT-PCR 检测目的基因的表达 | 第60-61页 |
| 12. 毕赤酵母的重组表达 | 第61-65页 |
| 第三章 海湾扇贝大防御素基因的克隆表达及其重组产物的抗菌活性研究 | 第65-86页 |
| 一、研究背景 | 第65-66页 |
| 二、材料与方法 | 第66-71页 |
| 1. 海湾扇贝大防御素基因3' 末端的克隆 | 第66-67页 |
| 2. 海湾扇贝大防御素基因5' 末端的克隆 | 第67-68页 |
| 3. 序列注册 | 第68页 |
| 4. Northern 杂交 | 第68页 |
| 5. 实时定量PCR 分析海湾扇贝大防御素基因的时序表达 | 第68页 |
| 6. 重组质粒的构建 | 第68-70页 |
| 7. 重组表达载体转化及表达产物检测 | 第70页 |
| 8. 琼脂扩散法检测重组产物的抗菌活性 | 第70-71页 |
| 三、结果 | 第71-79页 |
| 1. 海湾扇贝大防御素基因AiBD 的克隆 | 第71页 |
| 2. 海湾扇贝大防御素基因AiBD 的核苷酸序列分析 | 第71页 |
| 3. 海湾扇贝大防御素的同源性分析 | 第71-73页 |
| 4. 海湾扇贝大防御素的结构预测 | 第73-75页 |
| 5. 海湾扇贝大防御素基因AiBD 的组织分布 | 第75页 |
| 6. 实时定量PCR 检测鳗弧菌刺激下AiBD 基因的表达 | 第75-78页 |
| 7. 海湾扇贝大防御素的重组表达和活性分析 | 第78-79页 |
| 四、讨论 | 第79-86页 |
| 第四章 栉孔扇贝G 型溶菌酶的基因克隆及重组产物的抗菌活性研究 | 第86-119页 |
| 一、研究背景 | 第86-90页 |
| 二、材料与方法 | 第90-95页 |
| 1. 栉孔扇贝G 型溶菌酶基因全长cDNA 的克隆 | 第90-91页 |
| 2. 栉孔扇贝G 型溶菌酶基因序列的克隆 | 第91页 |
| 3. 序列注册 | 第91-92页 |
| 4. Northern 杂交 | 第92-93页 |
| 5. 序列比较与系统进化分析 | 第93页 |
| 6. 重组质粒的构建 | 第93-94页 |
| 7. 重组表达载体转化及表达产物检测 | 第94-95页 |
| 8. 琼脂扩散法检测重组产物的抗菌活性 | 第95页 |
| 三、结果 | 第95-112页 |
| 1. 栉孔扇贝G 型溶菌酶基因cDNA 的克隆 | 第95页 |
| 2. 栉孔扇贝G 型溶菌酶基因的cDNA 序列分析 | 第95-97页 |
| 3. 栉孔扇贝G 型溶菌酶CFGLys 的同源性分析 | 第97-101页 |
| 4. 栉孔扇贝G 型溶菌酶的基因结构分析 | 第101-102页 |
| 5. 栉孔扇贝G 型溶菌酶的分子进化研究 | 第102页 |
| 6. C型、G 型和I 型溶菌酶的分子进化研究 | 第102-108页 |
| 7. 栉孔扇贝G 型溶菌酶基因CFGLYS 的组织分布 | 第108页 |
| 8. 重组质粒的构建及酵母转化 | 第108-110页 |
| 9. 表达产物抑菌活性及抑菌谱的测定 | 第110-112页 |
| 四、讨论 | 第112-119页 |
| 第五章 结论 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-143页 |
| 博士期间发表和完成的论文 | 第143-144页 |
| 致谢 | 第144页 |
