摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
1 前言 | 第10-19页 |
·外来入侵植物 | 第10-11页 |
·外来入侵植物概况 | 第10页 |
·外来植物入侵途径及其成灾机制 | 第10-11页 |
·外来入侵植物的危害及防治 | 第11页 |
·飞机草 | 第11-15页 |
·飞机草的生物特性 | 第11-12页 |
·飞机草的分布 | 第12页 |
·飞机草的危害及防治 | 第12-13页 |
·飞机草的利用 | 第13页 |
·飞机草的化感作用 | 第13-14页 |
·飞机草的生理和分子生物学研究 | 第14-15页 |
·细胞色素P450 | 第15-18页 |
·细胞色素P450的分布和功能 | 第15-16页 |
·植物细胞色素P450基因的克隆、鉴定与表达 | 第16-18页 |
·本研究课题的目的 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-36页 |
·试验材料 | 第19页 |
·主要实验仪器 | 第19页 |
·培养基及各种溶液的种类、组成与配制 | 第19-20页 |
·细菌培养基 | 第19页 |
·常用溶液及缓冲液 | 第19-20页 |
·抗生素 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-36页 |
·引物设计 | 第20-21页 |
·RNA提取 | 第21-23页 |
·RNA反转录 | 第23-26页 |
·PCR | 第26-29页 |
·PCR扩增产物检测 | 第29页 |
·PCR产物回收纯化和胶回收 | 第29-31页 |
·感受态制备 | 第31-32页 |
·连接 | 第32-33页 |
·转化 | 第33页 |
·小量质粒提取 | 第33-35页 |
·酶切验证 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-69页 |
·RNA提取分析 | 第36-39页 |
·异硫氰酸胍法提取飞机草总RNA | 第36页 |
·CTAB法提取不同植物RNA的比较 | 第36-37页 |
·Trizol法、异硫氰酸胍法提取飞机草RNA比较 | 第37-38页 |
·三种提取方法所获得的RNA质量分析 | 第38-39页 |
·飞机草细胞色素P450 CYP75基因cDNA全长的克隆与鉴定 | 第39-61页 |
·飞机草细胞色素P450 CYP75基因cDNA中间片段的克隆与鉴定 | 第39-42页 |
·飞机草细胞色素P450 CYP75基因cDNA3'RACE | 第42-47页 |
·飞机草细胞色素P450 CYP75基因cDNA5'RACE | 第47-51页 |
·飞机草细胞色素P450 CYP75基因cDNA剩余5'端部分的克隆 | 第51-53页 |
·飞机草细胞色素P450 CYP75基因cDNA全长的拼接及功能分析 | 第53-61页 |
·泽兰细胞色素P450 CYP75基因cDNA片段的克隆与鉴定 | 第61-65页 |
·泽兰细胞色素P450 CYP75基因cDNA中间片段克隆与鉴定 | 第61-62页 |
·泽兰细胞色素P450 CYP75基因cDNA3'RACE | 第62-65页 |
·佩兰细胞色素P450 CYP75基因cDNA片段的克隆 | 第65-69页 |
·佩兰细胞色素P450 CYP75基因cDNA中间片段的克隆与鉴定 | 第65-66页 |
·佩兰细胞色素P450 CYP75基因cDNA3'RACE | 第66-69页 |
4 讨论 | 第69-72页 |
·飞机草总RNA提取方法 | 第69页 |
·PCR优化 | 第69-70页 |
·飞机草、佩兰、泽兰细胞色素P450 CYP75基因cDNA中间片段的同源性 | 第70页 |
·飞机草细胞色素P450 CYP75基因cDNA全长的克隆 | 第70-71页 |
·佩兰、泽兰细胞色素P450 CYP75基因cDNA片段的克隆 | 第71-72页 |
5 研究结论 | 第72-74页 |
·飞机草总RNA的提取 | 第72页 |
·飞机草、泽兰、佩兰细胞色素P450 CYP75基因cDNA中间片段的克隆 | 第72页 |
·泽兰、佩兰细胞色素P450 CYP75基因cDNA3'RACE | 第72页 |
·飞机草细胞色素P450 CYP75基因cDNA全长的克隆 | 第72-74页 |
致谢 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-81页 |
附录 | 第81-90页 |