摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-11页 |
第一章 海绵相关微生物及其天然产物(文献综述) | 第11-33页 |
·海绵和海绵相关微生物 | 第11-16页 |
·海绵天然产物的研究 | 第11-14页 |
·海绵活性物质的微生物来源 | 第14-16页 |
·海绵相关微生物研究现状 | 第16-19页 |
·海绵相关微生物来源的活性物质研究 | 第16-18页 |
·海绵微生物多样性的研究 | 第18-19页 |
·微生物活性天然产物的研究方法 | 第19-23页 |
·样品采集和微生物的分离纯化 | 第19-20页 |
·微生物的筛选 | 第20页 |
·微生物发酵 | 第20-21页 |
·微生物代谢产物分离纯化 | 第21-22页 |
·微生物活性天然产物结构分析 | 第22-23页 |
·微生物多样性的研究方法 | 第23-26页 |
·克隆基因文库分析法 | 第24-25页 |
·荧光原位杂交技术 | 第25-26页 |
·RFLP技术 | 第26页 |
·DGGE技术 | 第26页 |
·本课题的研究背景和计划 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-33页 |
第二章 海绵放线菌活性菌株筛选及活性物质分离提取 | 第33-54页 |
·引言 | 第33页 |
·实验材料及仪器 | 第33-34页 |
·实验材料 | 第33-34页 |
·仪器 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-39页 |
·杯碟法测抗菌活性 | 第34-35页 |
·抗肿瘤活性测定(MTT法) | 第35-36页 |
·海绵放线菌抗菌、抗肿瘤活性筛选 | 第36页 |
·各活性菌株发酵培养的基础培养基 | 第36-37页 |
·活性菌株的稳定性考察 | 第37页 |
·生物活性物质稳定性和极性考察 | 第37页 |
·Hp-109发酵条件优化 | 第37-38页 |
·氮源优化 | 第37-38页 |
·正交设计优化各发酵条件 | 第38页 |
·Hp-109发酵液的制备 | 第38页 |
·发酵液和菌体的萃取、浓缩 | 第38页 |
·分离纯化过程中抗菌活性测定和薄层层析分析 | 第38-39页 |
·结果与讨论 | 第39-52页 |
·抗菌、抗肿瘤活性菌株的筛选 | 第39-40页 |
·发酵基础培养基的确定 | 第40-41页 |
·活性菌株的稳定性考察 | 第41-43页 |
·不同批次菌株的活性稳定性 | 第41-42页 |
·不同代菌株的活性稳定性 | 第42-43页 |
·生物活性物质的稳定性与极性 | 第43-44页 |
·生物活性物质的热稳定性 | 第43页 |
·生物活性物质的极性 | 第43-44页 |
·菌株筛选及稳定性考察讨论 | 第44页 |
·Hp-109发酵条件优化 | 第44-47页 |
·Hp-109氮源优化 | 第44-45页 |
·活性物质产生的最佳培养条件 | 第45-47页 |
·Hp-109批量发酵及活性物质提取 | 第47-49页 |
·活性物质的分离纯化 | 第49-52页 |
·分离基本过程 | 第49页 |
·分离具体过程 | 第49-52页 |
·活性物质结构的初步分析 | 第52页 |
·小结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-54页 |
第三章 海绵放线菌活性诱导的研究 | 第54-68页 |
·引言 | 第54页 |
·实验材料及仪器 | 第54-55页 |
·实验方法 | 第55-58页 |
·培养基优化诱导活性物质 | 第55-56页 |
·共培养诱导活性物质 | 第56-58页 |
·结果与讨论 | 第58-67页 |
·培养基筛选 | 第58-62页 |
·抗枯草芽胞杆菌活性物质的培养基筛选 | 第58-59页 |
·抗白假丝酵母菌活性物质的培养基筛选 | 第59-60页 |
·抗黑曲霉菌活性物质的培养基筛选 | 第60-62页 |
·抗菌培养基筛选讨论 | 第62页 |
·共培养研究 | 第62-67页 |
·菌株初步鉴定结果 | 第62-63页 |
·测试菌株在单培养和共培养模式下的抗菌活性 | 第63-64页 |
·代谢产物谱 | 第64-65页 |
·活性成分的确定 | 第65-66页 |
·共培养讨论 | 第66-67页 |
·小结 | 第67页 |
参考文献 | 第67-68页 |
第四章 繁茂膜海绵胞内细菌多样性研究 | 第68-90页 |
·引言 | 第68页 |
·仪器及实验材料 | 第68-69页 |
·样品采集 | 第68页 |
·试剂与溶液 | 第68-69页 |
·仪器 | 第69页 |
·实验方法 | 第69-77页 |
·海绵细胞分离 | 第69-71页 |
·海绵细胞分离流程 | 第69-70页 |
·前处理 | 第70页 |
·离散制备全细胞 | 第70页 |
·Ficoll密度梯度离心分离细胞 | 第70-71页 |
·海绵胞内菌基因组DNA提取 | 第71页 |
·16S rDNA目的片断PCR扩增、PCR产物纯化 | 第71-73页 |
·TA Clone | 第73-75页 |
·PCR技术和双酶切筛选有效的阳性克隆 | 第75-77页 |
·有效的阳性克隆插入片断测序 | 第77页 |
·16S rDNA的系统发育树分析 | 第77页 |
·实验结果与讨论 | 第77-88页 |
·海绵细胞分离和形态观察 | 第77-80页 |
·胞内菌基因组DNA提取、PCR扩增、TA克隆及筛选 | 第80-82页 |
·有效序列测序及系统发育树分析 | 第82-88页 |
·小结 | 第88页 |
参考文献 | 第88-90页 |
第五章 总结论 | 第90-92页 |
附录 | 第92-99页 |
作者简介及发表文章目录 | 第99-100页 |
致谢 | 第100页 |