| 英文缩写和代号 | 第1-13页 |
| 中文摘要 | 第13-16页 |
| 英文摘要 | 第16-18页 |
| 文献回顾 | 第18-27页 |
| 一、牙髓碱性磷酸酶的研究概况 | 第18-22页 |
| (一) 碱性磷酸酶的一般性质 | 第18-19页 |
| (二) 牙髓碱性磷酸酶的研究 | 第19-20页 |
| (三) 碱性磷酸酶的基因研究 | 第20-21页 |
| (四) 碱性磷酸酶促进钙化的机制 | 第21-22页 |
| 二、氢氧化钙促牙本质修复的作用机制 | 第22-27页 |
| (一) 牙髓的自我修复潜力 | 第23页 |
| (二) 碱性作用 | 第23-24页 |
| (三) 钙离子的作用 | 第24-27页 |
| 前言 | 第27-29页 |
| 第一部分 狗牙髓碱性磷酸酶的提取、纯化和理化性质的研究 | 第29-45页 |
| 实验材料 | 第29-30页 |
| 实验方法 | 第30-36页 |
| (一) 牙髓ALP的提取 | 第30-31页 |
| (二) ALP活性测定 | 第31页 |
| (三) DEAE-纤维素离子交换层析 | 第31页 |
| (四) Sephadex G-200分子筛层析 | 第31页 |
| (五) 蛋白质定量测定 | 第31-32页 |
| (六) 肾脏ALP的提取 | 第32页 |
| (七) 圆盘PAGE | 第32-33页 |
| (八) 琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| (九) SDS-PAGE | 第33-35页 |
| (十) ALP的热稳定性 | 第35-36页 |
| (十一) 底物浓度对ALP活性的影响 | 第36页 |
| (十二) 牙髓ALP的最适pH | 第36页 |
| (十三) 离子对牙髓ALP活性的影响 | 第36页 |
| 实验结果 | 第36-42页 |
| (一) DEAE-纤维素离子交换层析 | 第36页 |
| (二) Sephadex G-200分子筛层析 | 第36-38页 |
| (三) 纯化牙髓ALP的活性分析 | 第38页 |
| (四) 圆盘PAGE | 第38-39页 |
| (五) 琼脂糖凝胶电泳 | 第39页 |
| (六) SDS-PAGE | 第39-40页 |
| (七) ALP的热稳定性 | 第40页 |
| (八) ALP的底物效应和最适pH | 第40-41页 |
| (九) 离子对ALP活性的影响 | 第41-42页 |
| 讨论 | 第42-45页 |
| 第二部分 大鼠肝／骨／肾型碱性磷酸酶部分cDNA的定序克隆 | 第45-59页 |
| 实验材料 | 第46-48页 |
| 实验方法 | 第48-53页 |
| (一) 寡聚脱氧核苷引物的合成和纯化 | 第48-50页 |
| (二) 大鼠L／B／K-ALP总RNA的提取 | 第50页 |
| (三) 大鼠L／B／K-ALP双链cDNA的合成和PCR反应 | 第50-51页 |
| (四) 大鼠L／B／K-ALP部分cDNA的定序克隆 | 第51-53页 |
| (五) 大鼠L／B／K-ALP部分cDNA克隆的筛选和鉴定 | 第53页 |
| 实验结果 | 第53-55页 |
| (一) 反转录PCR | 第53页 |
| (二) 大鼠L／B／K-ALP部分cDNA克隆的鉴定 | 第53-55页 |
| 讨论 | 第55-59页 |
| 第三部分 氢氧化钙对体外培养牙髓细胞的核酸合成、ALP活性和ALP基因表达的作用 | 第59-78页 |
| 一、氢氧化钙对体外培养大鼠牙髓细胞DNA、RNA合成的作用 | 第59-68页 |
| 实验材料 | 第60页 |
| 实验方法 | 第60-62页 |
| (一) 细胞系的建立 | 第60-61页 |
| (二) 氢氧化钙溶液的制备 | 第61页 |
| (三) 氢氧化钙对细胞DNA、RNA合成的影响 | 第61-62页 |
| 实验结果 | 第62-65页 |
| (一) 培养细胞生长动态 | 第62-63页 |
| (二) 氢氧化钙对细胞DNA、RNA合成的浓度效应 | 第63-64页 |
| (三) 氢氧化钙对细胞DNA、RNA合成的时间效应 | 第64-65页 |
| 讨论 | 第65-68页 |
| 二、氢氧化钙对牙髓碱性磷酸酶活性和基因表达的作用 | 第68-78页 |
| 实验材料 | 第68-69页 |
| 实验方法 | 第69-75页 |
| (一) 氢氧化钙、氯化钙、氢氧化钡对牙髓组织ALP水解活性的影响 | 第69-70页 |
| (二) 氢氧化钙、氯化钙、氢氧化钡对体外培养人牙髓细胞ALP活性的影响 | 第70页 |
| (三) 氢氧化钙、氯化钙、氢氧化钡对体外培养人牙髓细胞ALP基因表达水平的影响 | 第70-75页 |
| 实验结果 | 第75-78页 |
| (一) 氢氧化钙等药物对人牙髓组织ALP水解活性的影响 | 第75页 |
| (二) 氢氧化钙等药物对体外培养人牙髓细胞ALP活性的影响 | 第75-76页 |
| (三) 氢氧化钙等药物对人牙髓细胞ALP基因表达水平的影响 | 第76-78页 |
| 讨论 | 第78-83页 |
| 总结 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-89页 |
| 综述 | 第89-111页 |
