| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-19页 |
| 第一章 枯草芽孢杆菌分泌表达研究进展 | 第11-19页 |
| ·青霉素 G 酰化酶简介 | 第11页 |
| ·枯草芽孢杆菌分泌表达途径研究 | 第11-13页 |
| ·影响枯草杆菌蛋白分泌的因素和分泌瓶颈 | 第13页 |
| ·枯草杆菌表达系统存在问题和发展方向 | 第13-14页 |
| ·枯草杆菌Tat途径机制 | 第14-15页 |
| ·Tat 系统的组成和遗传学 | 第15-16页 |
| ·Tat 途径转运折叠蛋白的研究进展 | 第16-17页 |
| ·联精氨酸信号肽的研究进展 | 第17-19页 |
| 第二篇 试验研究（枯草芽孢杆菌Tat 分泌表达青霉素G 酰化酶初步研究） | 第19-64页 |
| 第二章 研究的目的和意义 | 第19页 |
| 第三章 信号肽检测载体的构建 | 第19-28页 |
| ·引言 | 第19-20页 |
| ·材料与方法 | 第20-23页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-23页 |
| ·结果 | 第23-26页 |
| ·Bacillus megaterium ATCC14945 的PGA 基因序列 | 第23页 |
| ·GFP 基因PCR 及TA 克隆鉴定 | 第23-24页 |
| ·质粒构建 | 第24-26页 |
| ·讨论 | 第26-28页 |
| 第四章 枯草芽孢杆菌Tat 信号肽的克隆及分泌表达PGA 的研究 | 第28-37页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·材料与方法 | 第28-31页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·方法 | 第30-31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-37页 |
| ·Bacillus subtilis24 个Tat 信号肽基因 | 第31-33页 |
| ·含枯草芽孢杆菌Tat 信号肽的24 个表达载体的构建 | 第33页 |
| ·青霉素G 酰化酶的分泌性表达 | 第33-35页 |
| ·PGA 的 SDS-PAGE | 第35-37页 |
| 第五章 不同表达元件对Tat 信号肽调控PGA 表达的影响 | 第37-40页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·材料与方法 | 第37-38页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-39页 |
| ·P43 和Pglv 的基因启动子结构分析 | 第38-39页 |
| ·PGA 的活力测定 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| 第六章 枯草芽孢杆菌Tat 信号肽分泌PGA 性能优化研究 | 第40-56页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·材料与方法 | 第40-43页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-56页 |
| ·信号肽的 SignalP 分析结果 | 第43-49页 |
| ·信号肽的定点突变结果 | 第49-51页 |
| ·PGA 的分泌性表达 | 第51-54页 |
| ·PGA 的SDS-PAGE 分析 | 第54-56页 |
| 第七章 PGA 在 WB700 中分泌表达条件的研究 | 第56-59页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·材料与方法 | 第56页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·枯草芽孢杆菌感受态的制备、转化和PGA 的酶活测定方法都参照第二章相关内容 | 第56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-59页 |
| ·培养温度对PGA表达的影响 | 第56-57页 |
| ·培养基起始pH 值对PGA 表达的影响 | 第57-58页 |
| ·培养基碳源对PGA表达的影响 | 第58-59页 |
| 第八章 枯草芽孢杆菌通用型Tat分泌表达体系探讨 | 第59-64页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·材料与方法 | 第59-60页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-64页 |
| ·bga 基因序列分析 | 第60-61页 |
| ·β-半乳糖苷酶的分泌性表达 | 第61-62页 |
| ·β-半乳糖苷酶的 SDS-PAGE | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-88页 |
| 致 谢 | 第88-89页 |
| 作者简介 | 第89页 |
