| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 第一章 胚胎干细胞培养体系的建立和研究 | 第10-24页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1． 材料和方法 | 第11-15页 |
| 1．1 实验动物 | 第11页 |
| 1．2 主要仪器与试剂 | 第11-13页 |
| 1．2．1 主要仪器 | 第11-12页 |
| 1．2．2 主要试剂 | 第12页 |
| 1．2．3 有关溶液的配置 | 第12-13页 |
| 1．3 实验方法 | 第13-15页 |
| 1．3．1 小鼠、牛及兔原代成纤维细胞的分离培养 | 第13-14页 |
| 1．3．2 小鼠、牛及兔成纤维细胞的继代培养 | 第14页 |
| 1．3．3 小鼠、牛及兔成纤维细胞饲养层的制作 | 第14页 |
| 1．3．4 培养体系检测 | 第14-15页 |
| 1．3．5 胚胎成纤维细胞的冻存及复苏 | 第15页 |
| 2． 实验结果 | 第15-17页 |
| 2．1 胚胎成纤维细胞生长行为 | 第15页 |
| 2．2 胚胎成纤维细胞的继代培养 | 第15-16页 |
| 2．3 小鼠胚胎在不同来源饲养层上的生长行为 | 第16-17页 |
| 2．4 小鼠胚胎在不同代数成纤维细胞饲养层上的生长行为 | 第17页 |
| 2．5 胚胎成纤维细胞的复苏培养 | 第17页 |
| 3． 讨论 | 第17-20页 |
| 3．1 细胞消化液作用时间对成纤维细胞活力的影响 | 第17-18页 |
| 3．2 影响饲养层质量的因素 | 第18-19页 |
| 3．2．1 丝裂霉素C处理时间对饲养层质量的影响 | 第18页 |
| 3．2．2 胎儿胎龄对饲养层质量的影响 | 第18页 |
| 3．2．3 胰蛋白酶消化作用时间对饲养层质量的影响 | 第18页 |
| 3．2．4 细胞密度及代数对饲养层质量的影响 | 第18页 |
| 3．2．5 血清质量对饲养层质量的影响 | 第18-19页 |
| 3．2．6 胚胎成纤维细胞代数对饲养层质量的影响 | 第19页 |
| 3．2．7 成纤维细胞的冷冻保存对饲养层质量的影响 | 第19页 |
| 3．3 不同饲养层对胚胎干细胞分离与克隆的影响 | 第19-20页 |
| 3．4 胚胎成纤维细胞冷冻过程的影响因素 | 第20页 |
| 4． 结论 | 第20-22页 |
| 图版及图版说明 | 第22-24页 |
| 第二章 原生殖细胞的获得与体外培养 | 第24-32页 |
| 引言 | 第24-25页 |
| 1． 材料和方法 | 第25-27页 |
| 1．1 实验动物 | 第25页 |
| 1．2 主要仪器与试剂 | 第25-26页 |
| 1．2．1 主要仪器 | 第25页 |
| 1．2．2 主要试剂 | 第25页 |
| 1．2．3 有关溶液的配置 | 第25-26页 |
| 1．3 实验方法 | 第26-27页 |
| 1．3．1 饲养层的准备 | 第26页 |
| 1．3．2 原生殖细胞的获得 | 第26页 |
| 1．3．3 原生殖细胞的培养 | 第26-27页 |
| 2． 实验结果 | 第27页 |
| 2．1 原生殖细胞的形态特征及体外生长行为 | 第27页 |
| 2．2 原生殖细胞的培养 | 第27页 |
| 3． 讨论 | 第27-30页 |
| 3．1 性腺的获取和原生殖细胞的识别 | 第27-28页 |
| 3．2 影响原生殖细胞体外培养增殖的因素 | 第28-30页 |
| 4． 结论 | 第30-31页 |
| 图版及图版说明 | 第31-32页 |
| 第三章 牛、兔干细胞的分离与培养 | 第32-70页 |
| 引言 | 第32页 |
| 1． 材料和方法 | 第32-33页 |
| 1．1 实验动物 | 第32-33页 |
| 1．2 主要仪器与试剂 | 第33页 |
| 1．2．1 主要仪器 | 第33页 |
| 1．2．2 主要试剂 | 第33页 |
| 1．2．3 有关溶液的配置 | 第33页 |
| 1．3 实验方法 | 第33页 |
| 1．3．1 饲养层的准备 | 第33页 |
| 1．3．2 原生殖细胞的获得 | 第33页 |
| 1．3．3 原生殖细胞的培养与胚胎干细胞集落的识别 | 第33页 |
| 1．3．4 胚胎干细胞的传代 | 第33页 |
| 1．3．5 胚胎干细胞的传代、冻存和复苏 | 第33页 |
| 1．3．6 胚胎干细胞的体外分化 | 第33页 |
| 2． 实验结果 | 第33-35页 |
| 2．1 原生殖细胞的原代培养 | 第33-34页 |
| 2．2 胚胎干细胞建系及其传代 | 第34-35页 |
| 2．3 胚胎干细胞体外分化实验 | 第35页 |
| 3． 讨论 | 第35-41页 |
| 3．1 兔胚胎干细胞建系与兔品种、胎龄的关系 | 第35-37页 |
| 3．2 细胞生长因子对胚胎干细胞建系的影响 | 第37-38页 |
| 3．2．1 白血病抑制因子（LIF） | 第37-38页 |
| 3．2．2 干细胞因子（SCF） | 第38页 |
| 3．3 不同饲养层对兔EG细胞建系的影响 | 第38-40页 |
| 3．4 影响ES细胞分离培养的因素 | 第40-41页 |
| 3．4．1 基本培养基 | 第40页 |
| 3．4．2 血清 | 第40页 |
| 3．4．3 外源性物质的添加 | 第40-41页 |
| 3．4．4 原始生殖细胞分离方法对干细胞分离的影响 | 第41页 |
| 4． 结论 | 第41-43页 |
| 图版及图版说明 | 第43-70页 |
| 结语 | 第70-46页 |
| 参考文献 | 第46-59页 |
| 英文摘要 | 第59-61页 |
| 附录 | 第61-70页 |
| 综 述 | 第61-70页 |
| 1． 建立胚胎干细胞系的一般方法 | 第62-64页 |
| 2． 胚胎干细胞的应用 | 第64-66页 |
| 3． 各种哺乳动物胚胎干细胞研究现状 | 第66-68页 |
| 4． 分子水平的胚胎干细胞研究成果 | 第68-70页 |
