| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 缩写词表 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-45页 |
| 1．1 植物转化技术的研究进展及其在禾本科植物中的应用 | 第16-28页 |
| 1．1．1 农杆菌介导法 | 第16-20页 |
| 1．1．1．1 根癌农杆菌转化植物细胞的生物学机理 | 第16-17页 |
| 1．1．1．2 Ti质粒载体系统的构建 | 第17-18页 |
| 1．1．1．3 农杆菌转化技术在禾本科植物中的应用 | 第18-19页 |
| 1．1．1．4 根癌农杆菌转化系统的特点 | 第19-20页 |
| 1．1．2 基因枪转化法 | 第20-24页 |
| 1．1．2．1 基因枪转化的基本原理 | 第21-22页 |
| 1．1．2．2 基因枪转化技术在禾本科植物转化中的应用 | 第22页 |
| 1．1．2．3 基因枪转化技术的特点 | 第22-24页 |
| 1．1．3 其它转化方法 | 第24-28页 |
| 1．1．3．1 聚乙二醇法 | 第24页 |
| 1．1．3．2 电激法 | 第24页 |
| 1．1．3．3 花粉管通道法 | 第24-25页 |
| 1．1．3．4 显微注射法 | 第25页 |
| 1．1．3．5 超声波导入法 | 第25-26页 |
| 1．1．3．6 激光微束穿刺法 | 第26页 |
| 1．1．3．7 脂质体介导法 | 第26页 |
| 1．1．3．8 病毒介导法 | 第26-27页 |
| 1．1．3．9 浸渍法 | 第27页 |
| 1．1．3．10 电泳法 | 第27页 |
| 1．1．3．11 碳化硅纤维介导法 | 第27-28页 |
| 1．2 植物抗虫基因工程的研究进展 | 第28-38页 |
| 1．2．1 抗虫目的基因的研究 | 第29-33页 |
| 1．2．1．1 苏云金杆菌毒蛋白基因 | 第29-30页 |
| 1．2．1．2 蛋白酶抑制剂基因 | 第30-31页 |
| 1．2．1．3 淀粉酶抑制剂基因 | 第31-32页 |
| 1．2．1．4 外源凝聚素基因 | 第32页 |
| 1．2．1．5 昆虫毒素基因 | 第32-33页 |
| 1．2．2 转基因抗虫植物的研究 | 第33-36页 |
| 1．2．2．1 Bt毒蛋白基因的转化 | 第33-35页 |
| 1．2．2．2 其它抗虫基因的转化 | 第35-36页 |
| 1．2．3 植物抗虫基因工程存在的问题及其对策 | 第36-38页 |
| 1．3 植物抗真菌病害基因工程研究进展 | 第38-45页 |
| 1．3．1 抗真菌病基因的克隆 | 第39-42页 |
| 1．3．1．1 几丁质酶基因和β-1，3葡聚糖酶基因 | 第39-40页 |
| 1．3．1．2 核糖体失活蛋白基因 | 第40页 |
| 1．3．1．3 渗透蛋白基因 | 第40-41页 |
| 1．3．1．4 破坏真菌细胞膜的抗真菌蛋白基因 | 第41页 |
| 1．3．1．5 某些植物中的抗真菌蛋白基因 | 第41页 |
| 1．3．1．6 其它抗真菌蛋白基因 | 第41页 |
| 1．3．1．7 病原真菌酶的抑制蛋白基因 | 第41-42页 |
| 1．3．1．8 植保素基因 | 第42页 |
| 1．3．1．9 增强细胞壁强度酶的基因 | 第42页 |
| 1．3．2 抗真菌病基因的转化 | 第42-45页 |
| 第二章 南荻遗传转化系统的建立及外源基因转化的研究 | 第45-84页 |
| 2．1 引 言 | 第45-46页 |
| 2．2 材料与方法 | 第46-55页 |
| 2．2．1 实验材料 | 第46-47页 |
| 2．2．1．1 植物材料 | 第46页 |
| 2．2．1．2 质粒与基因 | 第46-47页 |
| 2．2．2 实验方法 | 第47-55页 |
| 2．2．2．1 外植体的培养 | 第47-48页 |
| 2．2．2．2 愈伤组织的冷冻保存 | 第48-49页 |
| 2．2．2．3 质粒DNA的制备 | 第49-51页 |
| 2．2．2．4 基因枪转化 | 第51页 |
| 2．2．2．5 转化子的筛选 | 第51-52页 |
| 2．2．2．6 植物总DNA的提取 | 第52-53页 |
| 2．2．2．7 转化植株的PCR分析 | 第53页 |
| 2．2．2．8 DNA分子杂交 | 第53-55页 |
| 2．3 结果与分析 | 第55-78页 |
| 2．3．1 南荻遗传转化系统的建立 | 第55-68页 |
| 2．3．1．1 南荻愈伤组织高频再生系统的研究 | 第55-61页 |
| 2．3．1．1．1 不同外植体愈伤组织诱导频率的比较 | 第56-57页 |
| 2．3．1．l．2 不同基本培养基对南荻愈伤组织诱导与分化频率的影响 | 第57-58页 |
| 2．3．1．1．3 继代培养时间对南荻愈伤组织分化能力的影响 | 第58-60页 |
| 2．3．1．1．4 添加MET对南荻试管苗生根能力的影响 | 第60-61页 |
| 2．3．1．2 南荻愈伤组织冷冻保存的研究 | 第61-62页 |
| 2．3．1．3 二倍体南荻与四倍体南荻愈伤组织诱导与分化培养的比较 | 第62-64页 |
| 2．3．1．4 南荻愈伤组织筛选条件的确定 | 第64-68页 |
| 2．3．2 影响南荻基因枪转化因素的研究 | 第68-72页 |
| 2．3．2．1 轰击压力 | 第68-69页 |
| 2．3．2．2 轰击次数 | 第69页 |
| 2．3．2．3 不同金粉及DNA用量 | 第69-70页 |
| 2．3．2．4 高渗处理方法的研究 | 第70页 |
| 2．3．2．5 南荻基因枪转化体系的建立 | 第70-72页 |
| 2．3．3 抗虫基因转化南荻的研究 | 第72-78页 |
| 2．3．3．1 转化植株的获得 | 第72-74页 |
| 2．3．3．2 转化植株的分子检测 | 第74-78页 |
| 2．4 讨 论 | 第78-84页 |
| 2．4．1 影响南荻基因枪转化效率的因素 | 第78-82页 |
| 2．4．1．1 影响南荻再生受体系统的因素 | 第79-80页 |
| 2．4．1．2 影响南荻转化子筛选效率的因素 | 第80-81页 |
| 2．4．1．3 基因枪转化操作技术对愈伤组织转化频率的影响 | 第81-82页 |
| 2．4．2 关于转基因抗虫南荻的生物安全性问题 | 第82-84页 |
| 第三章 籼稻遗传转化系统的优化及抗虫、抗病基因转化的研究 | 第84-128页 |
| 3．1 引 言 | 第84-85页 |
| 3．2 材料与方法 | 第85-93页 |
| 3．2．1 实验材料 | 第85-87页 |
| 3．2．1．1 供试水稻品种与品系 | 第85页 |
| 3．2．1．2 质粒与基因 | 第85-87页 |
| 3．2．2 实验方法 | 第87-93页 |
| 3．2．2．1 外植体的培养 | 第87-88页 |
| 3．2．2．1．1 培养基 | 第87页 |
| 3．2．2．1．2 培养方法 | 第87-88页 |
| 3．2．2．2 质粒DNA的制备 | 第88页 |
| 3．2．2．3 基因枪转化 | 第88页 |
| 3．2．2．4 农杆菌转化 | 第88-89页 |
| 3．2．2．5 转化子的筛选 | 第89-90页 |
| 3．2．2．5．1 筛选剂抑制效果的测定 | 第89页 |
| 3．2．2．5．2 转化子的筛选与再生培养 | 第89-90页 |
| 3．2．2．6 植物总DNA的提取 | 第90页 |
| 3．2．2．7 转化植株的PCR分析 | 第90-91页 |
| 3．2．2．7．1 Hpt基因的PCR分析方法 | 第90页 |
| 3．2．2．7．2 Bar基因的PCR分析 | 第90-91页 |
| 3．2．2．8 DNA分子杂交 | 第91页 |
| 3．2．2．9 GUS组织化学染色 | 第91页 |
| 3．2．2．10 转化植株的抗病性鉴定 | 第91-92页 |
| 3．2．2．11 转化植株的抗虫性鉴定 | 第92-93页 |
| 3．3 结果与分析 | 第93-121页 |
| 3．3．1 提高籼稻胚性愈伤组织诱导与分化频率的研究 | 第93-100页 |
| 3．3．1．1 不同基本培养基对籼稻胚性愈伤组织诱导频率的影响 | 第93-94页 |
| 3．3．1．2 不同籼稻品种愈伤组织分化频率的比较 | 第94-95页 |
| 3．3．1．3 添加ABA对籼稻愈伤组织诱导频率和生长状态的影响 | 第95-96页 |
| 3．3．1．4 不同浓度的2，4-D对愈伤组织诱导频率的影响 | 第96-98页 |
| 3．3．1．5 籼稻成熟胚的贮存时间对其愈伤组织诱导与分化率频率的影响 | 第98-99页 |
| 3．3．1．6 不同的培养基固化剂对愈伤组织培养质量的影响 | 第99-100页 |
| 3．3．2 转化子筛选方案的研究 | 第100-104页 |
| 3．3．2．1 愈伤组织筛选条件的确定 | 第100-103页 |
| 3．3．2．2 籼稻苗期叶片筛选鉴定方法的建立 | 第103-104页 |
| 3．3．3 籼稻基因枪转化技术的优化 | 第104-108页 |
| 3．3．3．1 金粉及DNA用量对籼稻外源基因转化频率的影响 | 第104页 |
| 3．3．3．2 不同轰击压力对籼稻外源基因转化频率的影响 | 第104-105页 |
| 3．3．3．3 不同轰击次数对籼稻外源基因转化频率的影响 | 第105页 |
| 3．3．3．4 高渗处理方案的优化 | 第105-107页 |
| 3．3．3．5 优化的籼稻基因枪转化技术体系的建立 | 第107-108页 |
| 3．3．4 籼稻农杆菌转化技术的优化 | 第108-112页 |
| 3．3．4．1 不同农杆菌株对水稻愈伤组织转化频率的比较 | 第108页 |
| 3．3．4．2 头孢霉素和羧苄青霉素的抑菌效果的比较 | 第108-110页 |
| 3．3．4．3 头孢霉素和羧苄青霉素对籼稻愈伤组织生长的影响 | 第110页 |
| 3．3．4．4 农杆菌对水稻愈伤组织感染方法的优化 | 第110-112页 |
| 3．3．5 籼稻抗虫、抗病基因的遗传转化 | 第112-121页 |
| 3．3．5．1 转化植株的获得 | 第112-113页 |
| 3．3．5．2 转化植株的分子检测 | 第113-117页 |
| 3．3．5．3 转化植株的抗虫鉴定 | 第117-118页 |
| 3．3．5．4 转化植株的抗病性鉴定 | 第118-121页 |
| 3．4 讨 论 | 第121-128页 |
| 3．4．1 影响农杆菌转化水稻的主要因素 | 第121-124页 |
| 3．4．1．1 农杆菌菌株的选择和表达载体的构建 | 第122页 |
| 3．4．1．2 Vir基因活化物的添加 | 第122-123页 |
| 3．4．1．3 选择适合的功能细胞作为转化受体 | 第123-124页 |
| 3．4．2 影响水稻胚性愈伤组织形成的主要因素 | 第124-128页 |
| 3．4．2．1 受体材料基因型 | 第125页 |
| 3．4．2．2 外源激素 | 第125-126页 |
| 3．4．2．3 渗透压 | 第126页 |
| 3．4．2．4 外植体来源 | 第126-128页 |
| 参考文献 | 第128-143页 |
| 致 谢 | 第143-144页 |
| 作者简历 | 第144-145页 |
| 在读期间的学术成果 | 第145-146页 |
