| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-11页 |
| 第一章 精子蛋白SP22研究进展 | 第11-20页 |
| 1．SP22基因结构及表达分布特点 | 第11-12页 |
| 2．SP22蛋白结构特点 | 第12-13页 |
| 3．SP22功能概述 | 第13-16页 |
| 4．结语 | 第16-20页 |
| 第二章 人睾丸精子蛋白SP22基因的克隆 | 第20-29页 |
| 1．材料与方法 | 第20-23页 |
| 1．1 材料及主要试剂 | 第20页 |
| 1．2 实验方法 | 第20-23页 |
| 1．2．1 引物设计 | 第20-21页 |
| 1．2．2 人睾丸组织RNA提取及RT—PCR | 第21页 |
| 1．2．3 PCR产物的纯化 | 第21页 |
| 1．2．4 T载体克隆测序 | 第21-22页 |
| 1．2．5 感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| 1．2．6 转化及筛选 | 第23页 |
| 2．结果 | 第23-27页 |
| 2．1 RNA的检测和RT—PCR结果 | 第23-24页 |
| 2．2 连入T载体及检测 | 第24-25页 |
| 2．3 测序结果 | 第25-27页 |
| 3．讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 人睾丸精子蛋白SP22的原核表达 | 第29-38页 |
| 1． 材料与方法 | 第29-32页 |
| 1．1 材料及主要试剂 | 第29-30页 |
| 1．2 实验方法 | 第30-32页 |
| 1．2．1 表达载体的构建及导入 | 第30-31页 |
| 1．2．2 诱导表达及条件的优化 | 第31页 |
| 1．2．3 过表达目的蛋白存在形式及纯化 | 第31-32页 |
| 2．结果 | 第32-35页 |
| 2．1 表达载体的构建 | 第32页 |
| 2．2 诱导条件及其优化 | 第32-33页 |
| 2．3 过表达的蛋白在细菌中存在形式 | 第33-34页 |
| 2．4 镍离子亲和层析纯化结果 | 第34-35页 |
| 3．讨论 | 第35-38页 |
| 第四章 人睾丸精子蛋白SP22的真核表达 | 第38-51页 |
| 1．材料与方法 | 第38-43页 |
| 1．1 材料及主要试剂 | 第38-39页 |
| 1．2 实验方法 | 第39-43页 |
| 1．2．1 引物设计 | 第39页 |
| 1．2．2 穿梭载体的构建及倍增 | 第39页 |
| 1．2．3 目的基因DNA的制备 | 第39-40页 |
| 1．2．4 感受态酵母细胞的制备 | 第40页 |
| 1．2．5 SP22基因的电转化 | 第40页 |
| 1．2．6 酵母转化菌的鉴定 | 第40-41页 |
| 1．2．7 表型的鉴定 | 第41页 |
| 1．2．8 SP22表达阳性克隆的筛选 | 第41页 |
| 1．2．9 不同诱导时间下的重组SP22的表达 | 第41-42页 |
| 1．2．10 表达量的分析 | 第42页 |
| 1．2．11 大规模诱导 | 第42页 |
| 1．2．12 SP22的纯化 | 第42-43页 |
| 1．2．13 SP22的免疫印迹 | 第43页 |
| 1．2．14 PAS糖蛋白染色 | 第43页 |
| 2．结果 | 第43-47页 |
| 2．1 穿梭重组载体pHIL-S1／SP22的鉴定 | 第43-44页 |
| 2．2 表达SP22阳性酵母克隆菌株的筛选 | 第44-46页 |
| 2．3 SP22的镍离子亲和层析纯化 | 第46页 |
| 2．4 SP22的免疫印迹检测 | 第46-47页 |
| 2．5 糖基化分析 | 第47页 |
| 3．讨论 | 第47-51页 |
| 第五章 兔抗人睾丸精子蛋白SP22血清的制备 | 第51-55页 |
| 1．材料与方法 | 第51-52页 |
| 1．1 主要实验材料、仪器和试剂 | 第51页 |
| 1．2 免疫方案 | 第51页 |
| 1．3 心脏采血 | 第51-52页 |
| 1．4 分离血清 | 第52页 |
| 1．5 ELISA检测血清的抗体效价 | 第52页 |
| 1．6 抗体免疫双向扩散检测 | 第52页 |
| 2．结果 | 第52-54页 |
| 2．1 ELISA测定结果 | 第52-53页 |
| 2．2 双向免疫扩散结果 | 第53-54页 |
| 3．讨论 | 第54-55页 |
| 第六章 人睾丸精蛋白SP22在男性睾丸精子中的定位与分布 | 第55-61页 |
| 1．材料与方法 | 第55-57页 |
| 1．1 主要试剂与材料 | 第55页 |
| 1．2 实验方法 | 第55-57页 |
| 1．2．1 睾丸精子总蛋白提取及免疫印迹 | 第55页 |
| 1．2．2 精子免疫细胞化学 | 第55-56页 |
| 1．2．3 睾丸免疫组织化学 | 第56-57页 |
| 2．结果 | 第57-58页 |
| 2．1 免疫印迹结果 | 第57页 |
| 2．2 免疫组织及细胞化学 | 第57-58页 |
| 3．讨论 | 第58-61页 |
| 全文小结 | 第61-62页 |
| 研究生期间论文发表情况 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |