| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| ·ING4基因及其在肿瘤发生中的作用 | 第14-20页 |
| ·ING4基因 | 第14-15页 |
| ·ING4基因的作用机制 | 第15-18页 |
| ·ING4基因与肿瘤发生 | 第18-20页 |
| ·慢病毒载体特性、构建和优点 | 第20-24页 |
| 第二章 本论文研究的目的、方法、实验方案的设计、意义 | 第24-32页 |
| ·研究目的 | 第24页 |
| ·研究方法 | 第24-25页 |
| ·实验设计方案 | 第25-30页 |
| ·研究意义 | 第30-32页 |
| 第三章 ING4基因在不同肿瘤细胞中表达量的变化 | 第32-40页 |
| ·材料和仪器 | 第32-33页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-36页 |
| ·细胞培养 | 第33-34页 |
| ·骨髓单个核细胞分离 | 第34页 |
| ·组织单个细胞制备 | 第34页 |
| ·总RNA提取和逆转录 | 第34-35页 |
| ·Real time定量PCR标准品制备 | 第35页 |
| ·Real time定量PCR | 第35-36页 |
| ·结果 | 第36-39页 |
| ·ING4基因在多种肿瘤细胞中表达 | 第36页 |
| ·ING4定量测定 | 第36-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 ING4基因突变检测 | 第40-48页 |
| ·材料和仪器 | 第40-41页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·主要仪器 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41页 |
| ·细胞培养 | 第41页 |
| ·骨髓单个核细胞分离 | 第41页 |
| ·总 RNA提取和逆转录 | 第41页 |
| ·T-A克隆重组质粒的筛选与鉴定 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-45页 |
| ·ING4 cDNA的克隆 | 第41-42页 |
| ·T-A克隆重组质粒的筛选与鉴定 | 第42-43页 |
| ·基因测序与分析 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| 第五章 ING4基因的克隆、鉴定和PNL-ING4慢病毒表达载体构建 | 第48-60页 |
| ·材料和仪器 | 第48-49页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-51页 |
| ·细胞培养 | 第49页 |
| ·总RNA提取和逆转录 | 第49页 |
| ·T-A克隆重组质粒的筛选与鉴定 | 第49页 |
| ·PNL-EGFP慢病毒载体的改造 | 第49-50页 |
| ·PNL-ING4的设计及慢病毒载体的构建 | 第50页 |
| ·慢病毒包装和滴度测定 | 第50页 |
| ·慢病毒转化293T细胞 | 第50-51页 |
| ·结果 | 第51-58页 |
| ·人骨髓MSC的分离培养和表面标志 | 第51-52页 |
| ·人ING4 cDNA的克隆 | 第52页 |
| ·T-A克隆重组质粒的筛选与鉴定 | 第52-53页 |
| ·基因测序与分析 | 第53-55页 |
| ·PNL-EGFP慢病毒载体的改造 | 第55-56页 |
| ·慢病毒表达载体PNL-ING4的构建与鉴定 | 第56-57页 |
| ·慢病毒的包装 | 第57-58页 |
| ·293T细胞中ING4mRNA的检测 | 第58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 结论与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70页 |