| 致谢 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| 1 三种饲用酶及双功能蛋白融合技术的研究现状 | 第13-29页 |
| ·木聚糖酶的研究现状 | 第13-17页 |
| ·木聚糖酶来源、结构与分类 | 第14-15页 |
| ·木聚糖酶的作用机理 | 第15-16页 |
| ·木聚糖酶的生化特性 | 第16页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第16-17页 |
| ·β-葡聚糖酶研究现状 | 第17-20页 |
| ·β-葡聚糖酶来源、结构与分类 | 第18-19页 |
| ·β-葡聚糖酶作用机理 | 第19页 |
| ·β-葡聚糖酶的生化特性 | 第19页 |
| ·β-葡聚糖酶的应用 | 第19-20页 |
| ·植酸酶的研究现状 | 第20-23页 |
| ·植酸酶来源、结构与分类 | 第21-22页 |
| ·植酸酶反应机理 | 第22页 |
| ·植酸酶生化特性 | 第22-23页 |
| ·植酸酶应用 | 第23页 |
| ·蛋白质融合技术研究进展 | 第23-28页 |
| ·蛋白质间接融合技术 | 第24-25页 |
| ·蛋白质直接融合技术 | 第25-26页 |
| ·头尾相连融合和插入融合 | 第26-27页 |
| ·连接肽蛋白融合的影响 | 第27-28页 |
| ·选题依据与研究目标 | 第28-29页 |
| 2 β-葡聚糖酶-木聚糖酶与β-葡聚糖酶-植酸酶的无连接肽融合 | 第29-40页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·载体和菌株 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29-30页 |
| ·试剂配置 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-35页 |
| ·β-葡聚糖酶-木聚糖酶融合酶基因的构建 | 第30-32页 |
| ·β-葡聚糖酶-植酸酶融合酶基因的构建 | 第32页 |
| ·融合酶基因gx和gp重组表达载体的构建 | 第32页 |
| ·融合蛋白双功能酶活鉴定 | 第32-33页 |
| ·融合蛋白SDS-PAGE鉴定 | 第33页 |
| ·融合蛋白gx及其亲本酶的纯化 | 第33-34页 |
| ·酶特性分析 | 第34-35页 |
| ·结果 | 第35-38页 |
| ·融合酶基因gx和gp的构建 | 第35页 |
| ·融合基因重组表达载体的构建 | 第35页 |
| ·融合蛋白的表达鉴定 | 第35-36页 |
| ·融合蛋白gx及其亲本酶的纯化 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 3 β-葡聚糖酶-木聚糖酶融合酶基因的连接肽优化及其表达 | 第40-46页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·载体和菌株 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-43页 |
| ·融合基因的构建 | 第40-42页 |
| ·融合基因表达载体的构建和表达 | 第42-43页 |
| ·融合蛋白β-葡聚糖酶和木聚糖酶活鉴定 | 第43页 |
| ·融合蛋白的SDS-PAGE鉴定 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-45页 |
| ·融合基因的构建与测序 | 第43-44页 |
| ·融合基因重组表达载体的构建 | 第44页 |
| ·融合蛋白的表达鉴定 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 4 β-葡聚糖酶-木聚糖酶融合蛋白的纯化及其酶特性分析 | 第46-54页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·菌株 | 第46页 |
| ·试剂与培养基 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-47页 |
| ·双功能融合酶的纯化 | 第46-47页 |
| ·酶谱分析 | 第47页 |
| ·功能融合酶特性分析 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-51页 |
| ·双功能融合酶的纯化 | 第47-48页 |
| ·酶谱分析 | 第48页 |
| ·酶特性分析 | 第48-51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| 5 β-葡聚糖酶-植酸酶融合酶基因的优化构建及其表达 | 第54-59页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·载体和菌株 | 第54页 |
| ·试剂 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·β-葡聚糖酶-植酸酶融合酶基因的构建 | 第54-56页 |
| ·融合基因表达载体的构建和表达 | 第56页 |
| ·融合蛋白β-葡聚糖酶和植酸酶酶活鉴定 | 第56页 |
| ·融合蛋白的SDS-PAGE鉴定 | 第56页 |
| ·结果 | 第56-57页 |
| ·融合基因的构建与测序 | 第56页 |
| ·融合基因重组表达载体的构建 | 第56-57页 |
| ·融合蛋白的表达鉴定 | 第57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 6 结语 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| Summary | 第70-73页 |
| 附件:攻读学位期间的主要成果 | 第73页 |
