| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 双生病毒概述 | 第10-28页 |
| 1 双生病毒的性质 | 第10-14页 |
| ·双生病毒的分类 | 第10-11页 |
| ·玉米线条病毒属(Mastrevirus) | 第10页 |
| ·甜菜曲顶病毒属(Curtovirus) | 第10-11页 |
| ·番茄伪曲顶病毒属(Topocuvirus) | 第11页 |
| ·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus) | 第11页 |
| ·介体传播 | 第11-12页 |
| ·双生病毒所引起的症状和细胞病理变化 | 第12页 |
| ·双生病毒的检测与鉴定 | 第12-14页 |
| ·血清学鉴定 | 第12-13页 |
| ·核酸杂交检测 | 第13页 |
| ·PCR技术 | 第13-14页 |
| 2 双生病毒的基因组结构及功能 | 第14-17页 |
| ·玉米线条病毒属(Mastrevirus) | 第14-15页 |
| ·基因组结构 | 第14页 |
| ·功能 | 第14-15页 |
| ·甜菜曲顶病毒属(Curtovirus)和番茄伪曲顶病毒属(Topocuvirus) | 第15页 |
| ·甜菜曲顶病毒属的基因组结构及功能 | 第15页 |
| ·番茄伪曲顶病毒属的基因组结构及功能 | 第15页 |
| ·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus) | 第15-17页 |
| ·基因组结构 | 第15-16页 |
| ·功能 | 第16-17页 |
| 3 双生病毒的复制 | 第17-19页 |
| ·复制方式 | 第17-18页 |
| ·复制的起始位点以及相关蛋白 | 第18-19页 |
| 4 双生病毒的转录 | 第19-20页 |
| ·双生病毒转录的特点 | 第19页 |
| ·双生病毒转录的调控 | 第19-20页 |
| ·Rep蛋白的自主调控功能 | 第19-20页 |
| ·AC2／C2的反式激活调控(trans-activation regularion) | 第20页 |
| ·寄主细胞因子的作用 | 第20页 |
| 5 双生病毒的运动 | 第20-22页 |
| ·双组份双生病毒的运动 | 第20-21页 |
| ·单组分双生病毒的运动 | 第21-22页 |
| 6 双生病毒伴随的小分子DNA | 第22-25页 |
| ·缺陷型小分子DNA | 第23-24页 |
| ·类似nanoviruses的小分子DNA1 | 第24页 |
| ·卫星DNAβ分子 | 第24-25页 |
| 7 双生病毒的进化 | 第25-28页 |
| ·地理隔离 | 第25-26页 |
| ·生物因素 | 第26页 |
| ·病毒间重组 | 第26-27页 |
| ·属间重组 | 第26-27页 |
| ·属内重组 | 第27页 |
| ·病毒基因组与其寄主基因组间的重组 | 第27-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-36页 |
| 1 材料 | 第28-29页 |
| ·毒源 | 第28页 |
| ·供试寄主 | 第28页 |
| ·病毒侵染性克隆 | 第28页 |
| ·抗体 | 第28页 |
| ·菌株和质粒 | 第28页 |
| ·试剂、溶液和仪器 | 第28-29页 |
| 2 方法 | 第29-36页 |
| ·PCR扩增以及产物纯化技术 | 第29-30页 |
| ·DNA克隆技术 | 第30-31页 |
| ·连接 | 第30页 |
| ·感受态细胞制备 | 第30-31页 |
| ·转化 | 第31页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第31-32页 |
| ·碱裂解法 | 第31-32页 |
| ·质粒微量提取试剂盒 | 第32页 |
| ·PCR鉴定 | 第32页 |
| ·酶切鉴定 | 第32页 |
| ·外源基因的原核表达及产物纯化 | 第32-33页 |
| ·诱导表达 | 第32-33页 |
| ·表达产物在变性条件下的大量提取和纯化 | 第33页 |
| ·多克隆抗体制各 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE与Western印迹分析 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE | 第33-34页 |
| ·电转移 | 第34页 |
| ·Western blot | 第34页 |
| ·免疫胶体金标记技术 | 第34-36页 |
| ·植物组织的固定与包埋(低温包埋法) | 第34-35页 |
| ·胶体金标记技术 | 第35页 |
| ·切片的染色 | 第35页 |
| ·超薄切片的电镜观察 | 第35-36页 |
| 第三章 烟草曲茎病毒(TbCSV)AC2和AC4基因的原核表达 | 第36-42页 |
| 1 材料与方法 | 第36-38页 |
| ·毒源 | 第36-37页 |
| ·菌株、质粒与试剂 | 第37页 |
| ·TbCSV AC2基因和AC4基因的克隆及原核表达载体构 | 第37页 |
| ·诱导表达和蛋白纯化 | 第37-38页 |
| ·TbCSV AC4蛋白多克隆抗体的制备 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-40页 |
| ·TbCSV AC2基因和AC4基因在大肠杆菌中的表达 | 第38页 |
| ·TbCSV AC4蛋白多克隆抗体的制备及其特异性检测 | 第38-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 烟草曲茎病毒(TbCSV)AC4蛋白和复制相关蛋白(Rep)的免疫定位 | 第42-48页 |
| 1 材料与方法 | 第42-43页 |
| ·毒源 | 第42页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·抗体 | 第42页 |
| ·TbCSV AC4蛋白的免疫定位 | 第42-43页 |
| ·TbCSV复制相关蛋白(Rep)的免疫定位 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-45页 |
| ·TbCSV AC4蛋白的免疫胶体金标记定位 | 第43-44页 |
| ·TbCSV Rep蛋白的免疫胶体金标记定位 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-48页 |
| 第五章 中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCCNV)卫星DNAβC1蛋白的免疫定位 | 第48-55页 |
| 1 材料与方法 | 第48-49页 |
| ·毒源 | 第48页 |
| ·植物材料 | 第48-49页 |
| ·抗体 | 第49页 |
| ·TYLCCNV卫星DNA βC1蛋白的免疫胶体金标记 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-50页 |
| ·卫星DNA βC1蛋白在感病烟草中的免疫胶体金标记 | 第49页 |
| ·卫星DNAβC1蛋白在转Y10βC1基因烟草中的免疫胶体金标记 | 第49-50页 |
| ·βC1蛋白在无症状和有症状的转基因烟草中的免疫胶体金标记 | 第49-50页 |
| ·βC1蛋白在叶背出现瘤状物的转基因烟草中的免疫胶体金标记 | 第50页 |
| 3 讨论 | 第50-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录A 常用化学试剂和仪器 | 第63-64页 |
| 附录B 常用缓冲液及培养基配方 | 第64-70页 |
