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黄牛孤雌胚胎体外培养体系的优化及体细胞核移植胚构建初探

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-13页
文献综述第13-42页
 第一章 哺乳动物卵母细胞体外成熟和早期胚胎体外培养的研究进展第13-30页
   ·哺乳动物卵母细胞体外成熟的研究进展第13-22页
     ·卵泡卵母细胞的获得第13-14页
     ·卵母细胞成熟的机理第14-16页
     ·卵母细胞成熟的标志第16-17页
     ·卵母细胞成熟的判断第17页
     ·卵母细胞体外成熟的影响因素第17-22页
     ·存在的问题和展望第22页
   ·哺乳动物早期胚胎体外培养的研究进展第22-30页
     ·研究概况第22-23页
     ·早期胚胎的发育阻滞第23-24页
     ·胚胎体外培养方法第24-26页
     ·影响早期胚胎体外发育的因素第26-29页
     ·存在的问题与展望第29-30页
 第二章 哺乳动物体细胞核移植研究进展第30-42页
   ·哺乳动物细胞核移植研究概况第30-31页
     ·胚胎细胞核移植第30页
     ·同种体细胞核移植第30-31页
   ·核移植的基本程序第31-34页
     ·供体细胞的选择第31-32页
     ·受体细胞的选择和去核第32-33页
     ·供体细胞与受体细胞重组第33页
     ·重组胚的激活第33-34页
     ·重组胚的体外培养第34页
   ·哺乳动物核移植相关机理的研究第34-37页
     ·供体核与受体胞质的相互作用第34-35页
     ·供体核的重编程第35-37页
   ·影响核移植效率的因素第37-40页
     ·细胞周期同步化对核移植胚的影响第37-38页
     ·卵母细胞成熟质量对核移植胚的影响第38页
     ·供体细胞对核移植胚的影响第38-40页
     ·去核操作对核移植胚的影响第40页
     ·融合-激活方案对核移植胚的影响第40页
   ·体细胞核移植存在的问题第40-42页
     ·总效率低,成本高第40-41页
     ·流产率高,产仔率低第41页
     ·动物出生体重过大,死亡率高第41-42页
实验研究第42-72页
 第三章 黄牛卵母细胞的体外成熟培养第42-50页
   ·材料第42-43页
     ·牛卵巢的采集第42页
     ·主要试剂第42-43页
     ·主要仪器第43页
   ·方法第43-44页
     ·牛卵丘-卵母细胞复合体的回收第43页
     ·卵母细胞的体外成熟培养第43页
     ·成熟卵母细胞孤雌激活和孤雌胚的体外培养第43-44页
     ·试验设计第44页
     ·数据分析第44页
   ·结果第44-47页
     ·不同浓度HMG 对牛卵母细胞体外成熟的影响第44-45页
     ·ITS 对牛卵母细胞体外成熟的影响第45页
     ·卵巢保存温度对牛卵母细胞体外成熟的影响第45-46页
     ·卵巢保存时间对牛卵母细胞体外成熟的影响第46页
     ·卵巢所处性周期阶段对牛卵母细胞体外成熟的影响第46-47页
   ·讨论第47-49页
     ·不同浓度HMG 对牛卵母细胞体外成熟的影响第47页
     ·ITS 对牛卵母细胞体外成熟的影响第47-48页
     ·卵巢保存温度对牛卵母细胞体外成熟的影响第48页
     ·卵巢保存时间对牛卵母细胞体外成熟的影响第48页
     ·卵巢所处性周期阶段对牛卵母细胞体外成熟的影响第48-49页
   ·小结第49-50页
 第四章 黄牛孤雌胚胎体外培养体系的优化第50-59页
   ·材料第50页
     ·牛卵巢的采集第50页
     ·主要试剂第50页
     ·主要仪器第50页
   ·方法第50-52页
     ·卵丘卵母细胞复合体(COCs)的获得与体外成熟培养第50-51页
     ·成熟卵母细胞的孤雌激活和孤雌胚的体外培养第51页
     ·试验设计第51-52页
     ·数据处理第52页
   ·结果第52-55页
     ·不同微滴体积对黄牛孤雌胚体外发育的影响第52页
     ·不同换液体积对黄牛孤雌胚体外发育的影响第52-53页
     ·血清灭活对黄牛孤雌胚体外发育的影响第53页
     ·不同添加血清时间对黄牛孤雌胚体外发育的影响第53-54页
     ·不同添加血清浓度对黄牛孤雌胚体外发育的影响第54页
     ·不同培养体系对黄牛孤雌胚体外发育的影响第54-55页
   ·讨论第55-58页
     ·不同微滴体积对黄牛孤雌胚体外发育的影响第55页
     ·不同换液体积对黄牛孤雌胚体外发育的影响第55-56页
     ·血清灭活对黄牛孤雌胚体外发育的影响第56页
     ·血清添加时间和添加浓度对黄牛孤雌胚体外发育的影响第56-57页
     ·不同培养体系对黄牛孤雌胚体外发育的影响第57-58页
   ·小结第58-59页
 第五章 颗粒细胞单层对黄牛孤雌胚体外发育的影响第59-67页
   ·材料第59页
     ·牛卵巢的采集第59页
     ·主要试剂第59页
     ·主要仪器第59页
   ·方法第59-61页
     ·卵丘卵母细胞复合体(COCs)的获得与体外成熟培养第59-60页
     ·颗粒细胞单层的制备第60页
     ·成熟卵母细胞的孤雌激活和孤雌胚的体外培养第60页
     ·试验设计第60-61页
     ·数据处理第61页
   ·结果第61-64页
     ·有无颗粒细胞单层对黄牛孤雌胚胎体外发育的影响第61页
     ·不同类型的颗粒细胞单层对黄牛孤雌胚胎体外发育的影响第61-62页
     ·不同种属的颗粒细胞单层对黄牛孤雌胚胎体外发育的影响第62页
     ·颗粒细胞单层体外培养时间对黄牛孤雌胚胎体外发育的影响第62-63页
     ·不同时间更换单层对黄牛孤雌胚胎体外发育的影响第63-64页
   ·讨论第64-66页
     ·有无颗粒细胞单层对黄牛孤雌胚体外发育的影响第64页
     ·不同类型颗粒细胞单层对黄牛孤雌胚体外发育的影响第64页
     ·不同种属的颗粒细胞单层对黄牛孤雌胚胎体外发育的影响第64-65页
     ·颗粒细胞单层体外培养时间对黄牛孤雌胚胎体外发育的影响第65页
     ·不同时间更换单层对黄牛孤雌胚胎体外发育的影响第65-66页
   ·小结第66-67页
 第六章 黄牛体细胞核移植胚的构建初探第67-72页
   ·材料第67-68页
     ·牛卵巢的采集第67页
     ·主要试剂第67-68页
     ·主要仪器第68页
   ·方法第68-69页
     ·卵丘卵母细胞复合体(COCs)的获得与体外成熟培养第68页
     ·卵母细胞的去核第68页
     ·供体细胞的准备第68页
     ·核移植胚的构建第68-69页
     ·核移植胚的激活第69页
     ·核移植胚的体外培养第69页
     ·试验设计第69页
     ·数据处理第69页
   ·结果第69-70页
     ·不同成熟时间对核移植胚胎体外发育的影响第69-70页
     ·不同核/质作用时间对核移植胚胎体外发育的影响第70页
   ·讨论第70-71页
     ·不同体外成熟培养时间对核移植胚胎体外发育的影响第70-71页
     ·不同核/质作用时间对核移植胚胎体外发育的影响第71页
   ·小结第71-72页
全文结论第72-73页
参考文献第73-89页
附录第89-92页
缩略词第92-93页
致谢第93-94页
个人简介第94页

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