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猪胎儿成纤维细胞和卵巢表皮上皮细胞重编程能力的比较研究

摘要第1-7页
Abstract第7-8页
1 前言第8-20页
   ·动物细胞培养概述第8-11页
     ·动物细胞培养的发展历史第8-9页
     ·动物细胞体外培养技术的应用第9-10页
       ·在生物学基础研究中的应用第9-10页
       ·在动物细胞产品开发中的应用第10页
       ·在医药医学中的应用第10页
       ·在动物遗传育种中的应用第10页
     ·动物细胞培养的发展方向第10-11页
       ·临床生物治疗第10-11页
       ·疫苗研制第11页
       ·药理检测模型第11页
   ·卵巢表皮上皮的生物学特性及研究进展第11-14页
     ·成年动物体内的卵巢表皮上皮第11-13页
       ·卵巢表皮上皮的结构第11-12页
       ·卵巢表皮上皮的功能第12页
       ·卵巢表皮上皮的特性第12-13页
     ·卵巢表皮上皮细胞的体外培养第13-14页
       ·体外常规培养方法及鉴定手段第13页
       ·三维体外培养体系第13-14页
       ·物种间卵巢表皮上皮细胞性质的变化第14页
   ·胎儿成纤维细胞的生物学特性及其应用第14-15页
   ·细胞转染技术简介第15页
   ·诱导多潜能干细胞的研究进展及其应用第15-18页
     ·国内外研究进展第16-17页
     ·诱导多潜能干细胞的应用第17-18页
   ·研究目的及实验技术路线第18-20页
2 实验材料与方法第20-30页
   ·实验设备第20页
   ·实验材料第20页
   ·实验试剂第20-23页
   ·实验方法第23-30页
     ·猪卵巢表皮上皮细胞系的建立第23-25页
       ·猪卵巢表皮上皮细胞的分离第23页
       ·猪卵巢表皮上皮细胞的纯化第23-24页
       ·猪卵巢表皮上皮细胞的传代第24页
       ·猪卵巢表皮上皮细胞的冻存第24页
       ·猪卵巢表皮上皮细胞的生物学检测第24-25页
       ·猪卵巢表皮上皮细胞特异性蛋白的检测第25页
     ·病毒包装第25-27页
       ·质粒转化及摇菌第25-26页
       ·质粒的提取第26-27页
       ·利用Lipofectamine2000进行病毒包装第27页
     ·两种细胞重编程能力的比较第27-30页
       ·猪胎儿成纤维细胞及猪卵巢表皮上皮细胞的准备第27-28页
       ·细胞转染第28页
       ·小鼠胚胎成纤维细胞的分离第28-29页
       ·饲养层的制作第29页
       ·重编程过程的观察第29页
       ·碱性磷酸酶染色第29-30页
3 实验结果第30-41页
   ·猪卵巢表皮上皮细胞系的建立第30-35页
     ·猪卵巢表皮上皮的分离第30页
     ·猪卵巢表皮上皮细胞的纯化第30-31页
     ·猪卵巢表皮上皮细胞的生物学检测第31-33页
       ·细胞接种成活率第31-32页
       ·细胞群体倍增时间第32页
       ·细胞生长曲线第32-33页
       ·细胞直径的统计第33页
     ·猪卵巢表皮上皮细胞特异性蛋白的检测第33-35页
       ·角蛋白免疫荧光染色结果第33-34页
       ·CD31免疫荧光染色结果第34-35页
       ·factorⅧ免疫荧光染色结果第35页
   ·病毒包装第35-38页
     ·质粒的转化及摇菌第35页
     ·质粒的提取第35-37页
     ·利用Lipofectamine2000进行病毒包装第37-38页
   ·两种细胞重编程能力的比较第38-41页
     ·利用逆转录病毒转染细胞第38-39页
     ·重编程过程的观察第39页
     ·碱性磷酸酶染色第39-41页
4 讨论第41-47页
   ·猪卵巢表皮上皮细胞系的建立第41-42页
   ·病毒包装第42-44页
   ·两种细胞重编程能力的比较第44-47页
5 结论第47-48页
   ·猪卵巢表皮上皮细胞系的建立第47页
   ·病毒包装第47页
   ·两种细胞重编程能力的比较第47-48页
6 创新点第48-49页
参考文献第49-55页
致谢第55-56页
附录第56页

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