| 摘要 | 第1页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 详细摘要 | 第11-21页 |
| 英文缩写表 | 第21-23页 |
| 绪言 | 第23-27页 |
| 第一部分 MAPC的分离、培养、鉴定及诱导分化 | 第27-41页 |
| 一 前言 | 第27页 |
| 二 材料和方法 | 第27-33页 |
| (一) 试剂和设备 | 第27-28页 |
| (二) MAPC纯化、扩增、鉴定及诱导分化 | 第28-33页 |
| 1、MAPC的分离、纯化 | 第28-29页 |
| 2、MAPC的培养 | 第29页 |
| 3、MAPC的传代培养 | 第29页 |
| 4、MAPC生长曲线绘制 | 第29-30页 |
| 5、MAPC的流式细胞技术检测 | 第30页 |
| 6、MAPC表面标志的免疫荧光检测 | 第30页 |
| 7、MAPC超微结构分析 | 第30页 |
| 8、MAPC向平滑肌样细胞的诱导分化 | 第30-33页 |
| 三 结果 | 第33-38页 |
| (一) CD45~-细胞原代培养 | 第33-34页 |
| (二) 细胞传代培养 | 第34页 |
| (三) MAPC的生长曲线 | 第34-35页 |
| (四) 流式细胞技术检测 | 第35页 |
| (五) 细胞的表面标志的免疫荧光检测 | 第35-36页 |
| (六) 细胞的超微结构 | 第36-37页 |
| (七) MAPC向平滑肌样细胞的诱导分化 | 第37-38页 |
| 四 讨论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-41页 |
| 第二部分 EPC的分离、培养、鉴定及诱导分化 | 第41-57页 |
| 一 前言 | 第41页 |
| 二 材料和方法 | 第41-47页 |
| (一) 试剂和仪器设备 | 第41-43页 |
| (二) 方法 | 第43-47页 |
| 1、细胞的分离、纯化 | 第43页 |
| 2、分选细胞的培养扩增 | 第43-44页 |
| 3、EPC生长曲线绘制 | 第44页 |
| 4、流式细胞技术检测 | 第44页 |
| 5、细胞表面标志的免疫荧光检测 | 第44-45页 |
| 6、RT-PCR检测 | 第45-47页 |
| 7、EPC的超微结构检测 | 第47页 |
| 8、向内皮细胞的诱导分化 | 第47页 |
| 三 结果 | 第47-53页 |
| (一) 细胞原代培养 | 第47-48页 |
| (二) 细胞传代培养 | 第48页 |
| (三) EPC生长曲线 | 第48-49页 |
| (四) 流式细胞技术检测 | 第49-50页 |
| (五) 细胞的表面标志的免疫荧光检测 | 第50-51页 |
| (六) RT-PCR检测 | 第51-52页 |
| (七) EPC的超微结构 | 第52页 |
| (八) 向内皮细胞的诱导分化 | 第52-53页 |
| 四 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第三部分 同种异体脱细胞静脉瓣支架的制备 | 第57-68页 |
| 一 前言 | 第57页 |
| 二 材料和方法 | 第57-60页 |
| (一) 试剂和仪器设备 | 第57-58页 |
| (二) 同种异体脱细胞静脉瓣支架的制备 | 第58-59页 |
| (三) 脱细胞支架形态学检测 | 第59页 |
| (四) 免疫组织化学染色 | 第59-60页 |
| 三 结果 | 第60-64页 |
| (一) 形态学检测 | 第60-62页 |
| 1、大体观察 | 第60-61页 |
| 2、H-E染色 | 第61页 |
| 3、胶原纤维、弹力纤维染色 | 第61-62页 |
| 4、扫描电镜 | 第62页 |
| (二) 力学特性 | 第62-63页 |
| (三) 免疫组织化学染色 | 第63-64页 |
| 四 讨论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 第四部分 MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的体外构建 | 第68-83页 |
| 一 前言 | 第68-69页 |
| 二 材料和方法 | 第69-72页 |
| (一) 试剂和仪器设备 | 第69-70页 |
| (二) 方法 | 第70-72页 |
| 1、组织工程化静脉瓣的构建 | 第70页 |
| 2、构建的MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的大体观察 | 第70页 |
| 3、H-E染色检测 | 第70页 |
| 4、胶原纤维、弹力纤维染色(Masson法) | 第70-71页 |
| 5、扫描电镜检测 | 第71页 |
| 6、透射电镜观察 | 第71页 |
| 7、生物力学检测 | 第71-72页 |
| 8、免疫组织化学染色 | 第72页 |
| 三 结果 | 第72-79页 |
| (一) 组织工程化静脉瓣的形态结构 | 第73-76页 |
| 1、构建静脉瓣的大体观察 | 第73页 |
| 2.H-E染色 | 第73-74页 |
| 3.胶原纤维、弹力纤维染色 | 第74页 |
| 4.扫描电镜检测 | 第74-76页 |
| 5.透射电镜检测 | 第76页 |
| (二) 生物力学检测结果 | 第76-78页 |
| (三) 免疫组织化学染色 | 第78-79页 |
| 四 讨论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
| 第五部分 组织工程化静脉瓣的在体研究 | 第83-99页 |
| 一 前言 | 第83页 |
| 二 材料和方法 | 第83-86页 |
| (一) 试剂和仪器设备 | 第83-84页 |
| (二) 方法 | 第84-86页 |
| 1、实验动物分组 | 第84页 |
| 2、手术移植 | 第84-85页 |
| 3、彩色超声检查 | 第85页 |
| 4、小动物显微超声成像 | 第85页 |
| 5、数字减影血管造影检查 | 第85页 |
| 6、标本获取、形态学观察 | 第85页 |
| 7、免疫组织化学染色 | 第85-86页 |
| 三 结果 | 第86-96页 |
| (一) 整体动物观测 | 第86-87页 |
| (二) 彩色超声多普勒检查 | 第87-88页 |
| (三) 小动物显微超声成像 | 第88-89页 |
| (四) 逆行性数字减影血管造影 | 第89-90页 |
| (五) 形态学观察 | 第90-92页 |
| 1、大体观察 | 第90-91页 |
| 2、H-E染色观察 | 第91-92页 |
| (六) 免疫组织化学染色 | 第92-96页 |
| 四 讨论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-99页 |
| 全文小结 | 第99页 |
| 本课题的创新点和意义 | 第99-100页 |
| 文献综述 | 第100-105页 |
| 在读期间发表论文、申请基金和专利申请 | 第105-107页 |
| 致谢 | 第107页 |