| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 文献综述 | 第13-43页 |
| 1. 哺乳动物性别生殖相关研究进展 | 第13-28页 |
| ·哺乳动物性别决定相关分子及其作用机制 | 第14-25页 |
| ·哺乳动物性别决定模型 | 第25-28页 |
| 2. 抑制性消减杂交方法研究进展 | 第28-35页 |
| ·抑制性消减杂交原理 | 第29-32页 |
| ·抑制性消减杂交方法的改进与近期相关方法简介 | 第32-35页 |
| 参考文献 | 第35-43页 |
| 第一章 罗氏沼虾雄性生殖系统消减文库的构建 | 第43-63页 |
| 1. 引言 | 第43-44页 |
| 2. 材料 | 第44-45页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44-45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| 3. 方法 | 第45-55页 |
| ·罗氏沼虾生殖系统总 RNA的抽提 | 第45-46页 |
| ·罗氏沼虾生殖系统 PolyA~+RNA的提取 | 第46-47页 |
| ·罗氏沼虾雄性生殖系统SSH cDNA文库的建立 | 第47-51页 |
| ·建立 SSH cDNA文库的鉴定 | 第51-55页 |
| 4. 结果 | 第55-58页 |
| ·Rsa I酶切效果的判定 | 第55-56页 |
| ·接头连接效率的检测 | 第56页 |
| ·消减 PCR产物分析 | 第56页 |
| ·消减效率的 PCR鉴定 | 第56-57页 |
| ·消减cDNA文库 PCR插入片段的判定 | 第57-58页 |
| ·分化筛选点杂交结果 | 第58页 |
| ·挑取克隆测序和比对分析结果 | 第58页 |
| 5. 讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 第二章 罗氏沼虾雄性生殖系统两种基因的克隆 | 第63-78页 |
| 1. 引言 | 第63-64页 |
| 2. 材料 | 第64页 |
| ·实验材料 | 第64页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·主要仪器 | 第64页 |
| 3. 方法 | 第64-70页 |
| ·罗氏沼虾取材 | 第64-65页 |
| ·罗氏沼虾雄性生殖系统总 RNA的抽提 | 第65页 |
| ·罗氏沼虾雄性生殖系统cDNA的合成 | 第65页 |
| ·两种雄性生殖系统基因的克隆 | 第65-70页 |
| 4. 结果 | 第70-74页 |
| ·Mar-Mrr全长cDNA的确定 | 第70-71页 |
| ·MRPINK全长cDNA的确定 | 第71-72页 |
| ·MRPINK与不同物种同源氨基酸序列的比较 | 第72-74页 |
| 5. 讨论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-78页 |
| 第三章 罗氏沼虾雄性生殖系统两种基因表达特征研究 | 第78-91页 |
| 1. 引言 | 第78-80页 |
| 2. 材料 | 第80页 |
| ·实验材料 | 第80页 |
| ·主要试剂 | 第80页 |
| ·主要仪器 | 第80页 |
| 3. 方法 | 第80-83页 |
| ·罗氏沼虾取材 | 第80页 |
| ·RNA抽提 | 第80页 |
| ·Northern blotting | 第80-82页 |
| ·RT-PCR(Reverse transeription Polymerase chain reaction) | 第82页 |
| ·半定量 RT-PCR(semi-quantitative RT-PCR) | 第82-83页 |
| 4. 结果 | 第83-87页 |
| ·两种雄性生殖系统基因的组织表达特异性 | 第83-84页 |
| ·MRPINK在雄性生殖系统中的表达 | 第84页 |
| ·Mar-Mrr和 MRPINK基因在不同发育生长时期的表达 | 第84-87页 |
| 5. 讨论 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-91页 |
| 第四章 罗氏沼虾雄性生殖系统两种基因的组织定位和基因组结构研究 | 第91-112页 |
| 1. 引言 | 第91-92页 |
| 2. 材料 | 第92-93页 |
| ·实验材料 | 第92-93页 |
| ·主要试剂 | 第93页 |
| ·主要仪器 | 第93页 |
| 3. 方法 | 第93-103页 |
| ·罗氏沼虾的取材 | 第93页 |
| ·原位杂交(In Situ Hybridization,ISH) | 第93-100页 |
| ·Mar-Mrr和MRPINK基因结构的分析 | 第100-103页 |
| 4. 结果 | 第103-108页 |
| ·mRNA原位杂交检测结果 | 第103-105页 |
| ·基因组检测结果 | 第105-108页 |
| 5. 讨论 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-112页 |
| 第五章 结论与展望 | 第112-114页 |
| 1. 结论 | 第112页 |
| 2. 有待近一步开展的工作 | 第112-114页 |
| 本研究的创新点 | 第114-115页 |
| 附录一 常用试剂配制一览表 | 第115-121页 |
| 附录二 攻读博士学位期间发表、投稿论文 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122页 |
