| 目录 | 第1-12页 |
| 图表目录 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-36页 |
| 第一节 乙酰胆碱酯酶研究概况 | 第14-25页 |
| 1 胆碱酯酶及AChE的研究历史 | 第14-15页 |
| 2 AChE的组织分布 | 第15-16页 |
| 3 AChE催化部位及晶体结构 | 第16-18页 |
| 4 AChE的抑制剂 | 第18-20页 |
| 5 AChE的分子型 | 第20-22页 |
| 6 AChE的基因结构 | 第22-25页 |
| 第二节 乙酰胆碱酯酶与昆虫抗药性的关系 | 第25-32页 |
| 1 乙酰胆碱酯酶量变和害虫抗药性的关系 | 第25页 |
| 2 乙酰胆碱酯酶敏感度改变和害虫抗药性的关系 | 第25-32页 |
| ·变构AChE的生化特性 | 第25-26页 |
| ·AChE活性部位的变构 | 第26-27页 |
| ·昆虫AChE的基因结构 | 第27-28页 |
| ·变构AChE的分子生物学 | 第28-30页 |
| ·AChE抗性等位基因 | 第30-32页 |
| 第三节 杀虫药剂亚致死剂量对昆虫及其重要靶标酶影响的研究概述 | 第32-36页 |
| 1 对昆虫行为的影响 | 第32页 |
| 2 对昆虫生长发育和生殖力的影响 | 第32-34页 |
| 3 对害虫抗性发展的影响 | 第34页 |
| 4 杀虫药剂亚致死剂量对受试动物重要靶标酶的影响 | 第34-35页 |
| ·杀虫药剂亚致死剂量对较高等动物体内重要靶标酶的影响 | 第34页 |
| ·杀虫药剂亚致死剂量对昆虫体内重要靶标酶的影响 | 第34-35页 |
| 5 结语 | 第35-36页 |
| 第二章 抗胆碱酯酶剂亚致死剂量对杀虫药剂毒力影响的研究 | 第36-41页 |
| 1 材料与方法 | 第36-37页 |
| ·供试昆虫 | 第36页 |
| ·供试药剂 | 第36-37页 |
| ·试剂及仪器 | 第37页 |
| ·生物测定方法 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-39页 |
| ·棉铃虫3龄幼虫不同日龄对杀虫药剂敏感度的比较 | 第37-38页 |
| ·抗胆碱酯酶剂亚致死剂量对棉铃虫耐药性的影响 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 抗胆碱酯酶剂亚致死剂量对棉铃虫ACHE诱导的时间和剂量效应 | 第41-55页 |
| 第一节 抗胆碱酯酶剂亚致死剂量对棉铃虫诱导的时间效应 | 第42-47页 |
| 1 材料与方法 | 第42-43页 |
| ·供试昆虫 | 第42页 |
| ·供试药剂 | 第42页 |
| ·试剂及仪器 | 第42页 |
| ·AChE活性测定 | 第42-43页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-46页 |
| ·三种抗胆碱酯酶诱导药剂处理剂量 | 第43页 |
| ·抗胆碱酯酶剂亚致死剂量对棉铃虫AChE诱导的时间效应 | 第43-45页 |
| ·不同药剂诱导后AChE对底物亲和力比较 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 第二节 抗胆碱酯酶剂亚致死剂量对棉铃虫诱导的剂量效应 | 第47-52页 |
| 1 材料与方法 | 第47-48页 |
| ·供试昆虫 | 第47页 |
| ·供试药剂 | 第47页 |
| ·试剂及仪器 | 第47页 |
| ·AChE活性测定 | 第47-48页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-51页 |
| ·辛硫磷对棉铃虫幼虫AChE诱导的剂量效应 | 第48-49页 |
| ·马拉硫磷对棉铃虫幼虫AChE诱导的剂量效应 | 第49-50页 |
| ·灭多威对棉铃虫幼虫AChE诱导的剂量效应 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 第三节 抗胆碱酯酶剂亚致死剂量诱导棉铃虫不同世代生化指标的比较 | 第52-55页 |
| 1 材料与方法 | 第52-53页 |
| ·供试昆虫 | 第52页 |
| ·供试药剂 | 第52页 |
| ·试剂及仪器 | 第52页 |
| ·AChE活性测定 | 第52-53页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-54页 |
| ·辛硫磷亚致死剂量多代连续诱导对棉铃虫AChE的影响 | 第53页 |
| ·马拉硫磷和灭多威亚致死剂量多代连续诱导对棉铃虫AChE的影响 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 第四章 抗胆碱酯酶剂亚致死剂量对棉铃虫ACHE诱导的分子机制研究 | 第55-78页 |
| 第一节 棉铃虫敏感品系(SS-H，SS-N)和阳谷种群(RR-Y)的生物测定及生化指标 | 第55-60页 |
| 1 材料与方法 | 第55-56页 |
| ·供试昆虫 | 第55页 |
| ·供试药剂 | 第55页 |
| ·试剂及仪器 | 第55页 |
| ·生物测定方法 | 第55-56页 |
| ·AChE活性测定 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-59页 |
| ·抗胆碱酯酶剂对不同棉铃虫种群的毒力测定 | 第56页 |
| ·不同种群棉铃虫AChE比活力及对底物亲和力的比较 | 第56-57页 |
| ·抗胆碱酯酶剂亚致死剂量对不同种群棉铃虫AChE的诱导效应 | 第57-59页 |
| 3 讨论 | 第59-60页 |
| 第二节 棉铃虫ACHE基因的克隆与序列分析 | 第60-72页 |
| 1 实验材料和试剂 | 第60-62页 |
| ·供试昆虫 | 第60页 |
| ·化学试剂 | 第60页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第60页 |
| ·菌种和载体 | 第60页 |
| ·试剂配制 | 第60-61页 |
| ·寡核苷酸引物 | 第61-62页 |
| ·主要仪器 | 第62页 |
| 2 实验方法 | 第62-65页 |
| ·棉铃虫总RNA的提取 | 第62页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第62-63页 |
| ·PCR反应 | 第63页 |
| ·PCR产物中目的片段的回收 | 第63页 |
| ·T-A互补法克隆目的片段 | 第63-64页 |
| ·感受态细胞的制备及质粒的转化 | 第64-65页 |
| ·质粒DNA的提取(碱裂解法) | 第65页 |
| ·重组质粒的限制性酶切鉴定 | 第65页 |
| ·序列测定及分析 | 第65页 |
| 3 结果与分析 | 第65-71页 |
| ·RNA的提取结果 | 第65-66页 |
| ·PCR扩增与目的片段的回收 | 第66-67页 |
| ·基因克隆及筛选鉴定 | 第67-68页 |
| ·序列分析 | 第68-71页 |
| 4 讨论 | 第71-72页 |
| 第三节 SOUTHERN杂交 | 第72-78页 |
| 1 实验材料和试剂 | 第72-73页 |
| ·供试昆虫 | 第72页 |
| ·化学试剂 | 第72页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第72页 |
| ·试剂配制 | 第72-73页 |
| ·主要仪器 | 第73页 |
| 2 实验方法 | 第73-75页 |
| ·基因组总DNA的提取 | 第73-74页 |
| ·探针的制备和标记 | 第74页 |
| ·Southern杂交 | 第74-75页 |
| 3 结果与分析 | 第75-76页 |
| 4 讨论 | 第76-78页 |
| 第五章 抗胆碱酯酶剂亚致死剂量对棉铃虫ACHE不同分子型的影响 | 第78-89页 |
| 1 材料与方法 | 第79-81页 |
| ·供试昆虫 | 第79页 |
| ·供试药剂 | 第79页 |
| ·试剂及仪器 | 第79页 |
| ·AChE活性及对抑制剂敏感度的测定 | 第79-80页 |
| ·AChE蔗糖密度梯度离心 | 第80页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第80-81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-86页 |
| ·棉铃虫对照及处理组AChE蔗糖密度梯度离心 | 第81-82页 |
| ·棉铃虫对照及处理组AChE不同分子型对抑制剂敏感度的比较 | 第82-86页 |
| 3 讨论 | 第86-89页 |
| 第六章 棉铃虫ACHE分离纯化的初步研究 | 第89-99页 |
| 1 材料与方法 | 第90-94页 |
| ·供试昆虫 | 第90页 |
| ·化学试剂 | 第90页 |
| ·试剂配制 | 第90-92页 |
| ·主要仪器 | 第92页 |
| ·层析柱装柱、上样及洗脱方法 | 第92-93页 |
| ·AChE纯化方法 | 第93-94页 |
| ·AChE活性测定方法 | 第94页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第94页 |
| 2 结果与分析 | 第94-97页 |
| ·棉铃虫AChE的Sephadex G-25凝胶层析分离纯化 | 第94-95页 |
| ·棉铃虫AChE的Sephadex G-200凝胶层析分离纯化 | 第95-96页 |
| ·棉铃虫AChE的CEA亲和层析分离纯化 | 第96-97页 |
| ·棉铃虫AChE分离纯化结果 | 第97页 |
| 3 讨论 | 第97-99页 |
| 第七章 总结 | 第99-102页 |
| 第一节 总结与展望 | 第99-101页 |
| 第二节 本研究的创新之处 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 作者简历 | 第118页 |
