| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| 1.轮状病毒病原学研究 | 第10-12页 |
| ·形态结构 | 第10-11页 |
| ·抗原与分型 | 第11页 |
| ·病毒培养 | 第11-12页 |
| ·理化抗性 | 第12页 |
| 2.轮状病毒结构与功能 | 第12-14页 |
| ·病毒核蛋白的功能 | 第12页 |
| ·病毒结构蛋白的功能 | 第12-13页 |
| ·非结构蛋白的功能 | 第13-14页 |
| 3.A组轮状病毒流行病学研究 | 第14-15页 |
| ·传染源 | 第14页 |
| ·传播途径 | 第14页 |
| ·易感人群 | 第14页 |
| ·流行特征 | 第14-15页 |
| ·GARV全球主要流行血清型及变化趋势 | 第15页 |
| 4.G9型轮状病毒的流行病学研究 | 第15-19页 |
| ·G9型RV流行趋势调查 | 第15-17页 |
| ·G9型轮状病毒的流行特征总结 | 第17-18页 |
| ·我国G9型HRV研究现状 | 第18-19页 |
| 5.轮状病毒疫苗的研制现状 | 第19-20页 |
| ·单价疫苗的研制 | 第19页 |
| ·多价疫苗的研制 | 第19-20页 |
| ·VP4和VP7结合的重组疫苗的研制 | 第20页 |
| ·基因工程疫苗的研制 | 第20页 |
| 6.轮状病毒的反向遗传学研究 | 第20-24页 |
| ·反向遗传学系统的建立 | 第21-22页 |
| ·轮状病毒反向遗传系统的研究现状 | 第22页 |
| ·轮状病毒反向遗传学研究的意义 | 第22-24页 |
| 第二章 G9型轮状病毒分离培养及vp7进化研究 | 第24-34页 |
| 1 材料与方法 | 第25-28页 |
| ·腹泻儿童粪便标本 | 第25页 |
| ·细胞株 | 第25页 |
| ·引物 | 第25页 |
| ·聚丙烯酰胺电泳(PAGE)检测轮状病毒 | 第25-26页 |
| ·轮状病毒CC-1株的分离培养 | 第26页 |
| ·轮状病毒CC-1株RNA的抽提与纯化 | 第26-27页 |
| ·轮状病毒CC-1株vp7基因RT-PCR扩增 | 第27页 |
| ·CC-1 vp7基因的克隆 | 第27页 |
| ·CC-1 vp7基因克隆质粒鉴定 | 第27页 |
| ·CC-1 vp7基因测序与序列分析 | 第27-28页 |
| 2.结果 | 第28-31页 |
| ·腹泻粪便标本PAGE检测结果 | 第28页 |
| ·CC-1株的分离培养 | 第28-29页 |
| ·C-1株vp7基因RT-PCR扩增 | 第29页 |
| ·CC-1株vp7基因克隆载体鉴定 | 第29-31页 |
| 3.讨论 | 第31-33页 |
| ·A组轮状病毒CC-1 vp7核酸序列及氨基酸序列分析 | 第31-32页 |
| ·CC-1株在G9型轮状病毒中的进化地位 | 第32-33页 |
| 4.小结 | 第33-34页 |
| ·小结一 | 第33页 |
| ·小结二 | 第33-34页 |
| 第三章 A组轮状病毒全长vp7基因转录载体的构建 | 第34-46页 |
| 1.材料与方法 | 第35-37页 |
| ·引物 | 第35-36页 |
| ·细胞与痘病毒毒株 | 第36页 |
| ·vp7基因扩增与克隆 | 第36页 |
| ·HDV核酶基因克隆 | 第36-37页 |
| ·pGEMvp7-Rz载体构建 | 第37页 |
| ·pGEMvp7-Rz转染Vero细胞 | 第37页 |
| 2.结果 | 第37-44页 |
| ·pGEMvp7的克隆与鉴定 | 第37-39页 |
| ·HDV核酶质粒pGEMRz克隆与鉴定 | 第39-40页 |
| ·vp7全长cDNA转录载体pGEMvp7-Rz的克隆与鉴定 | 第40-44页 |
| ·pGEMvp7-Rz在Vero细胞内转录 | 第44页 |
| 3.讨论 | 第44-45页 |
| ·利用重叠延伸技术对比较大的DNA片段之间进行重组 | 第44页 |
| ·利用HDV核酶的自动剪切功能 | 第44-45页 |
| ·转染细胞总RNA RT-PCR实验结果证实质粒pGEMTvp7Rz在转染vero细胞后能够完成vp7转录与自动剪切 | 第45页 |
| 4.小结 | 第45-46页 |
| 第四章A组轮状病毒减毒重配株的构建 | 第46-53页 |
| 1.材料与方法 | 第47-48页 |
| ·病毒 | 第47页 |
| ·转录载体质粒 | 第47页 |
| ·细胞 | 第47页 |
| ·单克隆抗体 | 第47页 |
| ·vTF7-3扩增及效价测定 | 第47-48页 |
| ·补骨脂素-紫外线A处理重组痘病毒 | 第48页 |
| ·Vero细胞感染、转染 | 第48页 |
| ·重配株的筛选 | 第48页 |
| 2.结果 | 第48-51页 |
| ·vTF7-3的病变效应及效价 | 第48-49页 |
| ·补骨脂素-紫外线A处理对vTF7-3复制的影响 | 第49-50页 |
| ·重配株的筛选 | 第50-51页 |
| 3.讨论 | 第51-52页 |
| 4.小结 | 第52-53页 |
| ·小结一 | 第52页 |
| ·小结二 | 第52-53页 |
| 总结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 硕士研究生期间发表论文和获得的成果 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
