BMP家族一个新基因的部分cDNA克隆
英文缩写词表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
文献回顾 | 第12-54页 |
一、BMP研究进展 | 第12-45页 |
(一) 引言 | 第12-13页 |
(二) BMP的分离纯化及性质 | 第13-16页 |
1.BMP的组织分布和分离纯化的材料来源 | 第13页 |
2.BMP的分离纯化方法 | 第13-14页 |
(1) BMG的制备 | 第14页 |
(2) 萃取 | 第14页 |
(3) 层析 | 第14页 |
3.BMP的理化性质 | 第14-15页 |
4.BMP的免疫原性 | 第15-16页 |
(三) BMP的基因克隆及结构特征 | 第16-20页 |
1.BMP的基因克隆 | 第16-17页 |
2.BMP的结构特征 | 第17-20页 |
3.BMP的染色体定位 | 第20页 |
(四) BMP的表达研究 | 第20-22页 |
1.在大肠杆菌中的表达 | 第21页 |
2.在真核细胞中的表达 | 第21-22页 |
(五) BMP的受体与信号转导 | 第22-28页 |
1.BMP的受体 | 第22-25页 |
2.BMP的信号转导 | 第25-28页 |
(六) BMP的生物学活性及活性检测 | 第28-37页 |
1.BMP的生物学活性 | 第28-37页 |
(1) 诱骨活性及其机理 | 第28-33页 |
(2) 在胚胎发生中的作用 | 第33页 |
(3) 在神经发育中的作用 | 第33-34页 |
(4) 在造血组织发育中的作用 | 第34-35页 |
(5) 诱导细胞凋亡 | 第35页 |
(6) 在精子发生及胚胎形成中的作用 | 第35-36页 |
(7) 促进肝细胞的增殖 | 第36页 |
(8) 其它作用 | 第36-37页 |
2.BMP的活性检测 | 第37页 |
(七) BMP的载体系统 | 第37-40页 |
(八) BMP植入后的免疫反应 | 第40-43页 |
(九) BMP的应用前景及存在问题 | 第43-45页 |
二、cDNA克隆技术现状 | 第45-54页 |
(一) cDNA克隆的策略 | 第45-46页 |
(二) cDNA克隆的若干方法 | 第46-54页 |
1.同源新基因的克隆 | 第46-49页 |
(1) PCR法筛选文库 | 第46-47页 |
(2) RACE法扩增全长cDNA | 第47-49页 |
2.未知新基因的克隆 | 第49-54页 |
(1) 递减杂交技术 | 第49页 |
(2) 表达序列标签 | 第49-51页 |
(3) 差示PCR技术 | 第51-53页 |
(4) RNA指印法 | 第53-54页 |
论文正文 | 第54-80页 |
前言 | 第54-55页 |
材料与方法 | 第55-65页 |
一、主要实验材料 | 第55-56页 |
二、主要实验方法 | 第56-65页 |
(一) 探针的制备 | 第56-61页 |
(二) cDNA文库的筛选 | 第61-63页 |
(三) 序列分析 | 第63页 |
(四) 计算机分析 | 第63-65页 |
实验结果 | 第65-76页 |
一、探针的制备 | 第65-66页 |
(一) PCR扩增hBMP3成熟肽段 | 第65-66页 |
(二) 探针用BMP成熟肽段的序列分析 | 第66页 |
二、cDNA文库的筛选 | 第66-68页 |
(一) 噬斑原位杂交结果 | 第66-67页 |
(二) PCR扩增阳性噬斑中的插段 | 第67-68页 |
(三) Southern blot结果 | 第68页 |
三、阳性噬斑中插段的序列测定 | 第68-70页 |
四、计算机分析结果 | 第70-76页 |
(一) 同源性分析 | 第70-72页 |
(二) 局部组成复杂性分析 | 第72-73页 |
(三) 基因片段的编码区分析 | 第73-75页 |
(四) 氨基酸同源性分析 | 第75-76页 |
讨论 | 第76-79页 |
小结 | 第79-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-89页 |